王远玲, 陈 林
(1.湖北省孝感市中心医院儿科, 湖北 孝感 432003 2.湖北省妇幼保健院儿科, 湖北 武汉 430070)
小儿反复呼吸道感染(Recuerrent respiratory tract infections,RRTIs)指患儿一年中发生上或下呼吸道感染频次超出正常范围,疾病发生率占儿科门诊约30%[1]。在呼吸道感染中,肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)、肺炎衣原体(Chamydiae pneumoniae,CP)均为常见病原体类型,有传染性,可在各个年龄组的儿童中出现[2]。现阶段临床关于上述3种病原体感染关注度越来越高,然而针对RRTIs患儿的相关文献报道较少。本研究对186例RRTIs患儿血清MP、CP、LP进行检测,分析其分布特点,旨在为疾病的预防治疗提供参考,报告如下。
1.1一般资料:选取本院2017年9月至2021年9月186例RRTIs患儿,男96例(51.61%),女90例(48.39%);0~2岁44例(23.66%),3~6岁76例(40.86%),7~12岁66例(35.48%);筛查季节:春季51例(27.42%),夏季39例(20.97%),秋季55例(29.57%),冬季41例(22.04%)。
1.2纳入标准:符合全国呼吸道学术会议修订的RRTIs诊断标准[3]:①0~2岁:年发作次数大于等于7次;②3~6岁患儿:年发作次数大于等于6次;③7~12岁患儿:年发作次数大于等于5次,2次感染发生间隔在7d以上(注:①两次感染间隔至少7d以上;上呼吸道感染次数不够时候可加上下呼吸道感染次数,反之则不能;确定次数须连续观察1年;反复肺炎:须由肺部体征和影像学证实,1年内发作≥2次,且期间无肺炎体征和影像学改变)。0~12岁。未有急性感染表现;血MP、CP或LP病原体感染;伦理委员会批准,监护人同意。排除标准:①原发免疫缺陷性疾病;②重度营养不良;③合并肺部发育不良、过敏性鼻炎、哮喘等;④长期使用影响免疫的药物,如糖皮质激素等;⑤合并其他传染疾病。
1.3病原学检测:取3mL空腹静脉血,分离血清,通过间接免疫荧光法测定血清CP、LP病原体IgM,取血清15μL,加入PBS及抗人IgG吸附剂各150μL,对照无须通过抗人Ig G吸附剂处理,离心,于载玻片上滴入15μL血清,置入湿盒,37℃温度1.5h孵育,PBS冲洗浸泡,轻摇,蒸馏水冲洗后风干。滴入15μL抗人Ig M异硫氰酸荧光素,湿盒中37℃下孵育30min,重复上述PBS冲洗及与风干系列操作,盖上盖玻片,400倍荧光镜下观察,出现特异性荧光,则可判断为相应抗体阳性;如未出现特异性荧光,则判为相应抗体阴性。用被动凝集法检测血清MP-IgM,试剂盒由日本富士瑞必欧株式会社提供,半定量检测血清MP抗体滴度,操作步骤按说明书执行,MP-IgM≥1∶80为MP感染。
1.4统计学分析:通过SPSS22.0软件,计数资料通过构成比或率的形式表示,不同性别、年龄、季节组间病原体阳性率的比较采用卡方检验,检验水准为0.05;对三组或四组间差异有统计学意义者进行两两比较,采用Bonferroni校正,三组间两两比较检验水准α=0.05/3=0.017;四组间两两比较检验水准α=0.05/6=0.0083。
2.1三种病原体阳性结果比较:RRTIs患儿血清MP病原体阳性率31.72%高于CP阳性率19.89%(P<0.017,Bonferroni校正),CP病原体阳性率19.89%高于LP阳性率8.06%(P<0.017,Bonferroni校正)。见表1。
表1 三种病原体阳性结果比较
2.2性别差异性比较:不同性别RRTIs患儿血清MP、CP、LP病原体阳性率比较(P>0.05)。见表2。
