乙型肝炎患者T细胞亚群、血管内皮生长因子与病情进展及严重程度的关系

南海峰，刘婷，王瑞丽

(南阳医学高等专科学校第一附属医院 消化内科，河南 南阳 473000)

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染所引起的一种传染性疾病。据报道，全球约20亿人曾感染过HBV，每年约有100万人死于HBV感染所致的相关性疾病，尤其是中国[1]。流行病学调查发现，中国约有9 300万乙肝携带者，2 500万慢性乙肝患者[2]。有研究指出，HBV感染人体后所引起的器官组织病变及疾病的发生发展与机体免疫力有关；也有研究表示，乙型肝炎的恶化与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)过度表达有关。但临床上对于这方面的研究报道较少，尚未明确它们之间的关系，故本次选取232例乙型肝炎患者与120例健康体检者的临床资料进行回顾性分析，旨在探讨乙型肝炎患者T细胞亚群、VEGF与病情进展及严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料回顾性分析2018年2月至2022年2月诊治的232例乙型肝炎患者(观察组)与120例健康体检者(对照组)的临床资料。其中观察组按照病情严重程度分为A组(乙型病毒性肝炎，n=118)、B组(乙肝型肝炎肝硬化，n=72)、C组(乙肝型肝癌，n=42)。诊断标准：符合《慢性乙型肝炎的临床实践指南》[3]更新版解读中的诊断标准。(1)纳入标准：①临床资料完整；②尚未接受保肝、抗病毒等治疗。(2)排除标准：①合并严重自身免疫性疾病；②伴有脑卒中、心功能不全等疾病；③处于昏迷阶段。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组一般资料比较

1.2 检测方法回顾性分析本次受检人员经T细胞亚群、VEGF检测的血清标本资料。其检查步骤如下：于清晨空腹状态下抽取静脉血5 mL，3 000 r·min-1离心15 min，取上清液。其中，VEGF采用酶联免疫吸附法检测；总胆红素(total bilirubin，TBIL)、凝血酶原活动度(prothrombin activity，PTA)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)采用全自动生化仪检测；CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+采用美国BD流式细胞仪检测；试剂盒均由上海亿欣生物科技有限公司提供。

2 结果

2.1 T细胞亚群分布

2.1.1乙型肝炎患者与健康体检者的T细胞亚群比较 观察组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于对照组，而CD8+高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组T细胞亚群比较

2.1.2不同程度乙型肝炎患者的T细胞亚群比较 C组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于A、B组，而CD8+高于A、B组(P<0.05)。见表3。

表3 3组T细胞亚群比较

2.2 血清VEGF与肝功能指标

2.2.1乙型肝炎患者与健康体检者的VEGF、肝功能指标比较 观察组VEGF、TBIL、ALT高于对照组，而PTA低于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 两组血清VEGF与肝功能指标比较

2.2.2不同程度乙型肝炎患者的VEGF、肝功能指标比较 C组的VEGF、TBIL、ALT高于A、B组，而PTA低于B、C组(P<0.05)。见表5。

表5 3组血清VEGF与肝功能指标比较

2.3 相关性分析

2.3.1T细胞亚群、血清VEGF与严重程度相关性分析 Kendalls tau-b相关性分析显示，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+与严重程度呈负相关，CD8+、VEGF与严重程度呈正相关(P<0.05)。见表6。

表6 T细胞亚群、血清VEGF与严重程度的相关性

2.3.2T细胞亚群、VEGF与肝功能相关性分析 Pearson相关性分析显示，TBIL、ALT与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+呈负相关，与CD8+、VEGF呈正相关(P<0.05)；PTA与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+呈正相关，与CD8+、VEGF呈负相关(P<0.05)。见表7。

表7 T细胞亚群、VEGF与肝功能的相关性

2.4 ROC曲线分析ROC曲线分析显示，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、VEGF诊断乙型肝炎病情严重程度的曲线下面积为0.833、0.878、0.692、0.812、0.985(P<0.05)。见表8。

