饲粮中添加雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋品质和蛋黄中丙二醛含量的影响

夏可心，杨海华，赵晨东，蒋锦枫，史楠楠，刘静，王智超*

（1塔里木大学生命科学与技术学院，新疆 阿拉尔 843300）

（2塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室，新疆 阿拉尔 843300）

随着我国经济的快速发展以及生活水平的不断提高，人们在解决温饱问题的同时，更加关注食品的健康以及营养价值，DHA富集禽蛋的研究与开发也越来越受到关注。二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA）是脂肪酸家族一员，属ω-3长链多不饱和脂肪酸（PUFA），对胎儿、婴儿脑发育和视网膜发育至关重要，若机体缺乏DHA会影响细胞膜的稳定性和神经递质的传递［1-2］。有相关研究发现，目前市面上常见的几种DHA补剂中，禽蛋DHA中的吸收率最好，可达90%以上［3-6］。常用的DHA富集饲粮添加剂主要有裂壶藻、鱼油以及亚麻籽油等。相对于鱼油中的DHA和亚麻籽油中的DHA而言，裂壶藻中的DHA更易吸收，鱼腥味等异味淡、无海洋污染、更加安全［3］。但是，由于DHA内含有多个不饱和键，很容易被氧化产生过氧化物，其产物一旦进入到机体中，就会氧化细胞中的脂质，致使细胞的正常结构被破坏，加快机体的衰老过程［7］，所以在DHA富集鹌鹑蛋的生产过程中预防产品的氧化是目前亟待解决的问题。

雨生红球藻是一种淡水单胞绿藻，因能够大量累积虾青素呈现红色而得名，是公认的天然虾青素来源之一。虾青素又名虾黄素、虾黄质，是一种酮式类胡萝卜素，其化学名为3，3'-二羟基-4，4'-二酮基-β，β'-胡萝卜素，具有抗炎、着色、预防糖尿病肾病、提高免疫力、抑制脂过氧化等功能［8］。虾青素内存在三种旋光异构体，其中天然的左旋型虾青素具有最强的抗氧化能力，其抗氧化能力是维生素E的500～1 000倍，因此天然的左旋型虾青素被称为“超级维生素E”［9］。目前，国内外关于虾青素应用的研究大多集中在鱼［10-11］、蛋鸡［12］和猪［13］等畜禽中，主要用于鱼的增色、改善肉鸡和猪的皮肤、肌肉色泽以及提高其繁殖性能，然而对于我国另外一种重要的蛋禽——鹌鹑却鲜有报道。因此，针对当前DHA富集禽蛋中DHA易氧化造成货架期短的问题，本试验以DHA富集鹌鹑蛋为研究对象，通过向白羽鹌鹑的日粮中添加雨生红球藻，研究其对DHA富集鹌鹑蛋蛋品质和蛋黄中 丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量的影响（MDA是脂质氧化终产物，其含量是反映机体或组织抗氧化潜在能力的重要参数［14］），以期为延长DHA富集鹌鹑蛋货架期提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用雨生红球藻购自鄂托克旗德荣藻业有限责任公司，虾青素含量为3%。

商品化基础饲粮购自河南赛东饲料有限公司，由玉米、麸皮、小麦次粉、豆粕、豆油、石粉、磷酸氢钙、氯化钠、微量元素、维生素、植物酶、微生态制剂等组成，营养成分见表1。

表1 基础饲粮营养成分 %

1.2 试验设计

试验选用40周龄白羽鹌鹑160只，随机分为4组，每组2个重复，每个重复20只。对照组（CK）饲喂DHA富集饲粮（添加2%裂壶藻的基础饲粮），试验组（Ⅰ～Ⅲ）饲喂在对照组的饲粮基础上分别添加0.4 g/kg、2.0 g/kg、10.0 g/kg雨生红球藻的饲粮（折合虾青素的含量分别为0.012 g/kg、0.060 g/kg、0.300 g/kg）。预饲期2周，正饲期6周。

1.3 试验动物饲养管理

试验采用室内笼养，呈上下两层笼养结构。采用自然光照和人工补光两种方式相结合，自由饮水。每日早上10：00饲喂，开窗通风，晚上23：00收蛋。每3 d清理一次粪便并对笼舍进行消毒。

1.4 检测指标及方法

1.4.1 DHA富集鹌鹑蛋蛋品质的测定

于正饲期的第42 d，每组随机取6枚蛋，进行蛋品质的测定。检测指标分别为蛋重、蛋壳厚度、蛋壳重量、哈夫单位、蛋黄颜色。

用电子分析天平测量蛋重及蛋壳重量；蛋壳厚度用游标卡尺进行测量，测量前去除蛋壳的内外膜，分别测量蛋壳的锐度、钝端和中间部位并求其平均值；蛋黄颜色用罗氏比色扇进行测定；哈夫单位用NFN381/NFN382型蛋白高度测量仪测定（日本FHK公司），测量后通过计算得出，计算式如下：

哈夫单位=100lg［H+7.57-1.7(W0.37)］

式中：H为浓蛋白高度，mm；W为蛋重，g。

1.4.2 DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中MDA含量的测定

于正饲期第42 d，每组随机抽选12枚蛋，共计48枚蛋，置于常温下保存。分别于采样后第0 d（当天）、第10 d、第20 d以及第30 d进行检测，每组随机抽取6枚蛋检测蛋黄中MDA的含量，用苏州科铭技术有限公司的试剂盒进行检测。

1.5 数据统计分析

采用Microsoft office Excel 2019对数据进行整理，SPSS 24.0软件对数据进行单因素方差分析。结果用平均值±标准差表示，P＜0.05表示差异显著，P＜0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋品质的影响

