一起猪多种病毒混合感染的案例分析

袁庭娟，王 君，陈利峰，郭 垚，袁庭攀

（1.西安申亚动物保健品有限公司，陕西 西安 710000；2.陕西鑫诚大唐畜牧有限公司，陕西 西安 710000）

1 发病情况

宁夏某家庭农场存栏母猪200头，全场总存栏数2 300余头，保育存栏800余头，肥育存栏1 200余头。猪场远离市区。2021年3月6日猪场肥育猪开始发病，并出现死亡病例。保育猪长期存在个别发病猪。场主担心传染性疾病，迅速采集20份口鼻肛棉拭子送至某检测机构进行“非洲猪瘟”排查[1]，检测结果为阴性。

2 临床症状

肥育猪体重60～100 kg，发病猪只体温38.5～40.5 ℃之间、个别病例体表皮肤出现不规则瘀血斑、采食量下降[2]，精神状态欠佳。截至3月15日，共计死亡猪只20头。猪只死亡前体表发红、气喘。

与此同时哺乳仔猪和保育阶段猪只个别腹式呼吸，伴有咳嗽、腹泻症状，露脊梁骨，眼结膜潮红、有泪斑，腹股沟淋巴结肿大、青紫，乳头发青。

3 剖检症状

场主对濒死猪只（死亡6 h以内）进行剖检，肥育猪1头，保育猪2头。

肥育猪剖检发现：全身淋巴结不同程度的肿大、充血，肾脏边缘有出血点，脾脏边缘针尖状凸起呈锯齿状，回肠、盲肠交汇处出现不同程度的黏膜脱落及麦粒大溃疡。

保育猪剖检发现：腹股沟淋巴结肿大、青紫、土黄色样变、切面多汁，胸腔有积液、积液略有浑浊，心脏包裹有纤维素性渗出，肺脏大面积淤血，脾脏肿大、边缘有梗死现象，肾脏土样色变，肠内黏膜部分脱落。

4 实验室检测

4.1 检测标本

采集病料组织样品3份，送实验室检测中心检测。

4.2 试验试剂

柱式DNA核酸提取试剂盒，哈尔滨元亨生物，生产批号YDNA-TQ 20200805P。柱式RNA核酸提取试剂盒，哈尔滨元亨生物，生产批号YRNATQ 20201105P。蛋白酶K，哈尔滨元亨生物，生产批号TH030101。猪瘟病毒（CSFV）通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒，哈尔滨元亨生物，试剂批号CSFV20200921P。猪伪狂犬病病毒（PRV）实时荧光PCR检测试剂盒，哈尔滨元亨生物，试剂批号PRV20201118P。猪圆环病毒2型（PCV2）实时荧光PCR检测试剂盒，哈尔滨元亨生物，生产批号PCV2 20201118P。猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒，哈尔滨元亨生物，生产批号PRRSV20200820P。

4.3 试验器材

RT-6100酶标分析仪，572105033X，深圳雷杜生命科学股份有限公司。Real-Time PCR System全自动PCR分析系统 Gentier 32R，西安天隆科技有限公司。HH-2数显恒温水浴锅，上海力辰邦西仪器科技有限公司。TB16-W 离心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司。BBS-DDC医用洁净工作台，济南鑫贝西生物技术有限公司。

4.4 检测方法

4.4.1 抗原检测

（1）样品处理：组织样品需要充分研磨处理，棉拭子需充分浸泡处理，全血需冷藏自然析出。所有的样品均需要高速离心，取上清液备用。

（2）用DNA、RNA提取试剂盒对应提取DNA模板、RNA模板，备用。

（3）按照各项目配置体系，设置运行步骤，运行监测，数据采集及结果分析。

（4）病毒学检测统计结果见表1、表2、图1、表3、图2、表4、图3、表5、图4、表6、图5。

表1 样本圆环病毒2型、蓝耳病（通用型）病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒检测结果统计

表2 猪圆环病毒2型检测结果

表3 猪蓝耳病（通用型）病毒检测结果

表4 猪瘟病毒检测结果

表5 猪瘟病毒复检结果

表6 猪伪狂犬病病毒检测结果

5 结果与分析

5.1 PCV2结果分析

3份组织样品，经过核酸提取，检测结果均为阳性，且病毒载量较高。

5.2 PRRSV结果分析

3份组织样品，经过核酸提取，检测结果1份为阳性，2份阴性。

5.3 PRV结果分析

3份组织样品，经过核酸提取，检测结果3份均为阳性。

5.4 CSFV结果分析

3份组织样品，经过核酸提取，检测结果为3号样品CT值在可疑区间并出现扩增曲线，经过复检，CT值仍在可疑区间并出现扩增曲线，判定3号样品为阳性。

6 治疗方案

6.1 生物安全

6.1.1 消毒与隔离

（1）消毒。

全场进行消毒，建立全方面的消毒体系。浓度调整为1∶200，申亚-福溶安（主要成分：过硫酸氢钾复合物）、浓戊二醛交替使用，连续使用7～10 d，后隔天消毒1次。工作人员、圈舍使用工具、产床、保育床、限位栏、大栏及净污道全面消毒。工作服、鞋子用1∶500浓度的消毒液浸泡。带猪消毒时消毒药远离猪只口腔、眼睛，消毒时间选择日温度较高时进行，喷洒后密闭15～20 min，后开窗开门通风。

