牛结节疹病的诊断和防治分析

邓曙初

(湖南省永州市零陵区富家桥镇农业综合服务中心，湖南 永州 425024)

0 引言

牛结节疹病又称牛结节性皮肤病、牛疙瘩皮肤病、牛结节性皮炎等，其病原为牛结节性皮肤病病毒，是养牛过程中较为常见的一种病毒性皮肤病。该病主要通过蚊虫等节肢动物叮咬而传播，一旦发生会对牛体表皮肤造成严重损害，导致牛皮的加工及销售受到影响。虽然牛结节疹病的死亡率不高，但是其病毒传播速度极快，未及时防控极容易导致病情的扩大蔓延，必须采取针对性措施以有效调查该病的流行病学，在疫情发生后立即采取紧急防控措施，从而控制疫病于萌发阶段，防止造成进一步的损失。

1 病原

牛结节性皮肤病病毒属于痘病毒，其与牛痘病毒存在较大差异，但是与山羊痘病毒以及绵阳痘病毒较为相似，均属于山羊痘病毒属。牛结节性皮肤病病毒仅具备一种血清型，在血清学上牛结节性皮肤病病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒存在一定的交叉反应。牛结节性皮肤病病毒是一种DNA双链病毒，其发生遗传变异的概率极低。牛结节性皮肤病病毒具备囊膜，因而对外界环境抵抗力较强，pH值在6.6～8.6时，牛结节性皮肤病病毒可长期存活。在风干牛皮以及皮肤结节内，该病毒存活时间可达到35 d。在组织培养液内、4℃甘油盐水内，病毒存活时间一般为4～6个月。在干燥的圈舍环境内，病毒存活时间可持续数月。在-20℃的温度条件下，病毒存活时间可达几年，而在-80℃的温度条件下存活时间可达10年。牛结节性皮肤病病毒对热较为敏感，55℃的环境条件病毒仅可存活2 h，而在65℃的环境内病毒即彻底灭活[1]。牛结节性皮肤病病毒对酸、碱以及福尔马林、酒精、石炭酸、乙醚、氯仿等常见消毒液均较为敏感。

2 流行特点

牛结节疹病最为重要的传染源以及自然宿主便是牛只，任何品种、任何性别、任何年龄的牛只均对该病易感，但是相比较而言，普通牛只易感性最高，奶牛以及亚洲水牛亦较为易感[2]。水牛、家兔、绵羊、山羊、长颈鹿以及黑羚羊液可能感染该病毒。牛结节疹病潜伏期一般为7～14 d，牛只在患病后其皮肤表面疙瘩、唾液、鼻液、血液、精液、尿液、乳汁、肌肉、脾脏以及淋巴结等各个部位内均包含有大量病毒，经过治疗即使病牛康复，其带毒时间仍然可持续超过21 d。牛结节疹病的发病率为3%～85%，而其死亡率一般为1%～3%。若病毒毒株变异、病牛免疫力较低，其死亡率将有所提升。在同一养殖条件下，同群牛只在感染该病后，病牛由隐性感染至死亡差异性较大，这可能与传播媒介密切相关。蚊蝇对牛结节性皮肤病病毒的传播发挥着重要作用，尤其是库蚊属、伊蚊属等，当前兽医工作者以及相关研究人员均对牛结节疹病进行了大量研究，但是截至当前，仍然未掌握造成牛结节性皮肤病病毒传播的主要途径，在后期仍需在此方面扩大研究，并采取针对性的防控措施，以有效控制该病，减少该病可能造成的危害[3]。

3 临床症状

牛结节疹病的潜伏期一般为7～14 d，而在实验室条件下其感染后的潜伏期为4～12 d，其中以7 d为最多。在感染牛结节疹病后，患病牛只体温明显升高，甚至超过了40℃，其高温症状可持续7 d左右。在感染初期，牛只出现鼻炎或者结膜炎症状，与此同时鼻部以及眼部不断流出黏脓状分泌物，随着病情发展成为角膜炎。患病牛只体表皮肤出现圆形较为坚硬、向外凸起的直径为20～30 mm的结节，其结节存在明显界限，在触碰后病牛存在明显痛感，绝大多数情况下，病牛头部、颈部、四肢、口腔、胸部、背部、会阴以及直肠等多个部位可出现结节，随着病情发展逐渐转变为溃疡，甚至遍布全身。若病情严重，病牛颊内面以及牙床还会出现肉芽肿性病变。

病牛耳下、肩前、腹股沟、股前以及后肢等多个部位淋巴结均存在明显的水肿现象，特别是其四肢部位将明显肿大，体积甚至达到正常的3～4倍。若牛只病情严重，还会出现原发性肺炎或者继发性肺炎，此时其很难康复。哺乳期母牛在患病后，还会发生乳房炎，这会严重影响其产奶量；妊娠母牛患病后常引发流产；公牛在患病后4～6周即可表现出不孕症状，若发生睾丸炎，则可能引发终生不孕。

