刘英杰,齐六卫,董彦龙,羿 岩
(沈阳伟嘉生物技术有限公司,辽宁 沈阳 110027)
猪蓝耳病,又被称为猪繁殖与呼吸综合征,因其具有极高的传染性,我国将其列为一类传染病。2021年中国猪病流行数据统计显示:我国猪场有87.81%处于亚健康状态,商品猪场猪蓝耳病阳性率高达90%以上,发病率高达30%~40%。猪场一旦感染猪蓝耳病,母猪流产率可高达30%以上,仔猪死亡率高达50%以上。猪蓝耳病以其高传播性和高死亡率的特点致使其难以防控,从而给猪场带来了不可估量的损失。日常防控措施包括完善的生物安全管理措施、疫苗接种预防、定期的实验室抗体水平检测和药物防治等。药物治疗基于两个核心点:提升免疫力和控制继发感染,常用黄芪多糖和杜仲提取物等提升免疫力和抗生素联合应用防治猪蓝耳病。经临床验证,联合应用已在猪场取得了不错的效果。本文以吉林某规模化猪场药物防治前后的猪蓝耳病抗原抗体分析报告为例,阐述药物防治猪蓝耳病和定期实验室检测抗体的重要性,旨在帮助规模化猪场能更好地防控猪蓝耳病,在养殖过程中获得更好的收益。
吉林省辽源市杨木林镇某小规模猪场,母猪存栏30头,保育猪存栏50头,采取自繁自养,场内一直没有进行过猪蓝耳病疫苗免疫。母猪大群健康,个别食欲差;40日龄保育猪有呼吸道症状,发病率6%~10%。随机挑选症状明显的保育猪10头,进行样本的采集及药物的治疗。
治疗方式采取杜仲提取物连续饲喂21 d,随机选取整齐度差、精神状态差的保育猪10头进行抗原抗体检测分析。具体方法如下:分别于给药前、给药后,进行猪前腔静脉采血3~5 mL,按3 000 r/ min离心10 min,分离血清。
通过荧光定量聚合酶链式反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸(猪蓝耳病毒抗原),采用酶联免疫吸附测定试剂盒方法检测抗体(猪蓝耳病毒抗体),操作方法和结果判定标准均参照试剂盒说明书。
猪蓝耳病抗体的判定:通过猪蓝耳病抗体检测到样本和对照的吸光度值换算出每个样本的样本 / 阳性对照比率(S/ P),根据 S/ P值进行判定抗体。当 S/ P 值大于等于 0.4判定为阳性;当 S/ P 值小于 0.4 判定为阴性,体内无抗体的存在。
猪蓝耳病抗原Ct值的判定:通过试剂盒Ct值及曲线形状对标本结果进行判定。当标本检测结果Ct值在35及以下或有明显指数增长期时判定为阳性;当标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显的指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性;当样本检测结果Ct值大于38或无Ct值判定为阴性。
在给杜仲提取物治疗猪蓝耳病之前,抗原检测结果显示:10份血清经合样之后形成3份混合样本,3份均为阴性;抗体分析结果显示:所检测的10份血清样本,血清抗体阳性率为70%。通过检测结果可知,因为猪群一直没有进行过疫苗免疫,抗原阴性,抗体阳性,说明猪群以前感染过猪蓝耳病毒后出现了自愈的情况。因保育猪出现了腹式呼吸的症状,推测目前处于排毒状态,但猪蓝耳病毒数量比较少,且自身出现了一定量的抗体来抵御病毒。具体结果如表1—表3。
连续饲喂21 d杜仲提取物后抗原抗体检测结果见表4—表6。
表4 检测结果
表6 给药后猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体酶联免疫吸附检测情况
连续饲喂21 d杜仲提取物后抗原抗体检测统计分析结果见表7。
表7 给药前后抗原抗体水平整体变化
对给药前及给药后猪繁殖与呼吸综合征病毒(猪蓝耳病病毒)抗体的S/P值采用SPSS软件进行样本配对t检验,分析结果如表
8—表10所示。
表1 检测结果
表10 成对样本检验
从使用杜仲提取物前后抗原抗体变化情况可以看出使用前后抗体差异明显,抗体全部转阴,猪蓝耳病得到净化,由以前的阳性稳定场转为双阴场。具体分析如下:1)通过21 d杜仲提取物的使用将猪蓝耳病抗体的阳性率从70%降低到0,离散度从36.84降低到0,猪场由猪蓝耳病阳性场转为猪蓝耳病双阴场。因此可以看出使用杜仲提取物能促进猪蓝耳病毒的清除及大群净化,有利于猪蓝耳病毒的整体防控。2)SPSS软件配对t检验分析结果证实饲喂杜仲提取物前后抗体差异极其显著(P<0.01)。
目前在集约化养殖的大背景下,中小散户在猪蓝耳病的防控上普遍存在意识薄弱的现象,通常不会使用猪蓝耳病疫苗进行定期预防和抗原抗体监测。诚然猪蓝耳病疫苗在猪蓝耳病的防治上存在一定的劣势,可能出现弱毒疫苗的排毒重组现象及灭活毒疫苗免疫效果不理想,但猪蓝耳病疫苗一定程度上能减少猪蓝耳病暴发的重症。若不使用猪蓝耳病疫苗进行防控,一旦出现猪蓝耳病的暴发,会造成猪群中重症感染的增多进而造成更大的损失。因此,小规模养殖户若不能做到疫苗的定期防控和抗原抗体监测,则需要做到加强日常饲养管理工作和做好猪场整体环境卫生工作。除了以上两点,更要注重猪群的整体免疫力的提升。平时可使用维生素C和黄芪多糖及杜仲提取物进行定期的饲喂。一旦出现猪蓝耳病感染,可使用头孢菌素、替米考星等控制继发感染,同时使用中药提取物板蓝根、鱼腥草、双黄连、杜仲挥发油等进行治疗。
表2 给药前猪繁殖与呼吸综合征抗原荧光PCR定量检测情况
表5 给药后猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原荧光PCR定量检测情况
表8 成对样本统计量
表9 成对样本相关系数