药品微生物检验与化妆品微生物检验的异同

陈彩霞，李建丽*，阮班展

（1.海南省食品药品检验所海口分所，海南海口 570311；2.海南医学院，海南海口 571199）

药品微生物限度检查是保障药品质量安全的重要控制措施之一，是《中华人民共和国药典》指定用于判断非无菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的标准方法，包括微生物技术法和控制菌检查法[1]。化妆品是指以涂抹、喷洒或者其他类似方法，散布于人体表面的任何部位，如皮肤、毛发、指趾甲、唇齿等，以达到清洁、保养、美容、修饰和改变外观，或者修正人体气味，保持良好状态为目的的化学工业品或精细化工产品[2]。近年来，因化妆品感染微生物引发的质量安全问题越发突出[3-5]。《化妆品安全技术规范（2015年版）》中规定化妆品微生物指标主要包括菌落总数、霉菌和酵母菌总数、耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌以及铜绿假单胞菌等[6]，用于评价化妆品在生产、包装、运输各个环节的卫生质量状况。笔者所在的实验室同时兼具了药品及化妆品检测职能，结合日常工作经验，笔者对药品及化妆品微生物检验的异同进行深入分析，旨在为从事相关工作的机构与同行提供参考。

1 人员方面的异同

人员是实验室的第一资源，人员的专业背景、培训经历及技术能力是药品及化妆品微生物检测结果准确的重要保障。《中华人民共和国药典（2020年版）》第四部通则9203《药品微生物实验室质量管理指导原则》要求，从事药品微生物检验人员应具备微生物学或相近专业的教育背景，检验人员必须熟悉检验检测方法、程序、检查的目的和结果评价，检验人员上岗前必须接受岗前培训并考核合格后持证上岗，且保证持续教育，保证知识和技能不断更新以满足要求[7]。化妆品微生物检验对人员相关资质要求没有相应的文件说明，笔者建议，实验室可以借鉴药品微生物检验人员具体要求，结合化妆品微生物检验的特点，制定相应的化妆品微生物检验人员的资格条件。

2 仪器设备方面的异同

开展微生物检测离不开仪器设备，微生物实验室应配备与微生物检验类型、技术能力及工作量相适宜的仪器设备，包括电子天平、高压蒸汽灭菌锅、接种环、生物安全柜、超净工作台、培养箱、水浴锅以及微生物鉴定仪等，且实验室应制定仪器设备管理制度,对仪器设备的采购、安装、验收、维护维修、使用登记以及日常监测等各方面进行规范化管理[8]。药品微生物检验与化妆品微生物检验使用的仪器类型及管理上没有差别，对于高压蒸汽灭菌锅、培养箱等影响检测数据准确性的仪器，应在其运行过程中对关键参数（如温度、压力）进行连续观察及记录，对于容易发生交叉污染微生物仪器设备，如生物安全柜、冰箱等应以工作类型及工作量为依据制定相应的清洁和消毒制度，防止交叉污染。

3 物料方面的异同

培养基是微生物检验必不可少的物质基础，培养基的质量直接影响微生物检测的结果，符合检验标准的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是微生物实验质量控制的关键环节。《中华人民共和国药典》对药品微生物检验用培养基的购买、验收、配制、灭菌、分装、贮藏、使用记录及质量控制等全生命周期均有规定，常规的监控项目包括pH值、适用性检查或灵敏度检查试验等，常用的培养基有胰酪大豆胨琼脂、沙氏葡萄糖琼脂、麦康凯琼脂培养基以及紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基等，不同类型的培养基根据标准要求进行促生长能力、抑制能力及指示能力的测试，培养基使用性检查所用的试验菌株也有严格的要求[1]。化妆品微生物检验与药品微生物检验中培养基质量控制的原理相同，培养基的配制、灭菌等环节基本一样，但化妆品微生物检验没有要求进行培养基适用性检查，且化妆品培养基一般含有可以中和防腐剂的吐温80成分，如菌落总数用到的卵磷脂吐温80琼脂，且菌落总数项目检验要求在培养基中加入0.5%的TTC溶液，用于区别化妆品中的颗粒与菌落[9]。此外需要注意的是，化妆品微生物检验用培养基配制要使用蒸馏水，应注意规范使用TTC[9]，避免微生物培养时出现假阴性现象、抑菌现象和次生菌现象等。药品微生物检验时，对于一些中成药，如样品本底有杂质，可以借鉴化妆品使用TTC，从而提高检验结果可靠性。

