浅析牛结节性皮肤病诊断与综合防治措施

钱玉玺，刘夕验

（山东省沂水县动物疫病预防控制中心，山东 沂水 276400）

近年来，牛养殖业不断发展与壮大，养牛产业已成为我国畜牧业经济的支柱产业。随着人民生活水平不断提高，人们对优质牛肉、牛奶及其他牛产品的需求量也呈不断上升趋势，这直接促进了牛养殖业发展。然而，牛疾病的发生与传播仍是阻碍养牛产业发展的制约性因素。牛结节性皮肤病是一种急性、亚急性或慢性的病毒性传染病，是OIE规定必须报告的疫病[1]。本病最早发现于1929年，我国于1989年首次报道本病。本病不仅对牛的健康造成一定的损害，对养殖场户也会造成一定的经济损失。

1 病原特性

本病的病原为牛结节性皮肤病病毒，属痘病毒科中羊痘病毒属中的一种，形态特征与痘病毒相似，有囊膜，无血凝活性[2]。本病毒对外界环境的抵抗力较强，在正常温度下存活时间可达40 d，存在于皮肤痂皮中的病毒存活时间更长。本病毒对热敏感，55 ℃ 环境条件下经120 min或65 ℃ 环境条件下经30 min均可将其杀死，并且不耐强酸、强碱，对氯仿、甲醛、乙醚敏感[3]。

2 流行病学

各个年龄阶段，不同品种、性别的牛对本病均具有一定的易感性，主要传染源是患病牛，其皮肤结节、唾液、乳汁、肌肉、淋巴结、内脏、鼻腔分泌物及精液内都有病毒存在，患病牛康复后仍可携带病毒达21 d以上[4]。本病主要呈直接接触传播外，可通过节肢动物（蚊、蠓）进行传播，还可以经饮水、饲料传染。本病在蚊虫肆虐的季节较为多发，有时冬季也可发生。感染公牛的精子中也可存在病毒，但对其接种疫苗后可阻止病毒垂直传播。本病的发病率存在较大差异，即使是在同一疫区，各个养殖场的发病情况也不尽相同。相关流行病学调查研究表明，本病的发病 率 为2 % ～ 20 %，病 死 率 通 常 为10 % ～20 %；个别地区的发病率可达80 % 以上，病死率为40 % ～ 75 %[5-6]。

3 临床症状

本病自然感染的潜伏期为14～35 d，临床症状往往呈急性经过发病初期体温上升至41 ℃，呈稽留热，持续约5～7 d。患病牛出现鼻炎、结膜炎和角膜炎。发病4～12 d后体表的颈部、胸部、会阴等处皮肤出现圆形隆起、质地坚硬、直径大小2～4 cm或更大的结节，触摸有痛感。这些皮肤结节可聚集成大小不等的不规则肿块，发病14 d后皮肤结节发生浆液性坏死和结痂，再加上蚊虫叮咬和摩擦，结节破溃处结痂脱落，形成空洞[7]。

患病牛的肩前、腹股沟外、股前等部位的浅表淋巴结肿大最为突出，胸下部、四肢和阴部出现水肿；眼结膜、口腔黏膜、气管发生溃疡，引起病牛出现大量流泪、流涎和流鼻液等症状，这些分泌物都含有病原。此外，泌乳牛产乳量急剧下降，妊娠母牛可发生流产，继发子官内膜炎。公牛患病后28～42 d内发生不育，还可能发生睾丸炎，造成公牛的永久性不育[8-9]。

