山羊传染性胸膜肺炎研究进展

孟令楠，冀红芹，范俊娟，张文晶，王利新，贾富勃*

（1.辽宁农业职业技术学院，辽宁 营口 115009；2.大石桥市农业农村事务中心，辽宁 营口 115100）

山羊传染性胸膜肺炎（CCPP）是一种具有高度传染性的急性或慢性呼吸系统疾病，以传播迅速、高发病率与病死率为主要特点。CCPP可对全球山羊的养殖与经济效益产生不良影响。因此，各国均积极采取相应措施研究诊断防治CCPP 的方法。1996 年，Thiaucourt 等[1]开发了1 种特异性竞争酶联免疫吸附测定法，对诊断CCPP 具有很高的特异性和灵敏性。2012 年，Nicholas 等[2]采用基于基因分子的PCR 检测法，提高了CCPP 的检测水平；同时也可采用快速乳胶凝集试验进行抗体检测。2019 年，Yatoo 等[3]对比了不同抗生素对CCPP的治疗效果，结果显示，与土霉素和恩诺沙星相比，泰乐菌素效果更好、更安全。本文针对在不同时期提出的诊断方法和治疗措施进行了梳理和总结，以期CCPP的防控和治疗提供一些新的思路。

1 流行病学

1.1 病原

CCPP 由山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasma capricolumsubsp.Capripneumoniae，Mccp）引起，又称烂肺病。1873 年，阿尔及利亚首次报道CCPP[4]；1976 年，肯尼亚首次分离得到CCPP，命名为F38 株[5]。CCPP 的病原菌Mccp属柔膜细菌类，无细胞壁，但具有半乳聚糖和小基因组（0.58～1.35 Mb）。

1.2 宿主

Thiaucourt 等[6]提出，CCPP 只感染山羊。McMartin等[7]研究提出，无论自然或试验条件下，Mccp 均不会引起绵羊患病。但也有研究表明，在野生动物中有CCPP 病例出现，如野生绵羊、野生山羊、瞪羚、藏羚羊、阿拉伯大羚羊[8]。2002 年，Houshaymi 等[9]在与患CCPP 的山羊接触的健康绵羊体内分离得到Mccp。在埃塞俄比亚北部一项关于CCPP的血清学调查显示，137只试验绵羊中有25只（占18.3%）血清呈阳性[10]。绵羊是Mccp 的家养宿主，野生反刍动物类是Mccp 的野生宿主[11]；Mccp 不仅能够感染山羊，同时对绵羊和野生动物也具有一定威胁。

1.3 传播途径

CCPP经常在患病动物引入易感畜群后暴发。传播途径主要为与患病动物密切接触，通过咳嗽释放的飞沫或吸入空气中的病原菌传染[12]。Mccp在外界环境中存活的时间较短（3～14 d），受到污染的物体、污染物、动物产品不能成为疾病的间接传播媒介。一些动物有可能成为Mccp潜在的慢性携带者，在疾病的传播中起重要作用[13]。

1.4 季节性因素

季节因素通常与CCPP疫情的暴发具有密切关系。在北非，CCPP 多发生于冬季；在阿曼，CCPP 疫情在温度最低、降雨量最高的1月份暴发更频繁[14]。此外，在中国西藏的拉达克，冬季期间可观察到CCPP在山羊中频繁暴发，特别是11月至第二年4月（当地冬季较长，自10月至第二年5月止）[15]。尽管寒冷的天气被认为是诱发CCPP的主要因素，但无论来自任何种类应激，如交通、营养或气候改变等，均可诱使动物感染Mccp并导致疾病暴发。

1.5 公共卫生

CCPP 不是人畜共患病，目前尚无任何证据表明人类能够感染Mccp或有感染Mccp的风险。

2 临床症状及病理变化

CCPP 的潜伏期通常为10 d 左右，感染后表现为精神沉郁、高热（41 °C），怀孕母羊可能出现流产。随着病情发展，呼吸系统症状逐渐明显，呼吸加快且表现疼痛，此时视诊可发现病羊呈明显腹式呼吸，伴有剧烈咳嗽及湿性啰音[16]。疾病晚期时，动物不能移动，站立时两腿叉开，颈部僵硬且伸展，唾液不断从口中滴落，鼻腔被黏液、脓性分泌物阻塞。急性病例的病变通常发生于单个肺中，病变肺呈葡萄酒色，可完全肝化，通常伴随纤维素性胸膜炎，胸腔积聚大量积液[17]。

