晨痰和随机痰在检测抗酸杆菌中的差别分析

王 姝

江苏省泰州市中医院检验科 225300

结核病是由感染结核分枝杆菌引起的慢性传染病。结核分枝杆菌主要侵染肺部与脑部，引起肺结核与脑结核。同时结核病也可累及多个器官，从而影响患者生活质量[1-2]。结核病传染性比较强，很多患者通过喷嚏、谈话、咳嗽就可进行传染，给社会带来沉重负担。同时由于各种因素的影响，虽然公众结核病知识知晓率较高，但是预防管理行为依从性却较低。对结核病尽早诊断对于有效预防疾病传播具有重要意义[3]。痰涂片检查是一种早期发现结核病的重要途径，对制定治疗方案、观察疗效和进行预后判断有着重要作用[4]。常用痰涂片检查方法包括直接涂片法与罗氏培养法。罗氏培养法阳性率高，但其检测周期较长，直接涂片法操作简单、成本低，但检测阳性率较低，敏感性也较低[5]。液基细胞学涂片法抗酸杆菌检测技术是通过痰保存液液化痰液，然后收集细菌，可达到痰涂片的标准化，并结合液基细胞学技术，提高痰抗酸杆菌的检出率[6]，但是其对于标本的来源性要求比较高。本文探讨与分析了晨痰和随机痰在检测抗酸杆菌中的差别，以促进合理收集标本。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年8月—2021年9月在本院诊治的70例拟诊断为肺结核患者作为观察对象。纳入标准：研究经医院伦理委员会批准；患者自愿签署知情同意书；具有肺结核的临床特征，且具有肺结核病例的接触史；年龄18～70岁。排除标准：调查期间死亡者；合并其他呼吸道疾病感染者；合并肿瘤者；临床资料缺乏者。在70例患者中，男38例，女32例；年龄19～65岁，平均年龄(45.20±2.19)岁；肺结核密接者45例，次密接者25例；平均受教育年限(15.20±0.28)年；临床症状(可合并)：咳嗽43例，咳痰52例，咳血43例；平均收缩压(125.01±11.28)mmHg(1mmHg=0.133kPa)；平均舒张压(73.10±7.19)mmHg；平均心率(87.15±5.19)次/min；平均空腹血糖(6.10±0.14)mmol/L。

1.2 标本采集与检测 标本保存液购自宜兴市润迪医疗器械有限公司，抗酸菌染色液购自珠海贝索生物技术有限公司，抗酸杆菌药敏罗氏培养管购自深圳晶美公司，薄层液基细胞制片机购自长沙英泰仪器有限公司，调速多用振荡购自北京仪器总厂，恒温水箱购自常州国宇仪器制造有限公司，KP-1型快速干片机购自上海器械公司。采集所有患者的晨痰和随机痰各1份，每份5.0ml左右。都采用液基细胞学涂片法进行抗酸杆菌的检测，使用竹签挑取痰标本中0.05～0.10ml的脓样、干酪样物、血性物，置于玻片正面靠右大约2/3位置，均匀地涂抹成卵圆形痰膜(大小约为20mm×10mm)。在生物安全柜内使用紫外线灯对其照射15min，固定痰涂片火焰。在剩余痰标本中加入5.0%的次氯酸钠溶液，混合后静置30min后进行再液化、灭菌，再次混匀后在离心管内保留1ml沉渣，制成集菌痰涂片，然后进行染色与镜检。

同时所有样本都进行罗氏培养法检测，以罗氏培养法作为诊断的金标准。所有检测都按照《结核病诊断细菌学检验规程》进行操作，质量控制按照《结核病防治规划—痰涂片镜检质量保证手册》进行严格管理[7-8]。

1.3 观察指标 (1)观察与记录晨痰和随机痰的检测时间。(2)记录与观察晨痰和随机痰的检测阳性率。(3)以罗氏培养法检测作为诊断的金标准，判断晨痰和随机痰诊断的敏感性与特异性。

1.4 统计学方法 采用SPSS21.00软件处理数据，计量数据与计数数据分别采用均数±标准差、率(%)表示，两两对比方法为t检验与χ2检验，检验水准为α=0.05。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检测时间对比 在70例患者中，晨痰的液基细胞学涂片法检测时间为(3.21±0.21)h，随机痰的检测时间为(3.31±0.18)h，随机痰检测时间多于晨痰，二者对比差异无统计学意义(t=0.872，P=0.218>0.05)。

2.2 抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测阳性率对比 在70例患者中，随机痰的检测阳性率为74.3%(52/70)，较晨痰的90.0%(63/70)低(t=10.360，P=0.001<0.05)。

