血清同型半胱氨酸水平与复发性流产发生的相关性分析＊

杨雪峰 李丽琴 龚翠梅

据国内相关研究指出，复发性流产主要为持续发生两次或以上自然流产，属于引发难治性不育核心因素其一[1-2]。出现流产相关因素包括母体内分泌异常、遗传性血栓倾向、母体生殖道异常、免疫功能异常、染色体异常及生殖道感染相关[3]。还有研究指出，临床上有将近60%不明原因复发性流产，增加了临床整体治疗难度。所以，对于不明原因引发复发性流产相关危险因素进行有效分析至关重要，可为后期治疗提供有效参考价值，从而预防或减少流产风险[4-5]。同型半胱氨酸具有促凝功效，若该指标处于异常上升趋势，则会引发血小板黏附聚集，形成血栓，诱发心脑血管疾病。正常人群中同型半胱氨酸能在体内分解代谢，浓度维持在较低水平。当孕妇处于正常妊娠阶段，该指标水平会随之下降，但一旦上升或者过高，则会引发毒性伤害胚胎，促使血管内皮细胞表面不同凝血因子遭受破坏，严重影响胚胎发育[6]。而高同型半胱氨酸血症患者病情发生时是因为维生素B12及叶酸缺乏所致，鉴于此，本研究分析复发性流产和同型半胱氨酸间的相关性，随后探讨引起复发性流产患者血清同型半胱氨酸水平上升主要诱因，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入2021年1月-2022年1月韶关市妇幼保健院60例非妊娠复发性流产患者（试验组），按照同型半胱氨酸水平划分为正常水平组（n=46）与高水平组（n=14）；选择同期60例正常参与产前检查妊娠妇女作为妊娠对照组，60例未妊娠健康体检妇女作为未孕对照组。纳入标准：（1）试验组所有妇女无内分泌异常情况；（2）试验组无生育史；（3）试验组夫妻经检测外周血染色体核型正常；（4）试验组有自然流产史（≥2次）；（5）妊娠对照组孕周＜12周；（6）未孕对照组有一次正常生育史。排除标准：（1）妊娠对照组有不良嗜好；（2）妊娠对照组伴有妊娠期糖尿病或高血压；（3）妊娠对照组伴有自然流产史，且原因不明；（4）未孕对照组存在自然流产史、新生儿畸形或死胎；（5）试验组合并高血压、糖尿病等疾病；（6）试验组合并肝肾等器质性疾病；（7）试验组近期服用相关药物补充治疗。试验组年龄24～47岁，平均（28.22±3.18）岁。妊娠对照组年龄22～46岁，平均（28.54±2.62）岁。未孕对照组年龄24～45岁，平均（28.32±3.01）岁。三组年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

以上所有人员均开展同型半胱氨酸检测，其中对试验组开展维生素B12及叶酸检测。

三组均实施静脉采血，保证所有对象均于清晨空腹抽取静脉血3～5 ml，随后将获取血样放置无抗凝剂采样管内，进行离心处理，时间为10 min左右，获取血清后将试验组血样分装成三管，对维生素B12、叶酸、同型半胱氨酸指标进行检测。利用循环酶法检测同型半胱氨酸水平，试剂盒试剂为湖南永和阳光生物科技股份有限公司提供，仪器使用BeckmanCoulter公司的AU680全自动生化分析仪；利用美国雅培AXSYM全自动免疫发光分析仪及配套试剂检测维生素B12、叶酸水平。为了保证检测结果的可靠性，以上所有操作均严格遵照试剂及仪器的操作说明执行。

1.3 观察指标

（1）分析试验组内高水平组与正常水平组患者维生素B12、叶酸水平差异，其中维生素B12正常范围 200～900 pg/ml；叶酸正常范围 10.4～42.4 nmol/L。（2）分析三组同型半胱氨酸水平差异，正常值范围为5～15 μmol/L。（3）分析试验组流产次数与同型半胱氨酸水平的相关性。

1.4 统计学处理

采用SPSS 21.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（±s）表示，多组间比较采用方差分析；计数资料以率（%）表示，比较采用χ2检验；采用Spearman秩相关分析试验组流产次数与同型半胱氨酸的相关性，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 高水平组与正常水平组维生素B12、叶酸水平比较

试验组中，高水平组与正常水平组分别14例（23.33%）、46例（76.67%）。高水平组维生素B12下降率高于正常水平组，差异有统计学意义（P＜0.05）；高水平组叶酸下降率高于正常水平组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 高水平组与正常水平组患者维生素B12、叶酸水平比较[例（%）]

2.2 三组同型半胱氨酸水平比较

试验组同型半胱氨酸水平为（10.15±1.06）μmol/L，高于妊娠对照组的（6.57±0.37）μmol/L、未孕对照组的（8.04±0.26）μmol/L，差异均有统计学意义（P＜0.05）；妊娠对照组同型半胱氨酸水平与未孕对照组对比，差异有统计学意义（P＜0.05）；三组同型半胱氨酸水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 试验组流产次数与同型半胱氨酸指标水平比较

流产2次、3～4次及4次以上例数分别为27例（45.00%）、22例（36.67%）与11例（18.33%）。流产2次同型半胱氨酸水平为（9.83±1.14）μmol/L，与流产3～4次的（10.08±0.74）μmol/L比较，差异无统计学意义（t=0.883，P=0.382）；流产4次以上同型半胱氨酸水平为（11.13±0.78）μmol/L，与流产2次及流产3～4次比较，差异均有统计学意义（t=3.452、3.779，P=0.001、0.001）；不同流产次数患者同型半胱氨酸水平比较，差异有统计学意义（F=7.449，P=0.001）。采用Spearman秩相关分析显示，试验组流产次数与同型半胱氨酸呈正相关（rs=0.419，P＜0.05）。