3 诊断方法

3.1 微生物学法鉴定

采集病羊鼻液拭子、胸腔积液或者肺组织作分离培养样本，一旦分离得到Mccp 纯培养物，可通过以下方法鉴定：（1）基于Mccp的代谢特点，如可分解葡萄糖、消化利用酪蛋白和血清、氯化四唑还原等[18]；（2）根据Mccp 遗传组成、特定基因片段进行PCR 鉴定，如，16S rRNA 保守基因片段548 bp酶切鉴定[19]；（3）核酸扩增技术（NAATs），设计特异性引物MCCP-spec-F/R（扩增片段大小为318 bp），从Mccp基因组中扩增目的片段[20]；（4）使用Cap-21基因探针杂交从丝状支原体簇成员中鉴别Mccp 或Mcc，采用F38-12基因探针从Mccp 或Mcc 中鉴定Mccp[21]；（5）通过常规（革兰氏染色）和特异性染色（二烯氏染色）或生长沉淀试验（GPT）、生长抑制试验（GIT）和生化试验鉴定；（6）更复杂的表征方法，如多位点序列分型（MLST）、质谱分析（MALDI-TOF MS）等[22]。

对于上述鉴定方法，标准化条件下的特定样品收集、无菌培养、分离等操作对诊断的准确性至关重要。

3.2 分子生物学及血清学诊断

Mccp体外生长性能差、培养成本昂贵、分离率低。传统的分离鉴定是OIE指定的标准检测方法，但分子生物学检测已成为CCPP诊断的新措施，如凝集试验（非特异性和特异性）、竞争酶联免疫吸附试验（c-ELISA）、荧光抗体测定（FAT）、补体结合测定（CFT）、间接血凝试验（IHT）、扩增试验（PCR、杂交、测序）是目前常采用的诊断试验，其中乳胶凝集、c-ELISA 和PCR 最为常用。但在大多数国家，高昂的检测成本以及设备缺乏等情况制约了检测方法的使用[22]。因此，需要重点开发一种新型、灵敏、特异性强、现场适用、成本低、效益高的诊断方法。目前已经开发了非特异性凝集试验，但这种方法无法区分支原体的其他种和亚种，尤其是丝状支原体亚种[23]。特异性乳胶凝集试验（LAT）利用全血或血清对CCPP 进行快速诊断，更适用于现场的实时诊断试验，比CFT法更灵敏[24]，但与Mccp多糖相似的其他支原体或是某些细菌都可能发生交叉反应[25]。ELISA 应用于诊断CCPP 已有一段时间，其中c-ELISA 是具有高特异性（99.8%～100.0%)的新检测方法[26]，但因成本问题并未得到广泛引用。

3.3 影像学诊断

超声检查是应用于诊断CCPP所引起的肺、胸膜、胸腔和相关结构的病变的一种方法，可显示内脏胸膜表面的不规则性。Tharwat 等[27]以超声波作为诊断工具，研究了受CCPP 影响的山羊的超声图像变化，发现X 射线片能够显示肺的实变区域为致密的白色区域以及胸膜腔积液、肺叶实变或间质混浊等，从而进行诊断。

4 治疗

目前，CCPP主要采用抗生素药物治疗，大环内酯类药物尤其是泰乐菌素被认为是首选药物[28]。此外，使用土霉素治疗CCPP 被证明有效[29]，但因土霉素在大部分CCPP流行地区长期使用产生了耐药性及一些副作用，如土霉素对山羊胎儿存在致畸性。此外，预防性使用土霉素引发额外风险，即在极小剂量下也可使支原体对抗生素产生耐药。其他抗生素如氟喹诺酮类（恩诺沙星、达氟沙星）、氨基糖苷类（链霉素）和截短侧耳素（泰妙菌素）也被应用于CCPP 的治疗。目前，Mccp 菌株对多种抗生素敏感，包括大环内酯类、林可酰胺类和四环素类。有研究表明，已鉴定得到一些对四环素类、红霉素和链霉素具有耐药性的菌株[30]。因此，合理使用抗生素是亟须面对解决的问题。

基于抗生素的治疗使CCPP 得到暂时缓解，但为更好地防止抗生素耐药性产生，应尽量减少使用抗生素，使用前建议先进行抗生素敏感性试验或采用交替使用抗生素的方法。更好的防控方法是通过接种疫苗预防，避免频繁、大规模使用抗生素产生的耐药性问题以及产生的巨额治疗费用。

5 展望

诊断及治疗CCPP的方法仍待研究探索，Mccp的分离鉴定方法也仍需改进，研究成本更低、更适用于现场使用的新诊断技术。应合理使用抗生素，包括常规大环内酯类和四环素类、新型抗生素（氟喹诺酮类），要定期评估Mccp对抗生素的敏感性，有效治疗疾病并最大限度地降低抗生素产生耐药性的风险。注射疫苗进行预防可更好地防控CCPP。从常规灭活疫苗发展至亚单位和重组疫苗，为获得更好的免疫应答反应，应坚持探索发现免疫原性更好的抗原。因此，制定适当的诊断、预防和治疗制度是非常重要的，也是今后努力的方向。