Treg调控ILC2参与炎症性疾病的研究进展①

龚展德 陈昱丞 戴钟玲 刘欣 袁碧晨 罗英 雷爱华

（南华大学衡阳医学院病原生物学研究所，衡阳 421001）

二型固有淋巴细胞（group 2 innate lymphoid cell，ILC2）由骨髓中的共同淋巴祖细胞（common lymphoid progenitor cell，CLP）发育分化而来，是近年来发现的一类表面缺乏特异性抗原识别受体的固有淋巴细胞。ILC2表面不表达其他免疫细胞谱系的标志分子，但高表达CD45、CD25、CD127及ST2等表面分子［1］。与Th2类似，ILC2的分化受核心转录因子GATA3调控，且通过分泌二型细胞因子发挥抗寄生虫感染的作用［2-3］。ILC2主要存在于骨髓、肺、肠道及皮肤等器官和组织。在过敏原或感染等因素作用下，上皮细胞受损而产生IL-25、IL-33、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin，TSLP）等细胞因子。这些细胞因子与ILC2表面相应细胞因子受体结合后，可导致ILC2活化而产生大量IL-5和IL-13，进而参与包括哮喘在内的多种炎症性疾病的发生［1，4-6］。

除细胞因子外，ILC2的产生和活化还受多种物质调控。其中，补体组分C3a、肿瘤坏死因子配体相关分子1A（TNF ligand-related molecule 1A，TL1A）、神经肽（neuromedin U，NMU）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）、前列腺素D2（prostaglandin D2，PGD2）及嗜酸细胞活化趋化因子等能够促进ILC2的增殖活化；而前列腺素E2（PGE2）、前列腺素I2（PGI2）、IFN-γ、雄激素、儿茶酚胺、丁酸盐等则能够抑制ILC2活化［7］。有趣的是，ILC2通过其表面分子可与其他免疫细胞相互作用，在炎症性疾病的进程中扮演重要角色［8］。例如，ILC2通过其表面表达的MHCⅡ分子可将抗原递呈给T细胞，进而促进T细胞活化［9-10］。ILC2细胞表面的NKP30受体能够通过B7-H6配体直接与皮炎患者皮肤内角化细胞结合活化ILC2细胞［11］。细胞间黏附分子ICAM-1在ILC2的发育与功能中至关重要［12］。值得注意的是，近年来，调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）对ILC2的调控作用及其在炎症性疾病中的作用备受关注。

Treg是一类成熟的CD4+T细胞亚群，根据发育的位置不同分为自然Treg（natural Treg，nTreg）和诱导性Treg（inducible Treg，iTreg）。在发育过程中，nTreg需要强烈的CD28共刺激，而iTreg则可在较弱的CD28和CTLA4共刺激下成熟［13］。Treg主要通过细胞接触依赖机制或分泌IL-10和TGF-β发挥免疫抑制作用，因而在炎症性疾病过程中发挥重要作用。例如，在慢性鼻窦炎黏膜中，Treg可显著降低炎症细胞因子和嗜酸性趋化因子水平，并减弱嗜酸性粒细胞（eosinophil，Eos）的募集，进而缓解炎症进展［14］。Treg与Th17间的平衡在炎症性疾病的发生发展中非常重要［15-17］。研究发现在ILC2诱导或参与的炎症性疾病中，Treg可通过调控ILC2反应在疾病的进程中发挥重要作用。下面重点介绍Treg调控ILC2在哮喘、特异性皮炎（atopic dermatitis，AD）及动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）中的作用及相关免疫学机制。

1 Treg调控ILC2在哮喘中的作用

哮喘是一种慢性气道免疫性疾病，涉及多种细胞及细胞因子，以气道高反应性和可逆性气流阻塞、嗜酸性炎症及气道黏膜炎症为特征。目前认为ILC2和Th2通过分泌二型细胞因子（如IL-4、IL-5和IL-13）在哮喘的发生中扮演重要角色。IL-4诱导B细胞产生IgE抗体，IL-5招募并激活Eos，而IL-13可促进黏液产生。ILC2为固有免疫细胞，通常在过敏性疾病的早期发挥作用［18］。有研究发现，活化的ILC2可促进Th2产生［19-21］，因而其在哮喘中的作用备受关注。而Treg通过抑制树突状细胞（dendritic cell，DC）和T细胞等细胞功能发挥缓解哮喘的作用［22］。

近年研究发现Treg通过抑制ILC2的活化在缓解过敏性肺炎中发挥重要作用［23-24］。研究发现，在过敏性肺炎小鼠的恢复期，小鼠肺脏中maresin 1含量升高，而外源性给予maresin 1可显著促进小鼠肺脏Treg的扩增；Treg通过分泌TGF-β抑制ILC2的活化，从而缓解肺炎症状［25］。MAAZI等［26］发现人和小鼠的ILC2均表达重要表面分子诱导性共刺激分子（inducible costimulatory molecule，ICOS）和其配体ICOSL；ICOS结合ICOSL介导 了ILC2间 的 相互 作用，并诱导ILC2中STAT5和Bcl-2信号的激活，从而促进ILC2的存活和活化，最终参与过敏性哮喘的发生。有趣的是，iTreg表面表达ICOS分子，亦可与ILC2表面的ICOSL结合［24］。ICOS-ICOSL信号促进了Foxp3+Treg的扩增及其分泌IL-10和TGF-β的能力，而IL-10和TGF-β可显著抑制ILC2分泌IL-5和IL-13的能力，进而缓解ILC2诱导过敏性肺炎的症状［24］。因此，iTreg对ILC2的活化具有较强的抑制作用，在治疗ILC2诱发的哮喘中具有潜在的临床应用价值。

