儿童耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床分布及其耐药性

周金莲

(新疆维吾尔自治区儿童医院/检验科 新疆 乌鲁木齐 830054)

肺炎克雷伯菌作为一种革兰阴性菌致病菌，该种菌种的出现会引发呼吸道遭受到严重的感染，同时还会引发支气管炎、肺炎等呼吸道感染的产生，一些感染严重者还会出现伤口感染、泌尿系统感染及脑膜炎等感染的产生[1]。近年来，在临床上抗生素被广泛应用，随之而来肺炎克雷伯菌的耐药性也不断增大。临床上相关的调查结果显示，肺炎克雷伯菌的耐药性的出现与菌株中头孢菌素酶、超光谱β-内酰胺酶的形成有直接关系[2]。碳青霉烯类的抗生素种类有亚胺培南、美罗培南、厄他培南等，通过对细胞壁青霉素进行抑制，并与蛋白相结合，从而完成了对粘肽合成的有效组织，使细胞壁的完整性遭受到破坏，取得了杀灭细菌及促进细菌溶解的功效[3]。该类药物的抗菌谱光，对于头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶起到了良好的抵御能力，抗菌活性强，在格兰阴性多重耐药菌中展现出了良好的应用效果。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌属于肺炎克雷伯菌中的一种不常见的耐药菌株类型，形成机制为点作用部位青霉素结合蛋白的改变和碳青霉烯酶的形成[4]。近年来，临床上加大了对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的研究，由于儿童的年龄较小，自身的免疫功能发育尚不成熟，作为一类特殊群体，关于儿童的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌相关研究文献并不多。在本次研究中，选取28例2021年8月份至2022年1月份于在医院中接受治疗的儿童，通过将肺炎克雷伯菌分离出来，菌株数量共126株，对儿童耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床分布情况及其耐药性进行观察。

1 资料与方法

1.1 一般资料

28例在医院中接受治疗的儿童，就诊时间为2021年8月份至2022年1月份，选取送检各类标本，对同一患儿相同部位先后分离的重复菌株，送检标本包括气管抽吸物、痰、尿、肺泡灌洗液、脑脊液、导管尖端、咽拭子、血、引流液等，将肺炎克雷伯菌分离出来，菌株数量共126株，在分离、培养及鉴定菌株的病原菌时，按照常规方法进行处理。

1.2 菌种鉴定

在鉴定CRKP菌株时使用Vitek 2 Compact全自动微生物检定仪及其相关配套的Vitck 2。由法国梅里埃公司提供头孢硝噻吩纸片，由Oxoiod公司提供MH琼脂培养基、血平板、巧克力平板。质控菌株检测，由国家卫生计生委临床检验中心提供检测，检测菌种为肺炎克雷伯菌ATCC700603，大肠埃希菌ATCC25922。

1.3 菌株培养及鉴定

按照《微生物检验操作规程》(第3版)中的要求来培养细菌，运用接种环在相应的平板培养基上进行接种，孵育需要在35-37℃的孵化箱中进行，将孵育的时间控制在24-28h。在常规分类培养之后，开展氧化酶及革兰染色试验，之后使用全自动细胞鉴定仪及其相关配套设备的鉴定卡，在对CRKP进行鉴定时需要按照相关的说明书进行。

1.4 药敏试验

以美国临床及实验室标准化协会(2014版)的相关标准作为判读依据，运用MIC法运用Vitek 2Compact型细胞鉴定仪及其相关配套的GNS药敏卡，对分离出来的CRKP开展药敏试验，之后开展Carba NP实验。

1.5 观察指标

(1)观察CRKP菌株的临床分布情况，样本包括尿液、痰液、脓液、血液、引流液、伤口分泌物、咽拭子、其他几种。(2)观察CRKP菌株的耐药率及敏感率。

1.4 统计学处理

SPSS22.0软件，计数资料用(%)表示，用X2检验，差异显著(P<0.05)。

2 结果

2.1 CRKP菌株的临床分布

126株CRKP菌株，样本分布主要集中在痰液、尿液中，占比分别为50.79%和16.67%。样本分布科室主要集中在新生儿科、ICU科中，占比分别为35.71%、20.63%。

表1 CRKP菌株的临床分布[n(%)]

2.2 CRKP菌株的耐药率及敏感率

126株CRKP菌株，CRKP对青霉素类、头孢类、喹诺酮类的耐药性>90%，三种抗生素的耐药性对比无差异(P>0.05)。对氨基糖苷类、四环素类、磺胺类的耐药性较低，三种抗生素的耐药性对比无差异(P>0.05)。青霉素类、头孢类、喹诺酮类的耐药性高于氨基糖苷类、四环素类、磺胺类抗生素的耐药性，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 CRKP菌株的耐药率及敏感率[n(%)]