3 讨论

复发性流产的发病原因非常复杂，可能是单一因素导致流产，也可能是混杂的多因素导致流产。复发性流产属于生殖医学极为常见病理性妊娠，当妊娠处于28周以前，胎儿体质量不足1 000 g的胎儿丢失被临床称为复发性流产。当前于总妊娠比例中，复发性流产（≥2次流产）所占比例为5%左右，而≥3次流产占比为1%[7]。由此可见，持续两次妊娠损失占比较高，必须增加重视力度，可能会引发第三次流产风险。还有一部分属于不明原因复发性流产，此类患者在治疗方面难度较大，且未存在针对性治疗方案，存在复发性流产患者自身身心健康受到严重干扰，并且家庭和谐方面也会受到影响。所以，通过分析复发性流产具体发病机制，探寻有效治疗方案至关重要[8-9]。

同型半胱氨酸作为含巯基甲硫氨酸中间代谢产物其一，同时属于蛋白质生物合成分解中无法正常利用的氨基酸前体。其代谢辅助因子主要包括叶酸、维生素B等，一旦女性处于妊娠阶段以后，叶酸水平会呈现下降趋势，从而导致同型半胱氨酸指标代谢异常。并持续沉积于自身血液中，引发该指标急剧上升，严重危害母体。在临床中，该指标又被命名为高半胱氨酸，属于氨基酸中半胱氨酸异种，经由S-腺苷基蛋氨酸两个反应步骤产生，并能逆转为蛋氨酸，抑或是通过其他途径（如转硫途径）转变为牛磺酸或半胱氨酸。据调查发现，人体中甲基四氢叶酸内蛋氨酸合成酶与大部分同型半胱氨酸相互作用后，形成四氢叶酸及蛋氨酸，而前者经过亚甲基四氢叶酸还原酶影响后产生甲基四氢叶酸，剩余大约一半同型半胱氨酸和与丝氨酸在胱硫醚β合成酶作用下经过转硫途径产生胱硫醚，经裂解后转变为半胱氨酸，最后产生水、丙酮酸及硫酸等，此过程需要维生素B6为辅酶和丝氨酸经甲基转移酶。人体血管内皮细胞功能会受到同型半胱氨酸直接或间接损害，对低密度脂蛋白氧化造成影响，促使血小板功能强化，引发血栓。在健康人群中，同型半胱氨酸浓度在5～15 μmol/L，以二硫化物的形式与血红蛋白结合，构成产生同型半胱氨酸二聚体。而按照同型半胱氨酸具体浓度可将其划分为轻度同型半胱氨酸血症、中度同型半胱氨酸血症及重度同型半胱氨酸血症，其浓度依次为16～30、31～100、＞100 μmol/L，但日常中主要以前两种最为常见。同型半胱氨酸属于心血管疾病独立危险因素，和阿尔茨海默病、中风等一系列精神系统疾病存在一定关系。大量研究报道指出，高同型半胱氨酸血症与静脉血栓、先兆子痫、复发性早期自然流产及动脉硬化等存在相关性，与此同时，随着社会经济水平的不断发展，人们生活节奏也随着发生变化，伴随工作压力持续增加，作息时间不规律，饮食不规律，自然环境恶劣及其他因素影响，促使每年新增不明原因复发流产人数持续上涨。鉴于此，必须明确流产和同型半胱氨酸水平之间相关性，确保后期临床对复发性流产孕妇制定有效治疗计划，预防再次流产风险发生。

本研究结果显示，试验组同型半胱氨酸水平高于妊娠对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；试验组同型半胱氨酸水平高于未孕对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；妊娠对照组同型半胱氨酸水平低于未孕对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；三组同型半胱氨酸水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；试验组血清同型半胱氨酸水平与流产次数呈正相关（rs=0.419，P＜0.05）。由此可见，血清同型半胱氨酸水平升高与复发性流产的发生有密切关系。妊娠期间血清同型半胱氨酸水平过高会损伤绒毛膜，阻碍胎盘发育，同时增强了子宫收缩力，很容易导致自然流产。与此同时，处于妊娠阶段孕妇因胎儿尚处于发育阶段，自身将消耗氨基酸，而同型半胱氨酸大量使用会导致甲基化增加，促使同型半胱氨酸水平随之下降[10]。有研究表明，血清同型半胱氨酸水平的升高与其代谢过程中相关酶、叶酸和维生素B12等的缺失有关[8]。叶酸和维生素B12均为同型半胱氨酸代谢途径过程中必不可少的两种辅助因子，其中叶酸为必需的辅助因子，一旦缺乏会导致同型半胱氨酸的排出与代谢发生异常，致使发生高同型半胱氨酸血症[11]。

本研究结果显示，试验组中，高水平组与正常水平组人数分别为14例（23.33%）、46例（76.67%）。高水平组维生素B12下降率高于正常水平组，差异有统计学意义（P＜0.05）；高水平组叶酸下降率高于正常水平组，差异有统计学意义（P＜0.05）。由此说明，叶酸与维生素B缺失和同型半胱氨酸指标上升存在一定联系，若必备因子叶酸缺失，则会导致同型半胱氨酸异常代谢及排出，从而增加其浓度，诱发高同型半胱氨酸血症。

总之，复发性流产与同型半胱氨酸水平上升关系密切，而叶酸丢失为高同型半胱氨酸血症核心诱因，必须早期做好有效防治工作，预防复发性流产风险。