冯章丽 何柳
(遵义师范学院生物与农业科技学院,563006)
蜜蜂幼虫和雄蜂蛹富含蛋白酶、淀粉酶、几丁质酶等多种酶,含有保幼激素、蜕皮激素等生物活性物质,它们既可以作为食物,又可以作为营养保健品[1]。近年来,随着人们生活水平的提高,对蜜蜂幼虫和雄蜂蛹的营养保健价值和医疗功效认识不断深化,对优质雄峰幼虫和雄蜂蛹产品的需求量逐渐增加。目前,许多蜂王幼虫、工蜂幼虫和雄蜂蛹的新用途的挖掘[2,3],雄蜂蛹的吃法从直接食用衍生到制成食品和保健酒以及与其他食品原料混合配制成各种营养食品等[4]。
尽管蜜蜂幼虫和蛹的开发利用还处于起步阶,但前人围绕其产品的营养价值已开展相关研究。相关数据表明,蜂王幼虫能促进幼鼠生长,生长速率与食用蜂王幼虫的数量呈正相关[5]。蜂王幼虫肽具有调节免疫和延缓衰老的生物活性,具有抗衰老功能[6]。然而,至今为止,有关生产优质雄蜂幼虫和雄蜂蛹的时间还不太清楚。对蜂巢内自然发育成幼虫的分化时间进行调查,是确定获得雄蜂幼虫和雄蜂蛹的最佳时间的关键。基于此,本研究以中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫和雄蜂蛹为研究对象,探究不同时间段的雄蜂幼虫和雄蜂蛹价值,研究结果旨在为优质雄蜂蛹的开发和利用提供数据参考。
中华蜜蜂蜂群,眼科镊、深色塑料泡沫板、装有酒精的小喷壶、解剖刀等。
1.2.1 选择实验蜂群
在大流蜜期,选择老蜂王,且有分蜂意念、无病害的中华蜜蜂强群。
1.2.2 配置糖水
将静止3d 的自来水烧沸,待自然冷却后,先在容量为1L 的烧杯里加入200mL 的蜂蜜,再倒入上述的凉开水400mL 搅拌均匀,蜂蜜充分溶解后装到1L的塑料瓶里放到冰箱保鲜层备用。
1.2.3 雄蜂巢脾的制备
取1 张中华蜜蜂的工蜂巢础,沿宽边1/3 和2/3处将该巢脾分为3 块,选择其中的1 块巢础,将其长边固定在巢框上梁的凹槽内,并用电热巢础埋线器将巢础固定在巢框上,制成有1/3 蜂巢础的巢框,以下简称1/3 巢础框。
于下午气温最高的时候(14∶00 左右),打开蜂箱放入1/3 巢础框。抽出原有蜂群的边脾1 张,抖出,迅速把1/3 巢础框加到蜂群边二脾位置,同时调整蜂路约为0.8cm,并按照打开蜂箱时的顺序,相反操作,盖好蜂箱。
放入1/3 巢础框的当天傍晚,用备好的糖浆100~200mL 奖励饲喂蜂群,同时饲喂少量食盐水,通过这种奖励饲喂来刺激工蜂加高半巢础工蜂房的同时在巢础下缘筑造雄蜂巢脾。让上述1/3 巢础框在蜂群内筑造3d,每天进行奖励饲喂。放入巢础框的第4天打开蜂箱取出1/3 巢础框,1/3 巢础框在蜂群内经过工蜂3d 的筑造,在1/3 巢础框内的工蜂巢础下缘已经有了足够数量的雄蜂巢房,此时有雄蜂巢房的1/3 巢础框以下就称为“雄蜂巢脾”。在这些雄蜂巢脾的雄蜂巢房内有蜂王产下的未受精卵,这些未受精卵的日龄很难确保一致,不能用于实验,因此需要把该雄蜂巢脾提起、抖蜂后,迅速放置在-15℃的冰柜内5h,目的是将雄蜂巢房中的未受精卵冻死,5h 后小心取出该雄蜂巢脾放置在室温下,等雄蜂巢脾的温度恢复到室温后备用。
1.2.4 放置雄蜂巢脾
在下午气温最高(14∶00 左右)的时候再打开蜂箱,移开隔板和紧挨着的边一脾,接着依次从边二脾开始逐脾寻找老蜂王,找到老蜂王后迅速用竹塑王笼把老蜂王囚禁,随后在蜂箱内选出1 张很少空房的卵虫脾,并将该卵虫脾放到蜂箱内远离隔板的边脾位置,紧接着把备用的雄蜂巢脾加入到该卵虫脾旁的边二脾位置,调整好蜂路,用立式隔王板将雄蜂巢脾和卵虫脾与其他巢脾隔离开,同时将其他巢脾和隔板恢复,同上述一样调整蜂路。再将用竹塑王笼囚禁的老蜂王放入到有雄蜂巢脾的区域,迫使蜂王在该雄蜂巢脾上产1d 的未受精卵,为了防止蜂王经过立式隔王板上端与铁纱盖之间的空隙跑到另一侧,先将铁纱盖翻转180°后盖上,再盖好蜂箱。
