抗核抗体、抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体、D-二聚体对复发性流产疾病转归的影响

刘巧敏，何丽

(1.舞钢市人民医院 检验科，河南 舞钢 462500；2.平顶山市第一人民医院 检验科，河南 平顶山 467000)

复发性流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)指自然流产连续发生≥2次，其病因复杂，约50%～60%为免疫性RSA，主要由抗磷脂抗体综合征(antiphospholipid syndrome，APS)所致[1-3]。抗β2-糖蛋白 Ⅰ 抗体(anti-β2glycoprotein Ⅰ antibody，A-β2-GPⅠ)是APS主要抗体，与RSA有关[4]。抗核抗体(antinuclear antibody，ANA)阳性提示自身免疫系统激活[5]，但其与RSA的关系尚存争议。基于此，本研究旨在分析ANA、A-β2-GPⅠ、D-二聚体(D-dimer，D-D)与RSA疾病转归的关系及预测价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取舞钢市人民医院2019年3月至2021年3月收治的224例RSA患者作为观察组，另选取于产科门诊就诊的60例正常经产妇作为对照组。观察组年龄24～39(31.33±3.48)岁，流产3～6(3.91±0.42)次，体质量指数(body mass index，BMI)18～28(22.36±2.25)kg·m-2。对照组年龄22～40(30.91±3.62)岁，流产3～6(3.80±0.32)次，BMI 18～29(22.65±2.41)kg·m-2。两组年龄、BMI均衡可比(P>0.05)。纳入标准：符合《妇产科学》[6]中RSA诊断标准；1个性伴侣；男方精液正常；对照组为无任何不良孕产史的健康经产妇。排除标准：感染、遗传、生殖器官解剖异常、内分泌等因素所致的RSA；合并糖尿病、肾病、甲状腺疾病等内科疾病；2个月内使用过抗凝或促纤溶药物。患者对本研究内容知情，自愿签署知情同意书。本研究经医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 检测方法入组24 h内取空腹静脉血6 mL，其中3 mL使用枸橼酸钠抗凝，离心(半径8 cm，转速3 500 r·min-1，时间9 min)，取上清液，采用免疫比浊法，使用日本Sysmex CA-1500型全自动血细胞凝集分析仪检测D-D水平。另3 mL不抗凝，离心(半径8 cm，转速3 500 r·min-1，时间9 min)，取血清，采用酶联免疫吸附法，使用德国欧蒙公司试剂盒检测A-β2-GPⅠ水平，≥cut off(20 IU·L-1)值为阳性，

1.3 观察指标及分析内容(1)ANA阳性率、A-β2-GPⅠ阳性率、D-D水平。(2)不同流产次数患者ANA阳性率、A-β2-GPⅠ阳性率、D-D水平，并分析其与流产次数相关性。(3)不同转归患者一般资料、ANA、A-β2-GPⅠ、D-D水平。(4)采用logistic回归分析影响转归的因素。(5)将活产纳入阴性组，将流产纳入阳性组，分析ANA、A-β2-GPⅠ、D-D 受试者工作特征(receiver operating characteristic curve，ROC)水平及其对转归的预测价值，通过logistic二元回归拟合，返回预测概率logit(p)，将其作为独立检验变量，做ROC曲线，分析联合检测预测价值。

2 结果

2.1 ANA、A-β2-GPⅠ阳性率和D-D水平观察组ANA、A-β2-GPⅠ阳性率及D-D水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组ANA、A-β2-GPⅠ阳性率和D-D水平比较

2.2 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D与流产次数的关系流产≤3次的患者ANA、A-β2-GPⅠ阳性率与≥3次的患者比较，差异无统计学意义(P>0.05)；流产≤3次患者的D-D水平低于>3次的患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。相关性分析结果显示，RSA患者ANA、A-β2-GPⅠ表达与流产次数无关，D-D水平与流产次数呈正相关(P<0.05)。见表3。