3 讨论

肺炎克雷伯菌本身作为一种肠杆菌属，是导致社区及医院感染的主要致病菌。超广谱β-内酰胺酶的出现，促使β-内酰胺类药物的耐药菌株数量不断增加，从而促使革兰阴性菌感染疾病的治疗难度随之而提升[5]。在临床上碳青霉烯类抗生素的使用量呈现出逐年递增发展趋势，对碳青霉烯类抗生素耐药菌株的选择性生长起到了促进性作用。临床上有相关的数据研究显示，肺炎克雷伯菌对CPKP的耐药率为1%-20%。随着CPKP的出现，从而增加了肺炎克雷伯菌的治疗难度[6]。

在本次研究中将28例儿童作为研究对象，对其CRKP的临床分布情况及耐药性特点进行调查分析，分离出来的CRKP株数为126株。本文研究结果显示，126株CRKP菌株，样本分布主要集中在痰液、尿液中，占比分别为50.79%和16.67%。样本分布科室主要集中在新生儿科、ICU科中，占比分别为35.71%、20.63%。CRKP菌株的来源主要集中在新生儿科中，之所以在新生儿科中有较高的概率，是因为新生儿科中收治的患儿主要为低胎龄的早产儿，由于抗生素使用时间长、住院时间长，加之在疾病治疗中需要使用侵袭性医疗设备，从而促使CRKP感染的概率随之而提升。126株CRKP菌株，CRKP对青霉素类、头孢类、喹诺酮类的耐药性>90%，三种抗生素的耐药性对比无差异(P>0.05)。对氨基糖苷类、四环素类、磺胺类的耐药性较低，三种抗生素的耐药性对比无差异(P>0.05)。青霉素类、头孢类、喹诺酮类的耐药性高于氨基糖苷类、四环素类、磺胺类抗生素的耐药性，差异有统计学意义(P<0.05)。从研究结果中可知，CRKP对于青霉素类、头孢类、喹诺酮类的抗生素耐药性高达90%以上，之所以出现该种情况是因为CRKP能够产碳青霉烯酶有直接关系，能够将碳青霉烯类抗生素进行水解，同时对于青霉素、头孢类及其他β-内酰胺类的抗生素有水解作用。同时，CRKP中的β-内酰胺类抗生素作用靶点蛋白-青霉素结合蛋白位点出现了明显的改变，从而促使β-内酰胺类耐药性的产生[7]。CRKP对于喹诺酮通过对外膜渗透性进行降低及外排泵机制从而产生喹诺酮类耐药。由于四环素类、氨基糖苷类、磺胺类抗生素等，由于与β-内酰胺类抗生素的抗菌机制存在极大的不同，从而促使耐药性较低[8]。临床上应以药敏结果为依据，对抗菌药物进行合理选择，在条件允许的条件之下，经验型用药可选择四环素类、氨基糖苷类、磺胺类抗生素，以此来完成对感染的有效控制。痰液和血液是CRKP主要的标本来源，由于CRKP具有较为复杂的耐药机制，主要机制之一为碳青霉烯酶，能够对青霉素类、碳青霉烯类、单环β-内酰胺类及头孢菌素类进行水解，从而产生耐药性[9]。因此，在未来的研究中，需要将CRKP的耐药机制作为重点研究内容，只有充分的了解其耐药机制，才能够更好的为临床用药提供科学的指导[10]。同时，由于综合病区及重症监护病区中收治的患儿病情较为复杂，当儿科患者在遭受到感染之后，会有较大的抗生素选择压力，较容易筛选出较多的多重耐药菌株。在儿童中分离出来的株对青霉烯类、氨基糖苷类及喹诺酮类药物所产生的耐药率相仿，但是比成人的分离株低，儿童分离株对第一、二、三代头孢菌素耐药率明显壁成人分离株低，之所以会出现该种情况可能与儿童抗生素所使用的头孢类药物有关，在药物的诱导之下，会产生耐药菌。

综上所述，在儿童中CRKP有着较广的分布，尤其是在新生儿中感染率最高。由于CRKP有着严重的耐药情况，有很大一部分抗生素均展现出了较高的耐药性，临床上在进行抗菌药物选取时需要以药敏结果为依据有针对性的进行选择，以此来完成对感染的有效控制。