磁共振影像学参数与乳腺癌患者肿瘤微血管密度及生物因子相关性以及对治疗效果评估

魏 刚， 许保刚， 贺 朝， 黄瑞瑜， 刘 辉， 郭长义， 李 斌， 张 瑜， 张 婉

陕西中医药大学第二附属医院 影像中心，陕西 咸阳 712000

乳腺癌是近年来临床上女性群体中容易被发现且发病率较高的肿瘤之一[1-4]。及时有效并准确地评估患者的病情，采取相应措施干预，可显著降低乳腺癌患者的病死率[5]。有研究报道，采用磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)实施乳腺检测已成为当前临床上最主要的乳腺癌高危群体筛选的手段之一，具有较高的临床应用价值，也是指导临床治疗和预后辅助评估的重要方案[6]。MRI影像学检查可通过清晰的图像对乳腺病变形态学特点进行描述和分析，可有效实现通过增强后信号增高幅度反映病变组织内血管密度[7]。微血管密度(microvascular decompression，MVD)是定量的对肿瘤的新生血管能力方面的指标给予分析，可用于评估肿瘤相关的血管生成情况[8]。乳腺癌肿瘤MVD及多种生物学因子均与MRI表现密切相关，但MRI影像学参数与乳腺癌患者肿瘤MVD及生物因子的相关性及治疗疗效的评估仍有待深入挖掘分析。本研究以乳腺癌患者为研究对象，分析MRI影像学参数与乳腺癌患者肿瘤MVD及生物因子的相关性并评估治疗效果。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取自2019年1月至2021年6月陕西中医药大学第二附属医院收治的104例乳腺癌患者为观察组，均为女性；年龄29～78岁，平均年龄(49.82±12.91)岁；平均体质量指数(23.28±2.91)kg/m2；其中，导管原位癌10例，浸润性导管癌84例，浸润性小叶癌8例，导管原位癌伴浸润2例。纳入标准：(1)经病理学确诊为乳腺癌[9]；(2)临床均接受MRI扫描检查；(3)入组前未行手术、靶向治疗或放化疗；(4)均接受《中国临床肿瘤学会乳腺癌诊疗指南》[10]推荐的方案治疗；(5)随访时间均>12个月，每3个月到院随访1次。排除标准：(1)MRI扫描检查结果质量不佳；(2)临床资料缺失；(3)治疗后失访。另选取同期于我院经病理学诊断确诊为乳腺良性病变的80例患者为常规组，均为女性；年龄28～71岁，平均年龄(50.21±12.11)岁；平均体质量指数(23.37±2.87)kg/m2；其中，乳腺囊性增生38例，浆细胞性乳腺炎12例，乳腺分叶状肿瘤13例，乳腺导管内的乳头状瘤10例，乳腺纤维腺瘤7例。两组研究对象的一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会审议并批准。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 MRI检查 所有研究对象均采用Avanto 1.5T(德国西门子)MRI扫描机进行扫描检查。患者取俯卧位，采用乳腺专用的线圈实施扫描，FSE T2WI、T1WI加脂肪抑制序列实施横断位的扫描；采用自旋平面的回波成像序列实施横断位扫描，横断位的FLASH T1WI序列扫描层厚1.0 mm；注射对比剂前则实施蒙片扫描，后经肘正中静脉以团注方式采用高压注射器注入对比剂，然后行8期动态扫描，单期的扫描时长为55 s，层数为128层；采用的对比剂为钆喷酸葡胺注射液，注射速率2.0～2.5 ml/s，剂量0.2 mmol/kg，用量15～20 ml。然后，将所有图像传输至配套工作站，并由7年以上医师完成图像处理及参数测量。

在乳腺MRI增强的第1期注入1 min内挑选适当的感兴趣区(region of interest，ROI)，将病灶内出血、囊变、坏死区避开，选定病灶边缘区域和中心作为ROI，测量ROI的信号强度，并计算早期增强率。经处理后生成自动伪彩灌注图，勾画并计算增强扫描达峰时间及映增强扫描强化曲线下面积。在病灶实性部分尽量避开坏死、囊变、出血区的灌注图肿块内选择3个ROI，其中，ROI选取保持大小一致，记录灌注图参数并取3个ROI区域的均值作为各参数指标的评估结果。

1.2.2 免疫组织学检测 采用SP法的免疫组织化学法对患者病理组织进行检查，参照说明书进行操作，切取乳腺癌组织蜡块后行脱蜡、水化，高压将抗原修复后在过氧化氢室温条件下孵育，然后分别滴加一抗和二抗，采用DAB显色并利用苏木素实施复染封片。参照Weidner法挑选微血管分布最密的位置，计算不重复的视野内具体的CD34染成棕色的血管条数，取其中的均值做为MVD。并采用SP法的免疫组织化学法检测观察组患者的人类表皮生长因子受体2(human epidermal receptor 2，HER-2)、雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)及Ki-67水平。HER-2定位于细胞膜，其余均定位于细胞核。按照阳性细胞占比与颜色深浅程度评分乘积作为结果判读标准，0分判定为阴性，1～2分判定为弱阳性，3分及以上判定为强阳性。若患者出现病灶区长短径之和增长>20%则判定为病情进展，否则判定为疾病控制即预后有效。

