猪口蹄疫O型免疫后不同时间抗体检测与分析

曾丽金 莆田市城厢区动物疫病预防控制中心 福建 莆田 351100

口蹄疫是由口蹄疫病毒引发的一种高传染性人畜共患一类传染病，主要发生在猪、牛、羊等偶蹄动物，仔猪的发病率和病死率较高，病毒通过接触带毒及被病毒污染的动物产品传染给人，严重影响畜牧业生产和人类健康。做好口蹄疫防控工作、提高畜牧业生产效益，除了要加强饲养管理、制定一系列管理制度、定期清理消毒猪舍等生物安全措施，还要根据猪场的实际养殖情况制定适合本猪场的免疫程序，通过免疫接种提高猪群口蹄疫抗体水平，才能从根本上提高猪群的抗病能力，有效防控口蹄疫的发生。近年来，规模化猪场使用政府统一供应的猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗，按规划进行春秋两季强制免疫。免费的疫苗极大造福了养殖业，但有部分养殖者心存疑虑，想知道疫苗的质量如何？免疫多久后抗体能保护猪群健康？基此，笔者对猪口蹄疫O型免疫后不同时间的抗体水平进行检测试验。

1 材料与方法

1.1 试验动物与分组 选取4个规模化猪场（用A、B、C、D表示）精神状态良好60日龄左右的仔猪各30头，分两组进行试验(均另设栏饲养)，首免日龄均为60日龄左右。试验分组及免疫方案见表1。

表1 试验分组及免疫方案

1.2 血样采集 第1组分别在第一次免疫（首免）后第28 d、35 d、42 d进行采血。第2组分别在加强免疫后第14 d、28 d、42 d、90 d、120 d进行采血。

1.3 抗体检测 使用北京某生物有限公司生产的口蹄疫（FMD）O型抗体ELISA检测试剂盒对所采血清进行口蹄疫O型抗体检测。

1.4 标样测定与结果判定 在450 nm波长读取OD值，阳性对照分别是0.1607、0.1842，阴性对照分别是0.8108、0.8314，计算得阴性对照OD平均值＞0.7，阳性对照S/N平均值＜0.3，本试验成立。

计算方法：NC OD均值=（NC1＋NC2）/2=0.8211；样品S/N=样品OD值/NC OD均值。

判定标准：S/N≤0.5为阳性，S/N＞0.5为阴性。计算得免疫保护临界值S/0.8211=0.4105，即样品S/N≤0.5，判为阳性。

2 结 果

第1组仔猪首免后不同时间抗体检测结果显示（见表2），猪口蹄疫O型首免后28 d，抗体合格率为73.33%，随着时间推移，抗体合格率急剧下降，首免后第42 d，抗体合格率低至3.33%。

表2 第1组仔猪首免后不同时间抗体情况

第2组仔猪首免28 d后进行加强免疫，加强免疫后不同时间抗体检测结果显示（见表3），猪口蹄疫O型二免后第14 d、28 d、42 d抗体高且合格率均为100%，二免后第90 d、120 d抗体合格率还在70%以上，可以有效保护猪群健康。

表3 第2组仔猪二免后不同时间抗体情况

3 分析与讨论

1）第1组仔猪仅用口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗免疫一次，样品OD平均值接近免疫保护临界值，抗体保护的时间短暂，首免28 d后抗体水平衰减快，在42 d基本消失，猪群没有抵抗疫病能力，万一被口蹄疫病毒侵袭，后果不堪设想。必须对已完成3次抽血检测的试验仔猪马上进行第二次免疫，免疫剂量均为2 mL/头，二免后30 d左右进行三免，根据猪只健康情况和体重确定免疫剂量。

2）第2组仔猪二免后3个月内样品OD平均值明显小于免疫保护临界值，产生抗体强且持续时间长，可见加强免疫在免疫接种中是一个不可缺少的程序。

3）动物免疫抗体水平受多种因素的影响。首免后28 d口蹄疫O型抗体平均水平不甚理想，分析其原因：（1）本次试验太仓促，免疫前未采血检测仔猪的母源抗体，首免时间安排不妥而影响免疫效果。有条件时要进行母源抗体检测，以便科学安排首免时间。（2）同一时段接种了其他疫苗，造成相互干扰而使免疫抗体减弱。（3）口蹄疫灭活疫苗经由上级部门调拨、运输、发放，如果在达不到2～8℃储运条件下的时间过长，会影响疫苗质量，免疫抗体水平不能达到预期效果。

4 结 语

1）政府部门供应的口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗二免后120 d抗体合格率还能达到76.67%，表明通过二免能有效预防猪O型口蹄疫，能够对猪群提供良好的保护，免疫效果良好，政府部门供应的疫苗可以放心使用。

2）二免后第120 d，样品OD平均值（0.3926）接近免疫保护临界值（0.4105），有条件的场、受威胁的场、前期发生过免疫抑制性疾病的场或饲养大猪（体重150 kg以上）的场，建议二免3个月后使用政府疫苗进行三免，可以更有效保护猪群免受口蹄疫侵袭。

3）血清学检测是当前规模化猪场检验免疫效果的手段。定期对猪场进行抽血采样检测，了解猪群免疫水平，可以避免动物疫病防控的盲目性，为科学防控提供参考依据。