甘氨酸水热液化原位拉曼光谱观测及反应动力学分析

金王君，李 艳，赵 越，梅升华

1. 中国科学院深海科学与工程研究所，海南 三亚 572000 2. 中国科学院大学，北京 100049 3. 北京大学化学与分子工程学院，北京 100817

引 言

生物质能的萃取和利用已成为各国绿色能源的研发热点，藻类的水热液化研究位列其中。由于水热液化技术具有无需预处理、 对设备条件要求较低等优势，可实现更高的经济效益，是将微藻转化为液体燃料的主要途径[1-2]。生物质中蛋白质是生物油的主要来源之一，水解易产生小分子的氨基酸，进一步发生脱氨、 脱羧等反应[3]。

氨基酸降解主要途径包括脱氨(生成氨和有机酸)和脱羧(生成碳酸和胺)，主要降解产物有烃类、 胺类、 醛类和酸类[6]，具体反应随氨基酸的种类和反应环境不同而变化。Klingler等[7]研究了以甘氨酸在亚水和超临界水分解过程(1.0和2.0 Wt%，250～450 ℃，24～34 MPa，2.5～35 s)，构建了以氨基酸脱羧和脱氨为主要降解途径的反应网络。

蛋白质模型化合物甘氨酸作为重要中间反应物之一，其结构较为简单，通过研究甘氨酸水热液化过程可为分析复杂的生物质水热液化反应奠定基础[4-5]。然而关于甘氨酸在高温高压水中分解过程的基础研究工作尚不完善[8-10]，有必要深入地了解其水热反应过程的动力学特征。原位拉曼是表征有机反应机理的有效方法，本文拟利用拉曼光谱分析方法，观测反应过程中甘氨酸官能团的拉曼峰强变化，以确定甘氨酸热分解进行的程度。同时根据Avrami的反应动力学模型获取甘氨酸液化过程中的反应动力学参数。

1 实验部分

1.1 仪器试剂

实验使用的原位拉曼测试平台(图1)包括：Andor激光显微拉曼光谱仪(Andor RTS2)和FTIR600控温台(Linkam)。实验中使用的样品为分析纯(AR)甘氨酸粉末(国药试剂集团)，超纯水配制5 Wt%甘氨酸溶液，其中超纯水通过超纯水机(四川优普超纯科技有限公司)制备。

图1 拉曼光谱分析测试平台示意图Fig.1 Schematic diagram of Raman spectrum analysis system

1.2 方法

将配制的5 Wt%甘氨酸溶液注射置入一端焊封的熔融石英毛细管反应器(fused silica capillary reactor，FSCR)，溶液端浸于冰水中用氢氧焰将另一端焊封，显微镜下确认，最终制样效果如图2所示。将FSCR放入Linkam FTIR600控温台中置于配备Andor激光显微拉曼光谱仪的显微镜下，激光器波长为532 nm，激光功率约为305 mW，物镜倍率为20倍。初始温度为室温30 ℃，控制器设定为50和100 ℃·min-1的升温速率加热到实验温度(270～290 ℃)，压力值与反应温度下溶液的饱和蒸气压相对应，反应时间设置为10 min。从加热开始连续采集拉曼光谱，谱图采集曝光时间为5 s，原位研究升温过程以及恒温条件下模型化合物水热液化过程中的结构变化特征。实验完成后，将实验温度以100℃·min-1的降温速率降回室温，采集反应后产物的拉曼光谱。在数据分析过程中，使用Origin软件对采集的拉曼光谱图进行Savitzky-Golay平滑及归一化处理。

2 结果与讨论

2.1 温度对甘氨酸液化过程的影响

常温下，5 Wt%甘氨酸水溶液的拉曼光谱如图3所示。参考文献报道及模拟计算[11-13]，图3中(896±5) cm-1处为C—C伸缩振动峰，(1 031±5) cm-1处为C—N伸缩振动峰，(1 331±5) cm-1处为CH2摇摆振动峰，(1 413±5) cm-1处为COO-反对称伸缩峰，(2 976±5) cm-1处为CH2伸缩振动峰。

图3 常温下5 Wt%甘氨酸水溶液的拉曼光谱图Fig.3 Raman spectrum of 5 Wt% glycine aqueoussolution at room temperature

按照所述实验方法，以50 ℃·min-1分别升温至270，280和290 ℃等不同温度条件下开展实验。在每一设定的温度下，实验时间为10 min，期间通过拉曼光谱观测740～1 460 cm-1波数段内的特征峰变化，每隔2 min采一张谱，记录的拉曼谱图示于图4—图6。

水热液化过程中，甘氨酸特征拉曼峰的强度随热解反应时间的增加而降低。不同官能团的特征峰强度随时间变化的规律总结在图7中。如图7所示，在固定温度的水热反应过程中，各键的峰值强度随反应时间的延长不断减弱。对于同一种振动模式，水热反应的温度越高，峰值强度随时间衰减越快，其中C—C伸缩振动衰减最明显，290 ℃反应10 min后，C—C伸缩振动强度衰减迅速直到基本消失，表示溶液中此官能团基本全部分解。相比较而言，ν(C—N)和νas(COO-)峰强随时间的衰减速率较缓。在290 ℃温度下，由于荧光的影响ν(C—N)拉曼峰无法采集，但νas(COO-)拉曼峰强衰减明显加速，说明290 ℃是趋于将此官能团热解的临界温度。