2 结果

2.1 两组患者MRI影像学参数检测结果 观察组患者对比剂的速率常数(Kep)及容量转移常数(Ktrans)分别为(2.67±0.51)、(1.31±0.33)，常规组患者的Kep及Ktrans分别为(1.82±0.32)、(0.83±0.12)。观察组患者的Kep及Ktrans均高于常规组，差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组和常规组的血管外细胞外间隙容积比(Ve)分别为(0.53±0.17)、(0.51±0.19)，组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。观察组典型病例见图1。

2.2 观察组患者MVD及生物因子检测结果 观察组患者的MVD为(54.39±5.12)，HER-2、ER、PR及Ki-67的强阳性率分别为46.15%、44.23%、47.12%及41.35%。观察组患者的免疫组化染色结果见图2。

2.3 不同生物因子检测结果患者的MRI影像学参数检测结果 HER-2、ER、PR及Ki-67强阳性及预后病情进展患者的Kep及Ktrans均高于各指标弱阳性及阴性，且差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同生物因子检测结果患者的MRI影像学参数检测结果

2.4 MRI影像学参数与乳腺癌患者肿瘤MVD的相关性分析 乳腺癌患者肿瘤MVD与Kep及Ktrans均呈显著正相关，其中，肿瘤MVD与Kep相关性模型为Y=9.314 3x+29.059(R2=0.975 6，r=0.987 7)，MVD与Ktrans相关性模型为Y=15.486x+35.119(R2=0.979 9，r=0.989 9)。

2.5 MRI影像学参数与不同生物因子检测结果的相关性分析 乳腺癌患者的HER-2、ER、PR及Ki-67强阳性以及预后病情进展与Kep均呈显著正相关，相关系数分别为0.643、0.593、0.609、0.615、0.674(P<0.05)。乳腺癌患者的HER-2、ER、PR及Ki-67强阳性以及预后病情进展与Ktrans均呈显著正相关，相关系数分别为0.598、0.611、0.608、0.643、0.625(P<0.05)。

3 讨论

目前，临床上主要利用MVD的数量定量分析乳腺癌新生血管的情况，并用于分析血管生成程度[10]。肿瘤的血管生成和乳腺癌MVD关系密切，低MVD则被认为肿瘤的血供不好，肿瘤组织可能发生了缓慢生长或坏死的情况[11]。而高MVD值则被认为肿瘤的血供较良好，通常情况下提示肿瘤生长活跃，癌细胞易进入微循环，并可能导致肿瘤远处转移[12]。目前，临床上通过免疫组织化学法检测肿瘤组织样本内的MVD水平，其结果只能反映肿瘤组织极个别位置血管的生成的具体情况，并无法有效实现对肿瘤整体血管生成状态的评估[13]。乳腺MRI扫描检查属于经典的无创检查方法，可有效实现活体状态下反映肿瘤血管的生成状况，对乳腺癌的临床评估和分析具有十分重要的意义[14]。

有研究报道，乳腺癌患者的预后质量和生物学相关特点关系密切，通过检测受试者病灶组织中ER、Ki-67、PR及HER-2等生物学指标有助于选择合理的治疗方案，并可用于指导患者的临床预后判断及内分泌治疗[15]。MRI扫描是经典的无创灌注成像，可有效提供血管渗透性等指标，用于评估患者病灶区血流动力学情况，反映组织血管化程度及微血管灌注情况，为肿瘤的临床分级诊断、肿瘤定性及临床治疗方案的确定提供数据支持和依据[16]。PR是细胞中重要的类固醇激素受体蛋白，也是常用的乳腺癌预后评估指标，PR及ER阳性乳腺癌患者病变程度恶性较低，存活期长，激素治疗效果好[17]。本研究结果显示，随着患者组织中PR水平升高，Kep和Ktrans水平也随之升高，笔者分析认为，随着乳腺癌患者组织中PR水平的降低，多提示肿瘤分化差、生长迅速、细胞合成技术受体能力降低。PR阴性或弱阳性患者肿瘤生长速度更为迅速，且新生血管更为丰富，内部细胞不完整，因此导致局部微血管血流状态及渗透性增强。此外，乳腺癌患者恶性程度显著升高，会导致血流速度加快，增强细胞生长旺盛程度，加快对比剂通过速度，与Kep水平升高密切相关。HER-2在体内过表达会导致血管内皮生长因子合成和释放，并可起到促进肿瘤新生血管生成的作用。HER-2高表达多提示肿瘤细胞血液灌注丰富，对内分泌治疗反应差，恶性程度高，随HER-2水平升高，多伴随出现血流灌注丰富程度提高，Kep和Ktrans水平也随之升高[18-19]。本研究结果显示，观察组Kep及Ktrans均高于常规组，观察组患者MVD为(54.39±5.12)，HER-2、ER、PR及Ki-67强阳性率均>40%。笔者进一步分析发现，HER-2、ER、PR及Ki-67强阳性及预后病情进展患者的Kep及Ktrans均高于弱阳性及阴性。采用相关性分析结果显示，乳腺癌患者肿瘤MVD与Kep及Ktrans均呈显著正相关关系，乳腺癌患者HER-2、ER、PR及Ki-67强阳性及预后病情进展与Kep及Ktrans均呈显著正相关关系。笔者分析认为，临床中可通过MRI扫描检查评估受试者Kep及Ktrans指标，并可有效间接反映受试者的血流灌注情况，用于评估乳腺癌的恶性程度。

综上所述，MRI影像学参数与乳腺癌患者肿瘤MVD及生物因子均呈现显著相关关系，并可作为评估临床治疗疗效的潜在方法。但本研究入组临床样本数较少，且并未对患者进行长期随访和追踪，有待后续深入研究和分析。