4 检验方法方面的异同

从检验标准来看，两种检验方法都以我国颁布的相关法规和法典为依据，药品微生物检验方法与化妆品微生物检验方法各具特色又相互补充，在实际检验应用过程中可以取长补短，互相借鉴。药品微生物限度检查主要依据国家药典委员会编制的《中华人民共和国药典》检查药品的非无菌制剂及原、辅料等的微生物污染程度，并判定其是否超过规定限度。《中华人民共和国药典》每5年更新一个版本，没有对动物实验制定相关规定，目前执行的是2020年版[10]。化妆品微生物检验以《化妆品安全技术规范（2020年版）》为依据，检验标准的更新时限没有规律。此外，《中华人民共和国药典》对药品微生物检验方法投入使用前有严格要求，必须进行方法适用性检查，证明该方法适用于该样品微生物检测后方可采用，而现行的化妆品微生物检验方法没有相关规定，这与化妆品生产中大量使用的防腐剂有矛盾之处。《化妆品安全技术规范（2015年版）》中可供选择的化妆品防腐剂达51种，化妆品中的防腐剂对微生物有一定的抑制作用[11]，虽然化妆品使用的培养基中增加了中和剂，如卵磷脂和吐温80成分，以去除化妆品中残留的防腐剂，提高检出率，但实际检验过程中还是会出现假阴性现象。笔者结合多年化妆品检测经验，在样品溶解时适当升温至40～44 ℃使样品充分溶解，或增加助溶剂如石蜡等，大大提升了化妆品微生物检验结果的准确度。由于化妆品中防腐剂的抑菌能力很强，可以借鉴药品进行方法学适用性检查，确定方法的适用性后再运用于日常检验工作。

5 环境方面的异同

实验室环境对微生物检验有着很大影响，先进的硬件设施及符合标准要求的实验环境是保证微生物检测结果真实性与准确性的重要因素。药品微生物检验对环境的要求非常严格。药品微生物实验的各项要求必须在专属区内进行，药品微生物限度检查应在不低于D级区下的生物安全柜或B级洁净区域内进行，A级区和B级区的空气供给应配备终端高效空气过滤器，此外，《中华人民共和国药典》通则“9205药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则”（以下简称“通则9205”）中还对实验室的监测项目与监测频率、人员的进出监测、更衣流程等进行了全面详细的规定[1]。相对于药品，化妆品微生物检验环境相对宽松，没有明确的文件要求。目前大部分化妆品检验机构在洁净区域内采用单方向工作流程进行检验，实验室可以参考“通则9205”制定的标准操作规程对化妆品的监测环境进行监测，如实验室条件允许，笔者认为实验室应设置独立的药品微生物检测区与化妆品微生物检测区，如受客观条件限制，也应做好相应控制措施，降低交叉污染以及假阳性、假阴性结果出现的风险。

6 结语

从人、机、料、法、环5大方面对比分析药品微生物检验与化妆品微生物检验发现，二者既有相同点又各自特点，但总体来讲药品微生物检查法比化妆品微生物检查法更具严谨性与先进性。例如，药品的方法在使用时必须进行方法学适应性实验，这是化妆品没有的，化妆品对菌落计数的各种情况作出的详细规定是药品所不具备的。作为同时具备药品与化妆品微生物检验职能的机构，要深入学习两者之间的关联性，在实际检验过程中灵活运用，互相借鉴、取长补短，推动实验室管理水平与技术能力上新台阶，为食品化妆品监管提供技术支撑。