在完成每段试验后，降温至室温再运用拉曼光谱分析反应腔内是否有未分解的甘氨酸产物。图8b—d中分别示出了经过270，280和290 ℃实验后检测产物的拉曼光谱，为了更好地比较，反应前室温下甘氨酸溶液拉曼光谱也包括其中(图8a)。从图8中可以看到，在经过270和280 ℃反应10 min后的产物中，依旧可以检测到甘氨酸的三组特征峰(图中虚线示出)，说明甘氨酸未得到充分热解。明显地，特征峰的强度随着温度的升高而降低(图8b，c)，到290 ℃时则完全消失(图8d)。说明温度升高会加速甘氨酸的液化过程，290 ℃条件下反应10 min后，甘氨酸已趋于完全热解。

图4 不同温度下甘氨酸特征拉曼峰ν(C—C)随时间变化 (a)：270 ℃；(b)：280 ℃；(c)：290 ℃Fig.4 The characteristic Raman peak of glycine, ν (C—C), changes with time at different temperatures (a)：270 ℃；(b)：280 ℃；(c)：290 ℃

图5 不同温度下甘氨酸特征拉曼峰ν(C—N)随时间变化 (a)：270 ℃；(b)：280 ℃；(c)：290 ℃Fig.5 The characteristic Raman peak of glycine, ν(C—N), changes with time at different temperatures (a)：270 ℃；(b)：280 ℃；(c)：290 ℃

图6 不同温度下甘氨酸特征拉曼峰νas(COO-)随时间变化 (a)：270 ℃；(b)：280 ℃；(c)：290 ℃Fig.6 The characteristic Raman peak of glycine, νas(COO-), changes with time at different temperatures (a)：270 ℃；(b)：280 ℃；(c)：290 ℃

2.2 反应动力学分析

为进一步认识甘氨酸液化反应的动力学过程，选取甘氨酸骨架碳链的特征振动模式，ν(C—C)，进行定量分析。大量的研究指出，拉曼散射的强度(I)在一定条件下与入射光强和待测样品浓度(c)成正比[14]。

I∝c

(1)

在水热液化反应过程中，待测样品的浓度是反应时间的函数。根据Avrami模型[15]可进一步描述为

It=I0e-ktn

(2)

k=Ae-Q/RT

(3)

其中，It为反应中某时刻的拉曼强度，I0为恒温状态下的初始拉曼强度，k为反应速率，n为反应级数，t表示反应时间(s)，Q是反应活化能(kJ·mol-1)，R表示摩尔气体常数[8.314 J·(mol·K)-1]，T为温度(K)，A为物质相关的指前系数。

假定反应为二级反应(n=2)，对式(2)和式(3)分别进行对数运算，得到

(4)

(5)

运用实验中测得的It/I0～t数据，通过式(4)进行线性回归拟合(图9)，得到k值。相关数据示于表1中。

通过式(5)，将获取的不同温度下的反应速率数据进行lnk～1/RT拟合(图10)，其曲线斜率便是反应过程的反应活化能，拟合计算的结果为357 kJ·mol-1，R2=0.92。

这里需要指出的是，在将样品封装在密封反应管的这类实验研究中，实验压力会随着温度的提升而升高。而压力对于官能团水热液化的影响会以活化体积乘积的形式包含在测定的活化能之中。由于实验中的压力值无法准确地度量，压力的影响效应难以定量地予以估计。

图9 不同温度下ν(C—C)的ln(I0/It)～t的拟合曲线，二次项系数即为此官能团的水热液化反应速率

表1 不同温度下ν(C—C)的拟合数据Table 1 Fitting reaction constants of ν(C—C) at different temperatures

图10 C—C振动拉曼峰的lnk-1/RT拟合曲线，曲线斜率即为此官能团的水热液化反应活化能

3 结 论

(1)运用原位拉曼光谱分析技术，获取了5 Wt% 甘氨酸溶液在270，280和290 ℃水热反应过程中的相关官能团变化的拉曼光谱，通过分析不同温度下ν(C—C)，ν(C—N)，νas(COO-)拉曼峰强度随时间的衰减，深入了解藻类生物质能水热液化中的转化速率。

(2)进一步地分析了甘氨酸水热液化反应的动力学过程，通过C—C伸缩振动拉曼峰值强度定量计算出270～290 ℃温度下反应速率常数k值，并通过k值随温度变化的规律，计算得到该官能团液化分解的活化能为357 kJ·mol-1。通过分析甘氨酸水热反应后产物的拉曼光谱，发现甘氨酸的完全水热液化温度约为290 ℃。

致谢：衷心感谢高悦、 赵霞在实验过程中的技术指导，陈姜智、 熊梦君关于文章提出的宝贵建议。