在切开牛只病变部位皮肤后，可见其切面浆液颜色为灰红色，切开结节后，坏死组织即表现为灰白色干酪样，组织内部包含有血液及脓液。在病牛表皮及真皮上，其结节大小各不相同，部分结节会相互聚集而形成肿块，其形状各不相同，随着病情发展会出现坏死现象，病牛皮肤很难自然硬固，牛只病变症状将长期出现，可达数月乃至数年。若牛只坏死部位皮肤遭受蝇虫叮咬，可能会引发结痂脱落，同时其病害部位将会留下孔洞，部分牛只可能因蚊虫叮咬而患有蝇蛆病，这种情况多因化脓性细菌感染而引发。此外，牛只在患病后通常精神萎靡、食欲不佳、呼吸受阻，大量黏稠状鼻液从其鼻孔内流出，同时口腔部位不断流涎。犊牛在患病后死亡率将超过10%。

4 病理变化

对病死牛尸体剖检，可见其呼吸道、消化道、泌尿生殖道等多个部位黏膜均发生病变，尤其是牛只口腔、鼻腔、咽喉、气管、支气管、肺脏、皱胃、包皮、子宫壁、引导等部位病变现象较为明显。病牛皮下、结缔、黏膜下等组织可见血性或者浆液性渗出液，其颜色为黄色或者红色，结节周围通常不会发生明显的炎症反应。在发病初期，病牛皮肤可见表皮增生、水肿以及皮样细胞浸润等现象，同时可见淋巴细胞、浆细胞，病牛皮下组织以及真皮组织血管淋巴结出现栓塞，表现为血炎、淋巴管炎，其血管周边聚集有大量稀薄，可见胞浆内出现呈圆形或者卵圆形的包涵体。

5 实验室诊断

可结合流行特点、临床症状、病理变化对病牛触诊，要想确诊还需对病牛实验室诊断。

在无菌条件下采集病牛皮肤结节、淋巴结结节以及肺脏等病料，将病毒分离出后进行检测，在病牛体内牛结节性皮肤病病毒可存活35 d接着才会出现中和抗体，也就是在出现临床症状7 d后采集样品并进行PCR检测；在中和抗体产生前便出现临床症状，可在7 d内采集样品并进行ELISA检测；对病毒血清进行检测，一般是选择发病前4 d内血清，并向其中加入肝素；若样品需进行组织解剖学检测，可将其存放于10%的福尔马林溶液内并置入冰块以保存。

可采用透射电子显微镜以检查牛结节性皮肤病病毒，这是最为迅速的一种方法。通过显微镜，可观察到病毒大小为270 nm×290 nm，形状为短管状或者砖块状。在检查工作具体开展过程中，首先需研磨病料，将其制成悬浊液，向蜡板上滴入1滴，1 min后滴入1滴pH为7.8的Tris-ED-TAbuffer，20 s后滴入pH值为7.2的1%的磷钨酸，待干燥后即可进行镜检。

血清学诊断常见措施为病毒中和实验、间接荧光抗体试验、ELISA检测等。其中最为常见的为病毒中和试验，其具备较高的效率，但是若病牛体内抗体水平不高发生二次感染采用此方法将很难确诊。由于牛结节性皮肤病抗体以及痘病毒感染所引发的伪牛结节疹病存在交叉反应，因而采取荧光抗体试验检测发展的检验特异性并不理想[4]。ELISA检测方法具备较高的敏感性以及较好的特异性，在具体操作过程中所需投入的精力以及时间较多，因而该方法的应用也受到了一定影响。在具体诊断过程中，需要结合实际情况采取适宜的实验室检测方法。

采用血清学检验方法很难彻底区分山羊痘病毒、绵羊痘病毒以及牛结节性皮肤病病毒，因而需要在分子水平上对其检验。通常可对病牛基因片段PCR检测以鉴定病毒，限制性核酸内切酶可酶切PCR产物以达到鉴定目的。

6 治疗方法

1)若病牛皮肤结节已破溃，可将其溃烂部位采用手术刀切除，利用2%的双氧水对创口反复清洗，接着采用1%的高锰酸钾溶液反复冲洗，向其中填充磺胺结晶消炎粉，并将碘甘油涂抹于溃疡面，或者将100g黄柏、10g雄黄以及5g冰片混合后研碎，用醋调和后涂抹于溃疡面。

