两种日粮组成对妊娠后期母驴体重增加、血液生化指标及生殖激素影响的研究

李佳豪， 李晓斌#， 李 倩， 米热古丽·伊马木，托乎提·阿及德， 王 琼， 解 鹏， 肖海霞*

（1.新疆农业大学动物科学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.新疆畜牧科学院畜牧研究所，新疆乌鲁木齐 830011；3.沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳 110161）

妊娠是复杂的持续性生理应激过程，妊娠期母畜摄入的营养物质既要满足自身的维持需要又要保障胎儿正常的生长发育。特别是妊娠后期，研究指出，妊娠后期是胎儿快速生长发育的关键阶段（尹国琳等，2021），若在这一阶段营养物质摄入不足，会降低胎儿出生重和成活率，减缓胎儿组织器官的生长发育，进而影响母畜繁殖性能（He等，2013；Meyer等，2010）。吴钟胜等（2013）研究表明，当妊娠期母羊日粮中蛋白质水平为120%NRC（1981）的推荐量时，可显著提高妊娠母羊日增重，而且增长幅度稳定，同时母羊所产羔羊的初生重较大。张志伟等（2020）研究表明，饲喂低营养水平日粮会显著降低初产母猪分娩前后体重，降低仔猪的初生及断奶重。沈亚军（2021）研究表明，母驴妊娠后期饲喂不同蛋白质水平的日粮对驴驹出生后的生长发育有一定的影响，高蛋白组和中蛋白组可以提高驴驹的初生重。妊娠后期母驴对营养物质需要高，营养物质需要全面，科学搭配满足妊娠后期母驴营养物质需要量的日粮对于其生产水平及繁殖性能的发挥具有重要意义。因此，本试验旨在研究在能量水平相近条件下，两种不同蛋白质水平日粮对妊娠后期母驴体重、血液生化指标及生殖激素的影响，为妊娠后期母驴科学饲养提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间与地点 试验于2021年4月至7月在新疆喀什地区泽普县金胡杨牧业有限公司进行。

1.2 试验动物 选择年龄4～6岁、胎次1～2胎、平均体重（234.66±35.32）kg、配种日期相近、健康的妊娠后期（妊娠最后3个月）疆岳驴母驴60头，试验前妊娠母驴体重体尺见表1。

表1 妊娠后期母驴初始体重体尺

1.3 试验设计 将60头妊娠后期母驴随机分为2个组，每组30头，分别为日粮Ⅰ组和日粮Ⅱ组。在相同的饲养管理条件下，以能量水平相近为原则，给妊娠后期母驴饲喂两种不同蛋白质水平3.87%、10.95%的日粮，日粮Ⅰ组妊娠后期母驴饲喂金胡杨牧业有限公司提供的日粮，日粮Ⅱ组妊娠后期母驴饲喂本研究设计的日粮（粗饲料＋精料补充料，参考NRC（2007）马的营养需要配制），基础日粮组成及营养水平见表2。预饲期10 d，正饲期80 d，进行全期90 d的饲养试验。分别在试验第0、30、60天和90天晨饲前空腹称量试验母驴体重；在试验第90天称重前采集母驴血液样品，测定相关指标。

表2 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.4 饲养管理 所有妊娠后期母驴在试验前按照养殖企业驱虫的流程对其进行驱虫，驱虫药为伊维菌素（Ivermectin）片剂，剂量为0.2 mg/kg·BW，驱虫方式口服。结合养殖企业对妊娠后期母驴的饲养管理模式进行试验，将每天日粮平均分为3次饲喂，饲喂方式先粗后精，间隔2 h，饲喂时间分别为每日08：00（粗）、10：00（精）、16：00（粗）、18：00（精）、22：00（粗）和24：00（精），期间妊娠后期母驴可自由活动，并提供充足饮水。在整个试验期间，定期清扫驴舍，保证试验母驴良好的试验环境。