（2）隔离。

对于发病猪进行隔离饲喂治疗，病症严重直接淘汰。

6.1.2 免疫 经过圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、蓝耳病病毒的核酸检测，判定该厂为多病毒混合感染病症。具体免疫程序如下。

（1）保育猪、肥育猪。

全群依次普免圆环病毒2型疫苗、伪狂犬病疫苗、猪瘟疫苗[3]。

（2）产房仔猪。

1日龄，喷鼻猪伪狂犬病活疫苗1头份。7日龄肌注蓝耳病活疫苗1头份[4]，14日龄肌注圆环病毒2型灭活苗1 mL/头，21日龄肌注猪瘟活疫苗2头份，28日龄追加圆环病毒2型灭活苗2 mL/头。其它按原有免疫程序执行。

（3）母猪、公猪。

母猪、公猪加强免疫，依次免疫圆环病毒2型灭活苗2 mL/头，猪伪狂犬病活疫苗2头份，猪瘟高效疫苗2头份。其它按原有免疫程序执行。

母猪产前30 d、产前15 d各后海穴注射传染性胃肠炎和流行性腹泻二联苗4 mL/头。产后14 d肌注猪蓝耳病活疫苗1头份。

6.2 药物防治

6.2.1 断奶保育猪治疗及增强免疫力

（1）治疗阶段。

疫力多糖粉（主要成分：黄芪多糖）1 000 g，双黄连可溶性粉1 000 g，包被替米考星预混剂1 500 g，阿莫西林可溶性粉1 000 g。拌料1 t，连用7～10 d，视猪只健康度酌情使用，个别猪只使用10～15 d。

（2）增加免疫力。

疫力多糖粉500 g，仔猪健（主要成分：维生素、矿物质、地衣芽孢杆菌、氨基酸）2 500 g、活力康（主要成分：维生素C）2 500 g、补气生血素500 g、混合型饲料添加剂（百里香酚+香芹酚+肉桂醛）Ⅰ型260 g，拌料1 t，连用20 d。

6.2.2 公猪、母猪治疗及增强免疫力

（1）治疗阶段。

囊非安（主要成分：黄芪、金银花、党参、当归）2 000 g，双联抗可溶性粉（主要成分：金银花、黄芩、连翘）1 000 g，蓝力净（主要成分：酒石酸泰万菌素）200 g，多西环素1 500 g。拌料1 t，连用7 d。哺乳母猪使用量按采食量减半。

（2）保健阶段。

疫力多糖粉500 g、母猪健（主要成分：维生素、矿物质、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、氨基酸）2 500 g、活力康2 500 g、补气生血素500 g，拌料1 t，连用20 d。以妊娠母猪用量计，哺乳母猪使用量按采食量减半。

7 分析与讨论

综上所述，结合猪场免疫程序、临床表现、猪只剖检情况以及实验室样本抗原检测结果综合分析，该猪场存在猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、蓝耳病病毒、猪瘟病毒混合感染。方案出具后，严格执行，经过3个月的跟踪观察，效果显著。

（1）引起本次发病的诱因主要是该场的生物安全未做到位。场主自述，分批次引进种猪后未能严格按照免疫程序执行，免疫存在漏免及免疫剂量不到位等情况。养殖场工作人员消毒、免疫意识差，圈舍卫生条件不达标。提出建议如下：圈舍清扫干净，厂区全面消毒。全群按照第6部分生物安全版块要求全面执行。

（2）加强母猪群、公猪群管理，蓝耳病按季度净化。严格按照免疫程序免疫，做到一猪一针头，疫苗按照说明存放、稀释、注射。使用完的废弃物集中高温消毒处理。合理安排种猪群的营养水平，调理亚健康猪群，增强抵抗力。科学补充微量元素及矿物质。

（3）加强断奶仔猪管理。及早教槽，减少断奶仔猪的断奶应激，换料按照7～10 d逐步更换。控制好圈舍温度及猪群密度。

养殖场的传染性疾病关键是生物防控，出现传染病主要是生物安全缺失或执行不到位导致。为了猪只全年处于健康、稳定的生产情况下，必须严格做好生物安全管理、猪群的保健、饲养管理、饲料营养的搭配、疾病的诊疗。时刻将“预防为主，治疗为辅”的理念贯彻落实到生产的每一步。