4 病理变化

对病死牛进行解剖可见皮下组织有浆液性浸润，结节腔内含有干酪样灰白色坏死组织，有的结节还伴有化脓和出血。结节还可蔓延至皮下组织和骨骼。患病牛体表肌肉、气管炎、肺、瘤胃、皱胃，甚至肾表面都可能有类似结节分布。结节处的皮肤、皮下组织及临近的肌肉组织有呈红色或黄色的浆液性、出血性渗出液。对表皮细胞进行组织性观察还可观察到表皮细胞、脂腺细胞肿胀，胞质内有空泡，有的相互融合形成微水泡，这种微水泡也见于表皮基底层。除上述病理变化外，病死牛还会出现淋巴结增生性肿大、充血和出血；口腔、鼻腔黏膜溃疡[10-11]。发病严重的牛会因纵膈淋巴结感染而挺起胸膜炎，关节内有纤维蛋白渗出物，睾丸和膀胱也出现炎型病变。

5 诊断

有经验的兽医可根据临床症状、流行病学和病理变化可作出初步诊断，若需要进一步明确确诊则需要进行实验室检查。常用的实验室诊断方法有以下几种：

5.1 镜检

用透射电子显微镜诊断是初步诊断本病最直接、最快速的方法。将病料研磨制成悬浊液，滴1滴悬浊液在蜡板上，1 min后加1滴pH7.8的Tris/EDTA缓冲液，20 s后滴加pH7.2的1 % 磷钨酸，10 s后用滤纸吸干或自然干燥，镜检[12]。

5.2 动物试验与病毒分离鉴定

可取病牛新鲜结节做成乳剂，皮内或皮下接种于易感牛，4～7 d内接种部发生坚硬、疼痛性肿胀，局部淋巴结肿大，此时可在肿胀物及其下层肌肉以及唾液、血液和脾脏中分离病毒[13]。

5.3 血清学试验

包括间接荧光抗体技术、病毒中和试验和酶联免疫吸附试验。用ELISA检测的样本应在出现临床症状的第1周而中和抗体产生之前采集。病毒中和试验常用且有效，但由于疙瘩皮肤病感染主要引起细胞免疫，因此对于中和抗体水平低的牛，这种方法诊断较难。

5.4 PCR方法

通用的实时定量PCR方法在检测CaPV病毒时较其他诊断方法更为敏感。该检测方法主要是检测CaPV病毒的DNA，因此不能区分同属的不同品种。RT-PCR方法已经在很多文献中被报道。采用RT-PCR方法对CaPV进行检测，比传统的凝胶PCR检测方法更为灵敏。该方法的检测水平每次反应均少于10个基因拷贝，与其他痘病毒无交又反应，在检测其他痘病毒或者阴性样本时，也未出现假阳性结果。RTPCR检测方法具有定量、简单、灵敏、特异等特点，可对CaPV病毒进行快速和高通量的测定。

6 综合防控技术

对于本病目前尚无特异性治疗方法，对患病牛一般进行对症治疗。对已经出现破溃结节的患病牛往往首先采用外科方法处理，彻底用药物清创，溃疡面涂擦碘甘油，有时为了防止并发症，全身可使用抗生素或磺胺类药物采取治疗[14]。

平时加强饲养管理，非必要不从外地引进牛只，必要引进时一定要做好本病的检测，对引进牛就行隔离和抗体检测，确保观察2个月以上且无病后，方可进行混群饲养。当一旦有疫情发生时，要立即隔离患病牛和可疑患病牛，疫区要严格封锁，对发病圈舍内的地面、墙面、器具等进行消毒，粪便进行无害化处理，做好消灭蚊蝇工作，控制传播媒介的传播[15]。

因为本病的病原与绵羊痘病毒、山羊痘病毒存在抗原同源性和交叉保护，这几种病毒的疫苗都能够用来预防牛的结节性皮肤病。近年来，临床上应用分离病毒制备的鸡胚化弱毒苗对牛进行免疫接种，具有一定的免疫保护作用。

综上所述，要想减少本病的发生，从业者一定要树立“养防结合，防重于治”的科学养殖理念，摸清本病的发病规律和流行特点，掌握本病的诊断技术和病理变化特点，做好疫苗预防，加强饲养饲喂和生产管理，以降低本病的发病率。