丽水市十三项呼吸道病原体感染情况及特点分析

黄振强,马亚萍,曲春生,张旭颖,杨景森

呼吸道病毒是指由于侵犯呼吸道所引起的呼吸道或呼吸道外组织器官病变的一大类病毒,是引起呼吸道感染的主要病原体,其它类型的病原体,包括肺炎支原体、肺炎衣原体等,也可引起呼吸道系统感染[1-2]。呼吸道系统感染是人类最常见的传染病之一,严重的可直接导致患者死亡。空气传播是其主要传播途径,具有传播速度快、传播能力强、传播范围广等特点,极易引起大范围的暴发流行。因此,呼吸道病原体的检测和分型对疾病的诊疗和防控具有重要的意义。呼吸道病原体抗原或抗体的检测是实验室常用的检测方法,但是免疫学方法由于特异度和灵敏度的局限性,以及与患者的免疫状态关联性较大,检测结果常给临床造成困扰[3]。实时荧光PCR法具有高灵敏度和特异度,但单次检测能够鉴定的病原体种类较少,不利于呼吸道病原体的鉴定与分型。PCR毛细电泳片段分析法在保留PCR高灵敏度和特异度的基础上,可同时鉴定多种呼吸道病原体,提高检测效率。本研究回顾性分析2020年3月至2021年12月丽水市人民医院接诊的4035例患者13项呼吸道病原体感染情况,以了解本市呼吸道病原体感染现状,为临床诊疗和疾病防控提供依据。

1 对象与方法

1.1 对象 回顾性分析2020年3月至2021年12月丽水市人民医院就诊的4035例呼吸道感染患者的鼻咽拭子呼吸道病原体PCR毛细电泳检测结果,年龄1月至107岁不等,其中男性2408例,女性1627例。呼吸道感染诊断按照《内科学》[4]诊断标准:出现喷嚏、咳嗽、鼻塞、咽喉痛痒干等症状的患者或者体温＞38℃的发热患者,就诊前患者未服用药物。

1.2 方法 采集患者鼻咽拭子,利用宁波海尔施公司提供的核酸提取或纯化试剂盒(货号:1060132)及全自动核酸提取仪SLA-32(台湾圆点奈米公司)提取核酸,采用PCR毛细电泳片段分析法,利用宁波海尔施公司生产的13种呼吸道病原体多重检测试剂盒(货号:1060071)进行PCR扩增并通过T400 Sabger测序仪(宁波海尔施公司)进行呼吸道病原体的检测与分型。同时检测人源RNA和DNA以监控样本检测质量,人源RNA或DNA为阴性时需重新进行采样复检。通过毛细电泳标准品判断检测结果,判断标准:扩增产物目的位点峰高度低于标准品低峰时判断为阴性;高于标准峰高峰时判断为阳性;高于标准品低峰而低于标准品高峰时判断为灰区,需重新进行检测,若仍为灰区时则判断为阳性。所有操作均按照试剂盒及仪器说明书进行。13项呼吸道病原体包括呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)、肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,Mp)、衣 原 体(chlamydia,Ch)、甲型流感病毒(influenza A virus,Inf A)、甲型H1N1流感病毒(influenza A virus H1N1)、甲型H3N2流感病毒(influenza A virus H3N2)、冠状病毒(human coronavirus,HCo V)、乙型流感病毒(influenza B virus,Inf B)、鼻病毒(human rhinovirus,HRV)、副流感病毒(human parainfluenza virus,HPIV)、偏肺病毒(human metapneumovirus,HMPV)、腺病毒(human adenovirus,HADV)、博卡病毒(bocavirus,Boca)。

1.3 统计学处理 数据利用SPSS 13.0软件进行统计分析,采用χ2检验,检验水准α＝0.05。

2 结果

2.1 呼吸道各类病原体感染情况 4035例就诊患者中共检出阳性1301例,阳性检出率为32.24%。各类呼吸道病原体检出情况见表1。检出率前5位分别 是HRV(16.60%)、HRSV(7.09%)、HPIV(2.87%)、HMPV(2.21%)、HADV(1.96%)。

2.2 混合感染情况 1301例阳性病例中,99例检测出2种及以上病原体,混合感染在阳性病例占比为7.61%。其中双重感染93例,三重感染6例,混合感染以HRV＋Boca及HRSV＋HRV为主,见图1。在13项呼吸道病原体中,Boca(76.0%)发生混合感染率最高,其次为Ch(46.15%),见表2。