1.5 样品采集及指标测定

1.5.1 体重数据的称量 试验开始的前1（即0 d）、30、60天和90天晨饲前空腹称量母驴的体重，记录数据。

1.5.2 血液样品采集 试验第90天称重前于颈静脉采集血样2管，使用离心机（Eppendorf 5810 R）2465×g离心15 min，取血浆-20℃冷冻保存，待测。

1.5.3 指标测定 本试验测定的血浆相关生化指标均采用南京建成生物工程研究所的试剂盒，方法参考试剂盒的说明书，检测指标如表3。

表3 血浆生化指标

1.6 数据处理 在Excel中先将数据进行预处理，再使用SPSS 18.0软件进行独立样本T检验，试验结果均以“平均值±标准差”表示，以P＜0.05作为差异显著性的判断标准。

2 结果

2.1 两种日粮组成对妊娠后期母驴体重增长的影响 由表4可知，饲喂两种日粮对妊娠后期母驴初始重和30、60 d体重均无显著影响 （P＞0.05）；饲喂日粮Ⅱ能显著提高妊娠后期母驴末重、总增重和平均日增重，分别比饲喂日粮Ⅰ提高了8.57%、155.42%和157.69%（P＜0.05）。

表4 两种日粮组成对妊娠后期母驴体重增长的影响kg

2.2 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆氮代谢的影响 由表5可知，饲喂日粮Ⅱ能显著提高妊娠后期母驴血浆中总蛋白、白蛋白和球蛋白含量，分别比饲喂日粮Ⅰ提高了24.62%、25.76%和23.79（P＜0.05），显著降低尿素氮的含量，比饲喂日粮Ⅰ降低了27.50%（P＜0.05）；两组肌酐无显著差异（P＞0.05）。

表5 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆氮代谢的影响

2.3 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆糖、脂代谢的影响 由表6可知，饲喂日粮Ⅱ能显著提高妊娠后期母驴血浆中葡萄糖和甘油三脂的浓度，比饲喂日粮Ⅰ分别提高了5.82%和6.90%（P＜0.05），两种日粮对总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇以及低密度脂蛋白胆固醇均无显著性影响（P＞0.05）。

表6 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆糖、脂代谢的影响mmol/L

2.4 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆中酶浓度的影响 由表7可知，饲喂日粮Ⅱ对妊娠后期母驴血浆中乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷丙转氨酶以及草转氨酶浓度均无显著影响（P＞0.05），但饲喂日粮Ⅱ妊娠后期母驴血浆中乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷丙转氨酶比饲喂日粮Ⅰ提高了6.00%、17.18%、70.63%（P＞0.05），而谷草转氨酶的浓度相较于日粮Ⅰ组降低了2.19%（P＞0.05）。

表7 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆中酶浓度的影响U/L

2.5 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆生殖激素的影响 由表8可知，饲喂日粮Ⅱ对妊娠后期母驴血浆中促性腺激素释放激素、促黄体素、促卵泡素、雌二醇及孕酮均无显著影响（P＞0.05），但与饲喂日粮Ⅰ相比，分别提高了13.66%、2.99%、45.85%、5.09%和1.50%。