2)为病牛肌肉注射800万IU的青霉素以及500万IU的链霉素，用药2次/d，为病牛喂服黄芪多糖，以达到抗病毒目的。

7 预防措施

7.1 及时隔离消杀

牛结节疹病是一种牛羊共患病，在牛群或者羊群内一旦发现患病牲畜，立即对其隔离，严禁混合饲养牛羊，同时彻底对牛只皮肤以及圈舍做好消毒工作。牛结节性皮肤病病毒对强酸、强碱敏感性均较高，因而在消毒过程中可采用3.0%碘溶液、0.5%新洁尔灭溶液、3.0%次氯酸钠溶液等作为消毒药液[5]。

7.2 重视蚊蝇防控及消毒防控

在养殖场内需要构建完善的日常卫生消毒管理制度并严格落实，确保养殖场具备较高的生物安全水平。养殖场内一旦出现患病牛只，必须每天对场区内严格消毒，对养殖场内的金属设施，一般采取熏蒸或者火焰方式消毒；养殖场内圈舍、场地以及车辆等一般采取2%烧碱溶液等各种有效消毒剂消毒；养殖场内电疗可采取焚烧处理或者发酵处理；粪便一般采取堆积密封发酵；对病死牛的尸体采取严格的无害化处理方式。若养殖场内不存在患病牛只但是相邻区域养殖场或者所在地存在此疫情，养殖场至少需要开展3次/周消毒作业[6]。在每年的3-10月。养殖场还需要对蚊蝇防控工作加强重视，若养殖场内存在库蚊属、伊蚊属等，必须对场内及周边杂草及时清除。若采取一定防控措施后养殖场内蚊蝇防控效果仍然不理想，应当注意将消杀频次适当提升。另外，养殖场还需要积极与林业以及草业等相关主管部门加强沟通，相互间通力合作，动态调查并监测易感野生动物以及媒介昆虫，从而实现对牛结节疹病更为科学的评估。

7.3 科学调运防控，全面净化污染源

在夏季或者对牛只运输后，在应激反应作用下牛只更易发生或者感染牛结节疹病，因而养殖户应当坚持自繁自育、全进全出的养殖管理方案，尽量避免从外地引种，确需引种时，在牛只调运过程中必须强化其疫病防控工作。养殖场需要结合实际情况制定科学合理的购牛计划，在确定购牛计划后，采取多种措施以掌握待引入牛只养殖场的实际情况，明确牛只具体健康状况，严禁引入疑似病牛[7]。在对牛只装车前，必须对车辆彻底清理并严格消毒。待所购买牛只运输至养殖场后，派遣专人仔细排查牛只健康状况。在到达养殖场后，对新采购牛只隔离饲养，其隔离时间须超过28 d，同时在隔离过程中还应注意强化牛舍消毒管理，动态监测牛群健康状况。一旦养殖场发现牛结节疹病病牛，严禁调运任何牛只，以防止疫病发生进一步的扩散以及蔓延。

7.4 接种疫苗

若某一地区已发生牛结节疹病，须为其健康牛只免疫接种，以避免牛结节性皮肤病病毒进一步扩散，有效降低牛结节疹病的发生概率。当前，我国最为常见的疫苗为羊痘鸡胚化弱毒疫苗，其免疫效果良好，部分国家及地区为牛群接种绵羊痘病毒亦可获取良好预防效果[8]。一般是在每年的3-4月为牛群接种，接种剂量为3 mL/头。其次，母牛体内若存在母源抗体，进而通过初乳为新生犊牛传播抗体，以确保犊牛在出生后6个月内免遭感染。最后，在患病牛只康复后，其体内会存在滴度较高的中和抗体，上述中和抗体会在牛只体内保持数年，这样可有效降低牛只再次感染牛结节疹病的概率。

7.5 强化饲养管理

在日常养殖中，需要为牛群提供清洁卫生的饲料，避免其遭受农药或者化肥污染，重视饲料清洁及场舍通风，确保其保持干燥状态，以防止饲料变质。结合牛群特点对其规律饲喂，避免牛只饥饱无常。每天为牛群提供充足饮水，确保饮水清洁卫生。还应结合不同品种牛只体质、习性、食性等特点对其分群管理，根据结合牛群营养需求特点为其科学合理的配制饲料，以满足牛只营养需求。

8 结语

我国牛结节疹病的确诊时间较短，一部分养殖户对牛结节疹病存在严重的认识不足。近年来，针对该病国家已出台了一系列防控方案，基层畜牧兽医工作人员需要深入到养殖场内，严格落实该病相关防疫要求，同时积极为养殖户宣传牛结节疹病的相关知识，帮助养殖户明确该病的流行特点、渐变的诊断方法以及有效的防控措施，不断提升养殖人员防范意识，以降低该病发生的概率，为牛群的养殖安全奠定坚实的基础。