表2 呼吸道病毒混合感染率Tab.2 Rates of mixed respiratory pathogen infections

图1 阳性比例中混合感染组合类型及分布Fig.1 Types and distribution of mixed infections

2.3 不同性别13项呼吸道病原体感染情况 2408例男性患者13项呼吸道病原体总检出阳性797例(33.10%),1627例女性患者总检出阳性505例(30.98%),二者差异无统计学意义(χ2＝1.999,P＞0.05)。各类病原体在不同性别人群感染率差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

2.4 不同季节13项呼吸道病原体感染情况 不同季节13项呼吸道病原体整体感染差异无统计学意义(χ2＝1.607,P＝0.658),但HRSV、HRV、HPIV、HMPV及HADV在不同季节感染率差异有统计学意义(P＜0.05)。HRSV在春季感染率较低;与HPIV相反,HRV好发于春秋两季;HMPV在冬季较为流行;春冬两季比夏秋两季更适宜HADV的流行。见表1。

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2.5 不同年龄段13项呼吸道病原体感染情况 未成年人较其它3个年龄段人群的13项呼吸道病原体整体感染率增高(χ2＝439.514,P＜0.001)。与整体感染率相似,未成年人群中HRSV、HRV、HPIV、HADV和Boca等呼吸道病原体感染率也高于其它3个年龄段(P＜0.001),提示未成年人是这类呼吸道病原体易感人群;InfB和HMPV在未成年和青年人群感染率高于中年和老年人群(P＜0.01);其它类型呼吸道病原体感染率在不同人群中差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

3 讨论

本研究主要利用PCR毛细电泳片段分析法进行13项呼吸道病原体检测与分型。4035例就诊患者检出阳性1301例,阳性检出率为32.24%,HRV(16.60%)、HRSV(7.09%)、HPIV(2.87%)、HMPV(2.21%)和HADV(1.96%)是本市主要流行的呼吸道病原体,阳性检出率与国内一些报道相似,但主要流行病原体存在差异,可能与气候、检测人群、检测方法等因素有关[5-7]。呼吸道病原体发生混合感染现象较普遍,阳性占比为7.61%,低于上海市[8]、常熟市[9]近年混合感染率。本市Boca病毒极易发生混合感染,其阳性占比为76.0%,其次为Ch(46.15%),与常熟地区[9]主要发生HMPV混合感染不同。

本研究中,男、女呼吸道病原体整体阳性率分别为33.10%和30.58%,二者差异无统计学意义,与内江市[10]等地区结果一致,同样,各类病原体在不同性别人群感染率无统计学差异。通常认为,秋冬季是呼吸道疾病高发季节[11-12],但我们发现不同季节呼吸道病原体总体感染率并无统计学差异,可能是由于不同病原体最适传播季节不同从而降低了整体感染率季节间的差异性。通过进一步分析,我们发现HRSV、HRV、HPIV、HMPV及HADV在不同季节感染率存在显著差异,与HPIV相反,HRV在春秋两季感染率较高,HRSV在春季感染率最低,HMPV在冬季感染率最高,HADV在春冬两季感染率要高于夏秋两季,揭示了这些病原体流行季节差异性造成了不同季节呼吸道病原体总体感染率无统计学差异。未成年人群中HRSV、HRV、HPIV、HADV、Boca、Inf B和HMPV等呼吸道病原体检出率较高,导致整体检出率也远远高于中、青年人群及老年人群,与何义林[13]、李云[14]等研究结果相一致。这可能与未成年人群免疫系统不完善、生活卫生习惯较差、人群聚集导致易于病原体传播等因素相关[15],因此,未成年人群为呼吸道病原体易感人群,应加强未成年人群呼吸道疾病的防控。

综上所述,本研究系统性分析了本市近2年呼吸道病原体感染情况,进一步加深对本市呼吸道病原体传播特征的认识,有助于呼吸道疾病的临床诊断和用药,从而为呼吸道疾病诊疗和防控提供一定的参考依据。由于时间跨度、受试人群、检测方法、检测病原体种类等方面的不同,尤其是某些呼吸道病原体会在特定年份发生暴发性流行,本研究结果与其它地区,甚至本市以往研究结果存在一定的差异性,但是在一定程度上仍能反应本市呼吸道病原体流行特征及变化情况,后续将加大时间跨度、扩大受试人群继续研究本市呼吸道病原体流行特点,以期为本市呼吸道疾病防控提供更加准确的参考依据。

利益冲突:无

引用本文格式:黄振强,马亚萍,曲春生,等.丽水市十三项呼吸道病原体感染情况及特点分析[J].中国人兽共患病学报,2022,38(10):869-873.DOI:10.3969/j.issn.1002－2694.2022.00.138