由表2可知，与对照组相比，添加雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋的蛋壳厚度和哈夫单位无显著影响(P＞0.05)；各试验组的蛋黄颜色均极显著高于对照组(P＜0.01)，并随着雨生红球藻用量的增加蛋黄颜色逐渐加深，其中试验Ⅲ组颜色最深，哈夫单位达到了13.46；试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的平均蛋重极显著高于对照组(P＜0.01)，试验Ⅲ组的平均蛋重显著高于对照组(P＜0.05)。

表2 雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋品质的影响

2.2 雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中MDA含量的影响

由表3可知，DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中的MDA含量随着雨生红球藻添加量的升高逐渐降低。第0 d时，与对照组相比，添加雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中MDA含量无显著影响(P＞0.05)；第10 d时，各试验组MDA含量极显著低于对照组(P＜0.01)；第20 d时，各试验组MDA含量显著低于对照组(P＜0.05)，但各试验组之间差异不显著(P＞0.05)；第30 d时，试验Ⅰ组MDA含量与对照组无显著差异(P＞0.05)，试验Ⅱ组及试验Ⅲ组MDA含量显著低于对照组(P＜0.05)，各试验组之间无明显差异(P＞0.05)。

表3 雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中MDA含量的影响 nmol/g

3 讨论

3.1 雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋品质的影响

有研究发现，消费者在禽蛋的选择上更加注重蛋黄的颜色，认为蛋黄的颜色越深蛋的品质越好［15］。但是禽类自身并不能合成色素，蛋黄中的颜色主要是由于禽类摄食的饲料中含有叶黄素等脂溶性色素沉积在蛋黄中形成的［16］。对于蛋黄的着色，二酮基、二羟基类胡萝卜素比单羟基、单酮基或环氧类胡萝卜素的着色功能强，雨生红球藻中所含虾青素属非维生素A源的二羟基二酮基类胡萝卜素，呈艳丽的红色［17］。类胡萝卜素是以棕油酸二酯的形式存在，与低密度脂蛋白结合后被吸收，以游离状态进入血液，并随着血液循环进入蛋黄等组织重新转化为棕油酸二酯并在蛋黄中沉积下来，从而增加蛋黄的颜色［18-19］。CONRADIE T A 等［20］、LEEETAL K S 等［21］研究发现，与对照组相比，加入了虾青素的试验组的蛋黄颜色明显加深。本试验结果表明，饲粮中添加雨生红球藻能使DHA富集鹌鹑蛋蛋黄的颜色加深，可能是雨生红球藻中含有丰富的虾青素导致的，与前人研究结果一致。哈夫单位是衡量蛋品新鲜度的指标，值越大说明蛋白越黏稠，蛋越新鲜，品质越好，本试验中添加了雨生红球藻的DHA富集鹌鹑蛋的哈夫单位要比对照组高，可能是虾青素对机体起到了一定的抗氧化作用。而雨生红球藻对蛋壳厚度无显著影响，这与李润桦等［22］研究结果一致。

目前关于雨生红球藻对平均蛋重的影响的研究结果不一致。据报道，在禽类的饲料中添加雨生红球藻并没有改变平均蛋重［23］。但本试验结果显示，试验组的平均蛋重显著高于对照组，考虑是抗氧化剂和多不饱和脂肪酸复合作用的结果，其具体原因及机理还有待进一步的研究。

3.2 雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中MDA含量的影响

MDA是多不饱和脂肪酸受到活性氧攻击后形成的有毒物质，其含量反映了脂质的过氧化程度［14］。不饱和脂肪酸极易被氧化生成脂质过氧化物［24］，同时脂质过氧化物对DHA富集鹌鹑蛋的贮存也产生不利影响，加速DHA富集鹌鹑蛋的腐败变质，缩短其保质期［25］。本试验中，DHA富集鹌鹑蛋随着贮存时间的延长蛋黄中MDA含量呈增加趋势，且未添加雨生红球藻的DHA富集鹌鹑蛋在贮存过程中蛋黄中MDA含量在数值上均高于试验组。由表2可以看出，添加了雨生红球藻的试验组在常温下存放30 d时，蛋黄中MDA的含量依然要比存放了10 d的对照组低。这表明雨生红球藻可显著增加DHA富集鹌鹑常温下的保质期，有利延长其货架期。董复成等［26］在研究中也曾提到，可通过测定蛋黄中MDA的含量来反映蛋黄的抗氧化能力，机体内MDA含量越高，则其抗氧化能力越低，细胞受到的损伤程度越大。AO X等［27］研究发现，给北京鸭饲喂含有虾青素的饲料，可以降低血清中的MDA含量。鲁琼芬等［28］通过测定富含PUFA的鸡蛋蛋黄中MDA含量来探究不同贮存条件对富含PUFA鸡蛋的影响，得出低温可延长鸡蛋的新鲜度的结论。未来如果将雨生红球藻和低温储存联合实施，是否可以更大限度的增加DHA富集鹌鹑蛋的保质期，从而延长货架期，值得探究。

4 结论

1）饲粮中添加雨生红球藻对DHA富集鹌鹑蛋的哈夫单位、蛋壳厚度无显著影响；对平均蛋重存在一定的影响；对蛋黄颜色有极显著影响。

2）饲粮中添加雨生红球藻能够降低DHA富集鹌鹑蛋蛋黄中MDA含量。雨生红球藻的适宜添加量为2.0 g/kg(虾青素含量为0.060 g/kg)。