2 Treg调控ILC2在AD中的作用

近年研究发现ILC2与AD的发生密切相关。在AD患者体内，ILC2细胞数量明显增多，并可通过产生IL-5导致Eos聚集，进而引发炎症［27-28］。同时，皮肤中的肥大细胞及嗜碱性粒细胞可分泌IL-4及PGD2作用于ILC2表面相应受体进而促进ILC2活化，促进炎症的发生［28-29］。更为重要的是，皮炎中的ILC2亦受Treg的调控。研究发现，皮肤驻留RORα+Treg可抑制ILC2活化，进而缓解过敏性皮炎［30］。RORα+Treg和ILC2表面均表达死亡受体3（death receptor 3，DR3）分子；其可与内皮细胞或髓系细胞来源的TL1A结合，进而增强Treg功能，与ILC2表 面DR3结 合 亦 可 激 活ILC2。因 此，RORα+Treg和ILC2对TL1A存在竞争关系。靶向敲除皮肤驻留Treg中RORα的小鼠在经MC903诱导发生AD后，ILC2来源的IL-5含量明显增加，Eos数量上升，二型免疫反应增强，AD症状加重。这是由RORα缺失的Treg表面DR3表达水平下降，无法与ILC2竞争TL1A所致［30］。此外，与人外周血中的Treg相比，人皮肤Treg表达更高水平的RORα［30］，提示RORα+Treg在抑制由TL1A/ILC2诱导的AD中可能发挥重要作用。

3 Treg调控ILC2在AS中的作用

AS是一种由脂质驱动的慢性血管炎症，其发生始于低密度脂蛋白在血管壁的过度积累；随后脂质在血管上氧化堆积，致使内皮受损，进而导致血管免疫调节失衡。AS的发生涉及多种炎症细胞及炎症介质的相互作用。作为具有负向免疫调节作用的细胞，Treg在AS中的作用主要体现在以下两方面：一方面，Treg能下调血清中的胆固醇等相关脂质含量水平；另一方面，Treg能以细胞接触的方式或通过分泌抑制性细胞因子IL-10和TGF-β以减少相关炎症细胞的浸润与炎症因子表达［31-33］。同时，研究发现ILC2在AS的发病过程中也发挥保护作用。活化的ILC2可通过分泌IL-5促进B1细胞产生天然抗磷脂酰胆碱的IgM；其在AS的早期预防中发挥重要作用。此外，过继转移ILC2可提高M2巨噬细胞水平，降低AS斑块中的脂质含量，减少斑块形成。

最新一项研究表明，Treg可通过促进ILC2的活化共同对抗AS［34］。该研究的体内外实验发现，CD4+Foxp3+Treg可通过分泌TGF-β和IL-10与细胞接触的方式促进ILC2增殖及其分泌IL-13的能力。过继转移Treg增加主动脉旁淋巴结和脾脏中ILC2比例和数量，减少了主动脉斑块产生及斑块中巨噬细胞浸润，延缓了AS进展［34］。ILC2经Treg活化产生高水平的IL-13是否通过促巨噬细胞向M2极化进而达到抗炎作用还需进一步探究。但与哮喘中Treg对ILC2的抑制作用不同，AS中Treg促进了ILC2的活化。此项研究提示，不同疾病不同组织中ILC2的生物学特性及功能不尽相同，而AS与哮喘小鼠肺脏中Treg-ILC2轴的调控分子机制差异尚待阐明。

4 结语

综上所述，ILC2在炎症性疾病的发生发展中发挥重要作用。Treg作为具有免疫抑制功能的CD4+T细胞，通过与ILC2的直接接触或释放TGF-β和IL-10在抑制ILC2功能及缓解ILC2诱导哮喘和特异性皮炎的过程中发挥重要作用；而在AS中，Treg可促进ILC2的活化，减缓AS病程（图1）。此外，研究发现在一些自身免疫病中，ILC2亦可通过调控Treg缓解疾病进程。例如，在慢性关节炎中，ILC2通过分泌IL-9导致Treg活化，从而促进炎症的消退［35］。因此，ILC2与Treg间的相互作用较为复杂。在不同炎症性疾病中，Treg与ILC2间的调控作用不尽相同。进一步深入研究Treg与ILC2间的调控机制不仅有利于炎症性疾病发病机制的阐明，还可为炎症性疾病的治疗提供新策略，具有重要的理论和临床意义。

图1 Treg在不同炎症性疾病中对ILC2的调控作用Fig.1 Modulation of ILC2 by Treg in different inflammatory diseases