等老蜂王在雄蜂巢脾上产卵1d 后,及时将上述雄蜂巢脾区域的老蜂王移到立式隔王板的另一侧,以保证雄蜂巢脾内的未受精卵日龄一致。移开蜂王后,因为中华蜜蜂的雄蜂幼虫发育到第7 天末开始封盖,第8 天完成封盖,所以在幼虫发育到第6 天时就要每天查看雄蜂巢脾。等未封盖的雄蜂幼虫发育到第8 日(即从封盖完成的第1 日),就在每天下午气温最高(14∶00 左右)的时候取雄蜂封盖幼虫进行观察。
1.2.5 实验操作
平放好深色塑料泡沫板,打开蜂箱,移动隔板和蜂王产卵区的巢脾到蜂箱另一侧,再将立式隔王板轻轻挪动一点距离,接着把上述的实验雄蜂巢脾垂直于水平面轻轻提起,左手紧紧捏住雄蜂巢脾的左侧框耳,并把雄蜂巢脾下梁的右端放在在其他巢脾具有少量赘脾的框梁上(防滑),再以该雄蜂巢脾右下梁和左手接触点的连线为轴,顺时针将雄蜂巢脾微微转动,把需要采集雄蜂封盖幼虫或雄蜂蛹的一面向上,找到该实验雄蜂巢脾上已经封盖的雄蜂房区域,并在该区域边缘上选定一个位置,把该位置上的工蜂吹散开,随后在上述位置内选定一个雄蜂封盖幼虫,用眼科镊子轻轻将雄蜂封盖幼虫的房盖揭开,接着用眼科镊尖端轻轻破坏掉该雄蜂封盖幼虫的巢房侧壁,将该巢房侧壁破坏到能够顺利取出该雄蜂封盖幼虫后,再用眼科镊尖端夹住巢房内的雄蜂封盖幼虫,将其缓慢提起放在深色塑料泡沫板上。该过程需要十分小心,防止弄破虫体,虫体一旦被弄破就要重新在紧挨着该位置的巢房内取出一只相同日龄的雄蜂封盖幼虫。重复上述步骤取完2~3 只雄蜂封盖幼虫或雄蜂蛹后,放好镊子,把该雄蜂巢脾垂直放回蜂箱内原来边二脾的位置,接着轻轻挪动立式隔王板、其余巢脾和隔板使其复位,保持原有蜂路。随后移走放有雄蜂封盖幼虫或雄蜂蜂蛹的深色塑料泡沫板,蜂箱恢复原状。
完成取雄蜂封盖幼虫或雄蜂蜂蛹之后,先观察虫体外观,并用铁三角架固定相机位置拍摄虫体的照片,随后在深色塑料泡沫板上用解剖刀轻轻地将虫体解剖,观察虫体内部的食物残留情况,并用同样方法拍摄虫体的内脏解剖结构,结束当天观察。每天的同一时间都按上述方法,在紧挨着前一天取雄蜂封盖幼虫或雄蜂蜂蛹巢房位置的旁边取2~3 只,直到上述同一日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫羽化出房为止。
1 日龄与2 日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫,虫体均呈乳白色,个体大小无明显差异,虫体体表均未形成几丁质(图1 中A,B)。通过解剖观察1 日龄(A-2)的雄蜂封盖幼虫,发现虫体肠道内还含有未消化的食物。第2 日下午同一时间取出2 日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫解剖观察(B-2),发现此时封盖幼虫体内食物已经被完全消化。3~5 日龄(图1 中C)中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫的虫体与1 日龄和2 日龄的在体色上相同,虫体体表同样未形成几丁质。但3~5 日龄的幼虫在封盖的雄蜂巢房内进一步发育,与1 日龄和2日龄的封盖幼虫相比3~5 日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫体内的水分有少部分损失,在取的时候相对容易。综上所述1 日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫体内还含有未消化的食物,不宜食用,但2~5 日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫,体内没有未消化的食物,且虫体体表没有几丁质,品质最好,食用口感最佳,因此笔者把2日龄到5 日龄的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫定为中华蜜蜂特级封盖雄蜂幼虫。