表8 T细胞亚群、VEGF预测价值分析

3 讨论

有研究表明，乙型肝炎患者会随着病情进一步发展，使肝细胞出现严重坏死[4]。尽管给予病因治疗和综合支持疗法，但仍难以代偿肝功能，导致乙型肝炎病死率呈逐年上升趋势。有数据显示，乙型肝炎病死率高达60.0%～80.0%[5]。基于此，早诊断、早治疗显得尤为重要，也是乙肝相关性疾病防治最关键步骤，对避免肝硬化及肝功能衰竭的发生及降低肝癌发生率具有重要意义。孟玉丽等[6]指出，机体感染HBV后所引起的肝和其他器官组织病变与免疫状态具有一定相关性，可能是细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)介导所产生的细胞免疫反应在清除HBV和损伤肝细胞过程中发挥重要作用。T细胞是由CD4+、CD8+等不同亚群组成。其中，CD4+T细胞为辅助型T细胞(Th)。在Th受抗原刺激后能分化为Th1与Th2两种类型，前者通过分泌白细胞介素-2、干扰素-γ、白细胞介素-12等细胞因子，促进细胞介导的免疫应答[7]；后者则通过分泌白细胞介素-4、白细胞介素-5、白细胞介素-6、白细胞介素-10等细胞因子，参与抗体介导的免疫应答。CD8+T细胞由CTL和抑制性T细胞(Ts)组成；Ts能通过释放大量的可溶性递质，调节体液免疫和细胞免疫；CTL不仅参与了病毒清除，还参与了肝细胞损伤过程[8-9]。

在正常情况下CD4+与CD8+保持一定比例，即处于动态平衡状态下，以此维持机体细胞免疫功能，反之，CD4+与CD8+比例失调，则会影响机体免疫功能[10]。本研究结果显示，乙肝病毒患者的CD4+、CD4+/CD8+低于健康体检者，而CD8+高于健康体检者。这提示乙肝病毒患者存在细胞免疫功能异常，而细胞免疫功能异常又与肝功能损害程度有关。在不同程度乙型肝炎患者的T细胞亚群比较中，发现C组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于A、B组，而CD8+高于A、B组，说明细胞免疫功能会受乙型肝炎严重程度的影响而发生变化。乙型肝炎早期肝功能损伤并不明显，随着病情的进展，肝功能损伤越发明显，且会引起机体强烈的细胞免疫反应，通过释放多种淋巴因子诱导炎症反应，加重对肝细胞的损伤，而肝细胞的损害又会加重CD4+与CD8+比例的失衡，形成恶性循环[11-13]。Kendalls tau-b相关性分析中可见，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+与乙型肝炎严重程度呈负相关，CD8+与乙型肝炎严重程度呈正相关，证实了上述说法的可靠性。VEGF是肝癌潜在的标志物，不仅能特异性促进血管内皮细胞生长，譬如通过刺激和调节内皮细胞的增殖、迁移，增加血管的通透性[14]；还具备诱导组织产生、活化基质蛋白水解酶的作用。在本研究中可见，观察组的VEGF高于对照组，且其表达量会随着病情严重程度而上调。中重度肝炎时，肝血管破坏更为明显，一旦肝细胞出现缺血、缺氧情况，则会诱导VEGF mRNA活化，通过合成增加其表达量，促进新生血管生成[15-17]。此外，VEGF过度表达，能因血管通透性的增加，降低局部有效血容量，从而加重肝细胞的缺血、缺氧程度，诱导VEGF的产生[18]。在Pearson相关性分析中可见，TBIL、ALT与VEGF呈正相关，PTA与VEGF呈负相关。这提示VEGF表达量可作为判断乙型肝炎患者肝功能损害和病情严重程度的重要指标。在ROC曲线分析中可见VEGF的曲线下面积为0.985，说明其具有较高的预测价值。

综上所述，乙型肝炎患者T细胞亚群、VEGF会随着病情严重程度发生改变，说明两者均参与了乙型肝炎的发生发展。