冷凝集素在交叉配血过程中的影响

张薇薇

（沈阳市骨科医院承基医院，辽宁 沈阳 110000）

在对患者实施输血前合理展开交叉配血试验的意义显著，其对于输血安全性可做出充分保证。但是对于此类患者而言，如果血清中表现出较高冷凝集素抗体滴度，则会使得交叉配血困难度显著增加[1-2]。对于冷凝集而言，其主要因为自身抗体导致，于低温条件下红细胞会呈现出凝集成团的情况。通常在＜ 31 ℃的条件下表现出冷凝集反应现象，其最强温度条件主要集中于0～4 ℃，并呈现出最显著的红细胞凝集现象。在温度呈现出一定程度升高后，会逐渐表现出凝块消失以及抗原抗体复合物解离的现象，对此就冷凝集素的影响因素展开针对性分析的意义显 著[3-4]。本次研究将我院2017年3月至2020年2月收治的50例疑难交叉配血凝集患者（因为冷凝集素导致）作为试验对象，合理采用改良凝聚胺法、盐水法、经典抗人球蛋白试验以及微柱凝胶免疫法对特异性抗体实施鉴定，合理展开血清学分析操作，主要探析在实施交叉配血试验期间冷凝集素产生的影响，以对患者输血的安全性做出保证。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将我院2017年3月至2020年2月收治的50例疑难交叉配血凝集患者（因为冷凝集素导致）作为试验对象。其中女29例，男21例；年龄区间为46～71岁，平均为（59.25±2.59）岁。纳入标准：①患者疾病类型主要集中于肿瘤、血透以及发热等方面。②对于临床输血指征均满足。排除标准：①非冷凝集素原因导致呈现出交叉配血凝集现象。②不具备输血指征。

1.2 方法

1.2.1 合理对患者展开交叉配血试验操作 选择2支干燥洁净试管分别完成次管以及主管的标注，准备献血者1滴红细胞悬液（3%～5%）以及受血者2滴血浆于主管中加入；准备受血者1滴红细胞（3%～5%）以及献血者2滴血浆于次管中加入，此外各准备0.6 mL低离子介质溶液于每管中分别加入，将其混匀后，保持1 min室温孵育，且各准备凝聚氨溶液（1滴）于每管中加入，混匀后保持15 s静置。于3 500 r/min转速下离心15 s，去除上清液，静置待表现出沥干现象后，将试管轻轻摇动。观察红细胞是否表现出凝集现象，如呈现出凝集现象，准备1滴重悬液于各管中加入，确保轻轻混合后，对凝集有无散开进行观察，通过显微镜对结果进行判定。

1.2.2 合理对患者展开冷凝集素试验操作 对患者2 mL 静脉血进行采集，于37 ℃条件下进行放置，观察凝固后将血清实施分离。针对患者1 mL抗凝血进行采集，针对红细胞利用温生理盐水实施3次洗涤，最后确保红细胞悬液（2%）成功完成配置。之后选择小试管10支，分别准备0.2 mL生理盐水于各管中加入，准备0.2 mL血清中于第一管中加入，之后保持逐管稀释。在确保混匀后，将0.2 mL去除，对于对照主要采用第10管展开。此外，准备红细胞悬液（0.2 mL，2%）于各管中加入，保持摇匀后，于冰箱（4 ℃）中进行2～4 h放置，之后就具体结果进行观察，针对表现出显著凝集现象的滴度进行认真记录。

2 结果

针对所有患者于临床合理采用凝聚胺法完成交叉配血试验操作，就主管以及次管反应进行观察发现，均表现出程度不同的凝集颗粒现象，呈现出部分显著特点。于37 ℃条件下保持5～10 min水浴，通过轻缓摇动确保颗粒能够缓慢散开，之后于玻片中导入，通过显微镜实施观察发现，红细胞表现出弥漫以及散在排列的现象，针对其他亚型抗体造成免疫反应影响结果可以顺利排除，成功完成交叉配血。准备O型正常人红细胞于患者血清中加入，最终发现在＜32 ℃表现出凝集现象；在4 ℃时表现出的凝集现象明显，之后逐渐升高温度，直至37 ℃进行观察，发现凝集均全部消失。对凝集素抗体滴度实施认真测定，就最终结果进行分析，范围为1/64～1/512。

3 讨论

对于交叉配血试验而言，主要包括副试验以及主试验两种。对于主试验而言，主要利用受血者血清以及供血者红细胞血液完成试验，对二者之间是否表现出反应抗体进行检测；对于副试验，主要利用供血者血清以及受血者红细胞悬液完成临床试验，对二者之间是否表现出不合抗体加以检测。临床开展交叉配血试验目的在于对供血者以及受血者之间ABO血型匹配正确与否加以鉴定，对于受血者溶血性输血反应的出现给予充分避免。

冷凝集素作为自身IgM完全抗体之一，于低温条件下，受此种抗体的影响，会使得同型红细胞或者自身表现出可逆性凝集的现象。通常于0～4 ℃会表现出凝集反应高峰的现象，当温度逐渐上升，保持37 ℃后对凝集现象进行观察，最终发现全部消失[5]。对于一定浓度冷凝集素抗体而言，于部分人群中均会发现。在通常情况下，对血清中冷凝集素效价进行分析，正常人均＜1/16，从而不会导致表现出系列症状现象。但是因为系列病理因素的影响，会使得冷凝集素效价呈现出一定程度增高现象，从而对应表现出冷凝集素综合征现象[6-12]。因为冷凝集素的影响，会使得系列检验项目呈现出失真现象，尤其以血常规受到的影响较为显著，对于血型结果的测定均会产生对应影响，尤其针对交叉配血试验会产生显著 影响[13-20]。

本次研究发现，针对所有患者于临床合理采用凝聚胺法完成交叉配血试验操作，就主管以及次管反应进行观察发现，均表现出程度不同凝集颗粒现象，呈现出部分显著特点，之后于37 ℃条件下保持 5～10 min水浴，通过轻缓摇动确保颗粒能够缓慢散开，之后于玻片中导入，通过显微镜实施观察发现，红细胞表现出弥漫以及散在排列的现象，针对其他亚型抗体造成免疫反应影响结果可以顺利排除，成功完成交叉配血。准备O型正常人红细胞于患者血清中加入，最终发现在＜32 ℃表现出凝集现象。在4 ℃时表现出的凝集现象明显，之后逐渐升高温度，直至37 ℃进行观察，发现凝集均全部消失。对凝集素抗体滴度实施认真测定，就最终结果进行分析，范围为1/64～1/512，对此未避免呈现出血液凝集情况，要求在开展输血工作前积极做好37 ℃水浴工作，以充分实现用血安全性。

综上所述，对于输血科工作人员在日常配血期间，较易因为冷凝集而表现出交叉配血不合的情况，此时需要针对血清合理完成系列冷凝集素检测工作。针对冷凝集素具体检测期间，需要同其他抗体以及RBC自身凝聚进行有效鉴别。如患者表现出冷凝集现象，则针对其在给予交叉配血期间，对于加温输注工作需要认真完成，以将血清中表现出的冷凝集素影响充分消除，且在输血期间需要对缓慢滴入做出充分保证，以对患者用血的安全性做出保证，促进患者病情康复。