6 日龄和7 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹(图1 中D)的虫体依旧呈现乳白色,其胸、腹部表面开始出现薄薄的几丁质,此时的雄蜂蛹与上述特级封盖雄蜂幼虫的体色、口感、营养等均无明显差异,但此时的雄蜂蛹已经发育出头、胸、腹、触角、足等,该雄蜂蛹加工成产品时触角、足会掉落,从而影响雄蜂蛹产品的品相,笔者将6 日龄和7 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹定为中华蜜蜂一级雄蜂蛹。
8 日龄~10 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹(图1 中E)眼睛均呈现淡淡的棕红色,虫体颜色由乳白色转变为米白色。随着虫体的发育,虫体的眼睛、胸部和腹部的腹面颜色逐渐加深,并且虫体的体表面几丁质明显加厚,其品质和口感均不及一级,因此笔者将8 日龄~10 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹定为中华蜜蜂二级雄蜂蛹。
11 龄~13 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹(图1 中F)随着虫体发育,11 日龄蛹的胸部和腹部腹面开始由米黄逐渐变为深黄色,到13 日龄时,虫体的胸、腹部全部变为灰黑色,虫体体表几丁质加进一步加厚,13 日龄的雄蜂蛹背部出现雏翅,已经接近羽化,此时的雄蜂蛹不论是虫体外观上,还是食用口感上都比上述的特级蛹、一级蛹和二级蛹要差,因此笔者将11 龄到13 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹定为中华蜜蜂三级雄蜂蛹。
14 日龄的中华蜜蜂雄蜂蛹(图1 中G)虫体已经羽化,虫体与成熟的雄蜂个体外观上基本无差异。此时的中华蜜蜂雄蜂蛹已不宜食用。
图1 不同日龄雄蜂封盖幼虫和雄蜂蛹的形态变化
本实验明确从制作中华蜜蜂雄蜂巢脾到取特级封盖雄蜂幼虫和一级蛹的最佳时间,在中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫和雄蜂蛹的生产上具有一定的参考价值。通过上述方法我们能够精准生产出特级中华蜜蜂封盖雄蜂幼虫和一级的中华蜜蜂雄蜂蛹,提高其品相、口感,具有广阔的市场前景。同时,目前市场上有关中华蜜蜂雄蜂巢础出售的还很少见,可以通过上述方法获得中华蜜蜂的自然雄蜂巢脾,在大流蜜期将其加到强群中,生产中华蜜蜂雄蜂蛹,具有较好的经济价值。经过粗略称量,中华蜜蜂雄蜂巢脾每脾能生产1kg 左右的中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫和雄蜂蛹,每箱强群能加入2 脾上述自然雄蜂巢脾。按照目前市场出售的各级混合新鲜蜜蜂雄蜂蛹价格为260~300 元/kg 计算,每箱强群生产一次中华蜜蜂雄蜂蛹能获得520~600 元的效益。
正常情况下中华蜜蜂雄蜂的封盖幼虫和雄蜂蛹的发育共计13d,气温低时达13.5d,但笔者实验取中华蜜蜂的雄蜂封盖幼虫和雄蜂蛹共计14d。原因是最先在要封盖的前1d 观察最大的未封盖幼虫时,该幼虫已经转体即将封盖,导致实验过程取雄蜂封盖幼虫和雄蜂蛹共计14d,这是本次实验的不足。此外,尽管将中华蜜蜂雄幼虫和雄蜂蛹进行优良等级划分,但各级的营养成分差别大小未确定,营养成分也未开展相关研究,这是下一步我们工作的重点。
中华蜜蜂雄蜂封盖幼虫可在封盖的第2~5 日取得特级封盖雄蜂幼虫;封盖的第6~7 日取得一级雄蜂蛹,在生产上最好取特级雄蜂封盖幼虫和一级的雄蜂蛹增加收入;封盖的第8~9 日取得二级雄蜂蛹;封盖的第11~13 日取得三级雄蜂蛹。