2.3 诊断价值 在70例患者中，罗氏培养法诊断为抗酸杆菌阳性64例，为此随机痰、晨痰的抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测敏感性与特异性分别为100.0%(6/6)、100.0%(6/6)和81.3%(52/64)、98.4%(63/64)。晨痰的抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测敏感性与随机痰对比差异无统计学意义(χ2=0.000，P=1.000>0.05)，检测特异性高于随机痰(χ2=10.360，P=0.001<0.05)。见表1。

表1 晨痰和随机痰液基细胞学涂片法检测抗酸杆菌的敏感性与特异性(n=70)

3 讨论

结核病是由结核分枝杆菌引起的一种传染病，严重危害患者健康[9]。早期诊断结核病主要通过检测，为此加强临床检测具有重要价值。抗酸杆菌是结核病患者体内的一种传染性病菌，基本存在于患者肺部病灶的坏死组织内，可通过排痰将抗酸杆菌排至外界空气中，因此患者痰液内可检测到抗酸杆菌，也为临床诊断提供了基础[10]。抗酸染色冷染法是抗酸杆菌检验的常用手段，但其诊断特异性与敏感性有所差异，导致其应用受限。荧光金胺O法具有染色明显、操作简易等特点，适合于检测排菌量少结核病，就某一方面而言，有利于结核病患者病灶组织中抗酸杆菌检出率的提高，但是检测成本比较高[11]。聚合酶链反应具有很高敏感性和特异性，但对于技术操作的要求较高，不利于很多医院开展。

本文结果显示，在70例患者中，随机痰与晨痰的液基细胞学涂片法检测时间对比差异无统计学意义，表明抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测具有很好的快速性。分析可知：晨痰检测多为批量次检测，而随机痰检测多为单个检测，从而可增加一定的检测时间。但是抗酸杆菌液基细胞学涂片法为一个既省时又低成本的方法，且在操作中的人为因素影响比较少，有很好的生物安全性，同时其操作易标准化，在单个检测与批量检测时间的耗时都较少[12]。

本文结果显示，在70例患者中，随机痰的检测阳性率低于晨痰。分析可知：晨痰为持续8h左右产生的痰液，累计的物质相对较多，能有效反映机体抗酸杆菌的感染情况。随机痰多为水样痰，主要是一些来自上呼吸道或口腔的分泌物产生的痰，故检测阳性率较低。痰结核杆菌抗酸杆菌检查对结核病诊断以及早期预防管理传染源有着决定性作用，但对于标本质量的要求比较高[13]。患者在清晨时易于咳出黏液痰、干酪痰、血性痰，其均由患者肺部病灶坏死组织与气管内分泌物产生，黏度相对较高，在检测时可检出大量的抗酸杆菌，从而具有较高的阳性检出率。同时在检测结核病患者痰涂片抗酸杆菌时，需留取足够痰液量的晨痰，进而有利于痰涂片抗酸杆菌检出率的提高。并且晨痰的标本采集质量比较高，随机痰的标本采集质量有待提高，为此需重视标本采集前质量控制，需由医务人员在采集痰液标本前向患者介绍的各种注意事项，以留取最佳且合格的痰液检测标本。

当前结核病防控主要问题是缺乏及时有效可靠的诊断方法，传统的结核病诊断方法均存在一定的局限性。抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测是开展结核病控制项目符合成本效益原则的一种细菌学试验技术，具有可靠、快速等优势。本文结果显示，罗氏培养法诊断为抗酸杆菌阳性64例，为此随机痰、晨痰的抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测敏感性与特异性分别为100.0%、100.0%和81.3%、98.4%；晨痰的抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测敏感性与随机痰对比差异无统计学意义(P>0.05)，而检测特异性高于随机痰(P<0.05)，说明晨痰在检测抗酸杆菌中具有更高的特异性。分析可知：晨痰在分泌过程中具有均匀性和不间断性，从而可提高检测的阳性率。同时很多随机痰的采样方法不适宜，在分布中多为水痰，标本质量比较差，在操作中有一定的误差。且液基细胞学涂片法在检测中需要比较高的生物安全性，随机痰的采样也有一定的生物安全危险，为此在检测中需要及时保障检测人员的安全[14]。不过本研究存在一定不足，未纳入其他更多的方法进行对比分析，调查人数也比较少，未纳入健康人群进行探讨，将在后续研究中分析。

总之，抗酸杆菌液基细胞学涂片法检测结核病的检测时间比较短，同时相对于随机痰，晨痰在检测抗酸杆菌中具有更高的检测特异性，值得临床借鉴。