表8 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆生殖激素的影响

3 讨论

3.1 两种日粮组成对妊娠后期母驴体重增长的影响 母畜妊娠期体重的变化是衡量此阶段母畜日粮营养水平是否适宜的一个重要指标。适宜的体重增长一方面可以保证母畜自身的营养需求，另一方面可以为胎儿生长发育提供一定的条件（张帆等，2016）。科学搭配日粮是保证妊娠期母畜健康的基础，日粮组成不均衡会导致妊娠期母畜营养代谢异常，影响母畜和胎儿的健康。妊娠后期母畜体重正常的增加是妊娠正常的健康表现。顾鹏程等（2006）研究发现，饲喂NRC（1998）水平日粮可极显著提高母猪妊娠后期体重，比饲喂低营养水平日粮组提高了37.29%。张崇志等（2013）研究显示，在母羊妊娠后期对其进行营养限饲显著影响了胎儿的生长发育，且随营养水平的降低，限制程度增加，胚胎的体重、体长、胸围等均显著低未限制组，因此合理的日粮营养水平是满足妊娠后期母畜及胎儿发育的物质基础。陈玲（2018）]研究表明，随着妊娠的持续母猪的体重不断增加，但日粮营养水平是限制母猪体重增加的因素，在妊娠后期随着日粮营养水平的提高母猪的体重也随之增加。因此，满足妊娠期母猪维持需要和生产需要的营养水平是维持妊娠健康的保证。本研究中，饲喂日粮Ⅱ能显著提高妊娠后期母驴的体重，可能与日粮Ⅱ中粗蛋白质的含量高于日粮Ⅰ，且NDF和ADF的含量低有关。研究表明（王宁伟等，2019；许椿善等，2013），适宜的提高日粮中粗蛋白质的含量可以避免体内蛋白质的过度分解，增加机体的氮沉积，且低含量的NDF和ADF日粮比较有利于动物的消化吸收。妊娠后期体重的增加一方面是母畜自身体重的增加，另一方面是胎儿体重的增加。日粮营养物质的量是满足体重增加的基础，相对于日粮Ⅰ，日粮Ⅱ配比更均衡，营养水平更加全面可能是导致妊娠后期母驴体重显著增加的原因。

3.2 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆氮代谢的影响 血浆总蛋白、白蛋白和尿素氮含量可准确的反映动物对日粮中蛋白质的消化、吸收和沉积能力（Ihsan等2019；Glade等，1983），并且可以为动物日粮配方及科学饲养管理提供参考依据。日粮中蛋白质水平是导致血浆中总蛋白、白蛋白以及尿素氮含量发生变化的直接原因。血浆尿素氮浓度的高低可直接反映机体蛋白质代谢和氨基酸的平衡状况（Stanluy等，2002）。当在一定范围内总蛋白的浓度升高，尿素氮的含量降低，表明机体合成和利用蛋白质效率高，增加了氮在机体内的沉积速度（Scott等。1982）。沈亚军（2021）研究表明，随着日粮中蛋白质含量的不断提高，妊娠后期母驴血浆中尿素氮含量呈显著增加趋势，说明妊娠后期母驴对蛋白质的需要量不是越高越好，日粮中过高的蛋白质水平会导致机体对蛋白质的利用效率降低，体内沉积较少。长期饲喂蛋白质水平高的日粮会造成驴的肾功能受损，且造成饲料浪费。施琼等（2012）研究表明，合理调节日粮中蛋白质的水平，可以降低妊娠期和秦母牛血浆中尿素氮的含量。本试验中，饲喂日粮Ⅱ组的妊娠后期母驴血浆中总蛋白和白蛋白含量显著高于日粮Ⅰ组；尿素氮含量显著低于日粮Ⅰ组，说明日粮Ⅱ中蛋白质含量、氨基酸的种类和比列符合此阶段妊娠母驴的营养物质所需，且能够提高机体对蛋白质的合成和利用效率、增加氮在机体内沉积速度。血浆球蛋白由浆细胞分泌，具有增强机体的免疫力、防止病毒和细菌的入侵等作用（赵芳等，2016）。日粮营养水平可以影响机体免疫力，日粮营养物质不足会对抗体的产生起到不良的影响，进而影响机体的免疫功能，导致机体免疫能力下降。日粮中添加维生素和矿物质元素将会参与母畜体内物质代谢，增加母畜机体的免疫力（Ken等，2019）。本试验中，饲喂日粮Ⅱ的妊娠后期母驴血浆中球蛋白含量显著增高。可能与日粮Ⅱ中蛋白质供给充足，且预混料中提供了适量的维生素和矿物质元素有关。