表2 不同流产次数ANA、A-β2-GPⅠ、D-D比较

表3 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D与流产次数的关系

2.3 不同转归患者一般资料、ANA、A-β2-GPⅠ、D-DRSA不同转归患者既往流产次数、吸烟、饮酒、受教育程度、生殖道感染、D-D水平及ANA、A-β2-GPⅠ阳性率相比，差异有统计学意义(P<0.05)。RSA不同转归患者年龄、BMI比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 不同转归患者一般资料、ANA、A-β2-GPⅠ、D-D

2.4 RSA患者疾病转归影响因素分析以RSA患者疾病转归为因变量(活产=0，流产=1)，将表3中差异有统计学意义的因素(既往流产次数、吸烟、饮酒、受教育程度、生殖道感染、D-D水平及ANA、A-β2-GPⅠ阳性率)赋值，纳入logistic回归分析，可知上述因素均为RSA患者疾病转归影响因素(P<0.05)。见表5。

表5 RSA患者疾病转归影响因素logistic回归分析

2.5 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D表达对RSA患者疾病转归的预测价值以活产为阴性组，以流产为阳性组，建立ROC曲线，结果显示，ANA预测RSA患者疾病转归的AUC为0.865，A-β2-GPⅠ预测疾病转归的AUC为0.789，D-D预测疾病转归的AUC为0.795，ANA、A-β2-GPⅠ、D-D联合预测RSA患者疾病转归的AUC最大，且>0.9，预测效能较高。见表6。

表6 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D表达对RSA患者疾病转归的预测价值

3 讨论

RSA是育龄期女性常见疾病，发生率为1%～5%，复发风险随流产次数增加而上升，再次妊娠自然流产率可达70%～80%[7-8]。随着生殖免疫学研究的不断深入，免疫因素被认为是RSA重要原因[9]。免疫性RSA指母体自身产生免疫抗体，干扰排卵、受精、胚泡着床等过程，导致反复自然流产，其中抗磷脂抗体为主要抗体[10]。抗磷脂抗体主要包括A-β2-GPⅠ、抗心磷脂抗体、狼疮抗凝物，其中A-β2-GPⅠ较抗心磷脂抗体和狼疮抗凝物对APS诊断更具特异度[11]。ANA是抗细胞核抗原自身抗体总称，几乎所有自身免疫性疾病均存在ANA阳性。有文献报道，正常人也可出现ANA阳性，阳性率为1.82 %～6.00%[12]。目前，ANA检测对RSA诊断的意义仍存在争议。周燕等[13]研究显示，RSA患者ANA阳性率(20.71%)高于已生育健康女性(4.61%)。Li等[14]报道，接受体外受精术后早期流产的患者ANA阳性率(39.45%)明显高于正常对照组(16.13%)。也有研究认为，RSA患者ANA阳性率无明显变化[15]。本研究结果显示，RSA患者ANA、A-β2-GPⅠ阳性率均高于正常经产妇，且ANA、A-β2-GPⅠ阳性均为RSA患者疾病转归影响因素，提示ANA、A-β2-GPⅠ均与RSA有关。本研究还发现，RSA患者D-D水平与流产次数呈正相关。考虑与RSA患者流产次数增加，体内存在更多被破坏的血管内皮细胞有关。本研究结合既往文献认为，RSA患者机体内存在复杂自身免疫反应，ANA可能通过促进免疫复合物在蜕膜血管表面沉积，损伤蜕膜血管组织，胎盘血灌注量下降，诱导血栓形成，缺血、低氧必然影响胚胎组织，导致流产[16-21]；同时，ANA可能通过阻碍内膜发育，对胚胎着床和发育产生影响，最终造成流产[22-24]，但确切机制有待进一步研究。本研究采用ANA、A-β2-GP Ⅰ、D-D联合预测RSA患者疾病转归，ANA阳性、A-β2-GPⅠ阳性、D-D>210.2 μg·L-1时，均高度怀疑流产发生，联合预测AUC达0.937，预测价值最高。提示临床可同时检测ANA、A-β2-GPⅠ、D-D，为RSA患者疾病转归的预测提供更全面、可靠的参考信息。

综上可知，ANA、A-β2-GPⅠ、D-D与RSA血栓前状态有关，该3项指标检测可为RSA患者流产原因研判提供参考，并可有效预测疾病转归，对指导治疗有重要意义。