3.3 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆糖、脂代谢的影响 葡萄糖是妊娠母畜胎儿生长的主要能量来源，它直接影响胎儿的糖原沉积（Peugnet等，2014）。妊娠后期是胎儿快速生长发育的阶段，此阶段妊娠母畜也表现出可逆的胰岛素抵抗，导致体内对胰胰岛素的敏感性降低，在此时期，血浆中葡萄糖含量升高，能够增加胚胎的葡糖糖供给。研究表明（Cong等，2016），血糖含量的降低能够导致胚盘中葡糖糖含量减少和胎儿生长发育缓慢，母体的葡萄糖含量越低，体内胎儿的葡糖糖含量就越低。葡萄糖代谢除了受胰岛素和胰高血糖素的调节外，日粮组成也是影响机体糖代谢的一个重要原因（Park等，2015）。单胃动物血液中葡萄糖主要来自日粮中淀粉的水解，血糖水平相对较高与日粮中淀粉含量有关。苏玲玲等（2021）研究表明，饲喂含有较低NDF的含量全株玉米青贮能够提高妊娠后期母驴血清中葡萄糖含量。沈亚军（2021）研究表明，饲喂高水平蛋白质饲粮的母驴，其血浆中葡萄糖含量呈显著升高，表明提高蛋白质的供给，能够提高机体内氨基酸通过糖异生转化为葡萄糖的比例，从而导致高蛋白组血浆中葡萄糖含量的升高，但是加速了机体内蛋白质的代谢，降低了蛋白质的利用率。在本试验中，饲喂日粮Ⅱ的妊娠后期母驴血浆中葡萄糖含量显著高于日粮Ⅰ，与前人研究结果一致。妊娠后期母驴血浆葡萄糖含量的升高，一方面与日粮中谷物淀粉含量有关，另一方面可能与日粮中ADF和NDF含量低有关，低含量ADF和NDF的日粮在驴盲肠能够更好的被降解，使得妊娠后期母驴对日粮营养物质利用率高，从而血浆中葡萄糖含量也随之升高，进而促进胎儿的生长发育。甘油三脂含量能直接反映机体脂肪储存、消化以及吸收是否平衡。甘油三脂合成甘油和脂肪酸主要是由葡萄糖代谢提供（苏玲玲等，2021）。本试验中，饲喂日粮Ⅱ的妊娠后期母驴血浆中甘油三脂浓度显著高于日粮Ⅰ，说明饲喂日粮Ⅱ对改善妊娠后期母驴血脂方面具有一定积极作用，且能够一定程度上提高机体内脂肪的利用效率。

3.4 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆中酶浓度的影响 研究发现（Manen等，1978），通过血浆中酶的活性能够诊断动物组织器官的功能障碍和慢性疾病等，且血浆酶浓度也可以作为肝脏健康和应激反应程度的重要指标。碱性磷酸酶是动物消化和代谢中的关键酶，可参与蛋白质和脂肪代谢（Zhang等，2019）。动物处于健康状态下，体内高水平的碱性磷酸酶能够增加动物的平均日增重（闫晓刚，2005）。这与平均日增重高的日粮Ⅱ组中碱性磷酸酶活性一致，这可能是因为日粮Ⅱ中粗纤维含量低，营养物质消化利用率高，从而导致碱性磷酸酶活性提高，促进机体合成代谢的加快，进而促进妊娠后期母驴的增加。血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的变化主要取决于动物的肝脏功能，当肝脏发生损伤、肝细胞坏死，细胞的通透性改变，大量的谷丙转氨酶和谷草转氨酶涌入血液，即可引起血液其活性急剧升高 （王斐等，2021）。谷丙转氨酶值在正常范围（0～28 U/L）内（Laus等，2015）。本试验中各组谷丙转氨酶差异不显著，且都在正常范围内，说明日粮Ⅰ和日粮Ⅱ均能够满足妊娠后期母驴的正常代谢需求，且对其肝脏和心脏没有产生不良的反应。

3.5 两种日粮组成对妊娠后期母驴血浆生殖激素的影响 生殖激素是维持动物正常繁育的重要保障。孕酮是活性最高的孕激素，主要来源于黄体及胎盘（Sales等，2021）。妊娠早期由黄体分泌，促进子宫内膜增生，使腺体发育及功能加强。妊娠后期由胎盘分泌，抑制子宫肌肉的收缩，促进胎盘的生长发育，维持正常的妊娠（刘学锋等，2010）。孕酮与雌激素相互配合、共同作用于母畜生殖活动，两种既相互抗衡又相互协同。研究表明（Bridges，2007），在妊娠早期雌二醇浓度逐渐上升，有利于子宫的发育，促进子宫肌的增厚，为早期妊娠做好准备。在妊娠后期雌二醇浓度达到峰值，促进子宫肌的收缩，确保分娩顺利进行。妊娠前期受精卵着床后孕酮的浓度持续增长，在妊娠后期浓度下降。刘瑞鑫等（2008）报道，妊娠早期到妊娠后期水牛血液中雌二醇的含量呈逐渐增加趋势，且分娩前急剧增加。卢亚宾（2016）研究显示，母马在妊娠早期雌激素含量较低，从受精卵附植后，雌二醇平均含量从32.22 pg/mL升高到54.95 pg/mL（妊娠中期），且妊娠后期继续升高。本试验中，饲喂日粮Ⅰ和日粮Ⅱ的妊娠后期母驴血浆中雌二醇平均含量为63.25 pg/mL和66.47 pg/mL均略高于卢亚宾等研究结果，雌二醇水平从妊娠中期到妊娠后期逐渐升高，本试验疆岳驴母驴处于妊娠后期是导致血浆中雌二醇含量较高的原因之一。妊娠后期孕酮含量的降低，雌二醇含量的上升，使骨盆韧带松软，有助于促进分娩，且雌激素还可以促进蛋白质的分解，对胎儿营养物质的吸收有一定的促进作用（Wood，2014）。促卵泡素主要作用是促进卵巢卵泡的生长，促进卵巢颗粒细胞的增生和雌激素的分泌合成。雌激素浓度升高，通过负反馈调节抑制垂体对促卵泡素合成和分泌（卢亚宾，2016）。葛利江等（2011）研究发现，德州驴的整个发情周期中促卵泡素的浓度在间情期平均水平最高为3.55 mIU/mL，在发情后期平均水平降低为2.79mIU/mL；促黄体素在排卵后的第2天达到峰值（4.69 mIU/mL），在发情后期平均水平为2.91 mIU/mL。促黄体素和促卵泡素的变化规律基本一致，在妊娠前期呈上升趋势，随后逐渐降低，直到妊娠后期有小幅度的提升（Derar等，2005）。本试验中，饲喂日粮Ⅱ的妊娠后期母驴血浆中促卵泡素平均含量为3.34 mIU/mL略高于德州驴发情后期平均水平，促黄体素为2.07 mIU/mL略低于葛利江等（2011）研究结果，一方面可能与驴的品种及其处的环境有关，另一方面可能本试验疆岳驴母驴处于妊娠后期，采血期间已到预产期，而促卵泡素和促黄体素是在母驴间情期或发情期启动、促进卵泡发育和成熟中发挥作用。

4 小结

本试验条件下，饲喂日粮Ⅱ能够促进妊娠后期母驴的生长发育，显著提高母驴末重、总增重；显著提高血浆中总蛋白、白蛋白和球蛋白含量，显著降低尿素氮的含量；显著提高葡萄糖和甘油三脂的浓度，维持妊娠后期母驴血浆中酶及激素的正常水平，对母驴的妊娠具有一定的促进作用。