表2 性别差异性比较
2.3年龄差异性比较:3~6岁年龄段RRTIs患儿血清MP、CP、LP病原体检测阳性率分别为51.32%、34.21%、17.11%高于0~2岁患儿13.64%、9.09%、2.27%,且高于7~12岁患儿21.21%、10.61%、1.52%(P<0.017,Bonferroni校正)。见表3。
表3 年龄差异性比较
2.4季节差异性比较:冬季RRTIs患儿血清MP、CP、LP病原体阳性率分别为58.54%、41.46%、24.39%高于春季25.49%、13.73%、3.92%,高于夏季17.95%、12.82%、2.56%,高于秋季27.27%、14.55%、3.64%(P<0.0083,Bonferroni校正)。见表4。
表4 季节差异性比较
RRTIs病因复杂,大部分由先天原因、免疫功能低、缺乏微量元素等导致,反复发作、迁延不愈,近年来随着人们生活环境和生活习惯的改变,发病率呈上升趋势。研究显示呼吸道感染其流行和季节、区域、年龄均有一定关系,表现出不同流行特点[4]。
不同病原体导致的RRTIs感染症状以及采用的治疗方式存在一定的差异,确定致病病原体,分析病原体感染特点,针对性做好预防工作,合理选择抗菌药物,有利于患儿早日康复。MP、CP、LP感染中,MP属于细胞外寄生生物,可于无细胞培养基中进行生长繁殖,主要经呼吸道飞沫传播,MP感染人口密集地区发病率较高,病情重且病程长,易损伤脏器,可引起相关细胞出现变性甚至死亡,并可致使白介素等升高,同时由于其不具备细胞壁,青霉素和头孢类抗生素应用无效,可选择敏感抗生素较少[5]。CP作为细胞内寄生生物,具有细胞壁,CP感染发生后可致咽喉、气管、肺部等炎症。LP为细胞内寄生,属于条件致病性微生物,可致呼吸性细支气管、肺部炎症。明确感染病原学,指导抗生素的使用,对RRTIs患儿康复有重要意义。
本研究中MP病原体阳性率31.72%高于CP、LP病原体阳性率19.89%、8.06%,分析其原因在于MP是目前在可独立生活微生物中已知体积最小的,可由空气飞沫传播,与其他感染患者接触易感[6]。本研究中CP阳性率低于MP且又高于LP,人类是CP唯一宿主,其生物活性较MP差。LP可入侵机体巨噬细胞,其表现出的致病性与胞内寄生的能力有关,受机体免疫制约。本研究中反复呼吸道感染患儿MP、CP感染率高于Elhussein AM等[7]研究结果,这可能是由于地域、人群种族、生活习惯、病原体传播等的影响。
本研究中RRTIs患儿MP、CP、LP阳性率无性别差异,与韩宏枫等[8]研究结果一致。Calapodopulos NVI等[9]研究显示MP、CP、LP感染贯穿各个年龄阶段,检出峰值在学龄前期儿童。本研究也显示3~6岁患儿MP、CP、LP病原体感染阳性率高于0~2岁与7~12岁患儿,分析可能原因,一方面由于年龄较小儿童免疫系统尚未完全发育完善、成熟,为呼吸道感染发生创造了条件;另一方面,0~2岁儿童受家长精心呵护,和外界的接触较少,病原体入侵机会较少,而3~6岁患儿普遍处于幼儿园集体学习阶段,接触人员多,病原体均可通过飞沫及密切接触进行传播,感染率较高。周霞等[10]研究结果显示MP、CP、LP呈现一定的季节性特征,且以冬季阳性率较春夏明显升高。本研究中3种病原体阳性率以冬季最高,与上述研究结果一致,冬季天气寒冷,早晚温差相对较大,而相较于成年人,儿童温度敏感性高,气温骤变影响机体免疫,更易发生急性呼吸道感染,这与Tian Y等[11]研究中认为的RRTIs全年散发,且以秋冬季高发的特点一致,由此也提示家长应做好冬季小儿保暖工作。本研究的不足之处在于,样本量较少,未针对三种病原体感染,针对性分析其耐药性,后续研究过程中可扩大样本量,在分析病原体感染的同时,进一步分析其耐药性。
综上所述,在RRTIs患儿中,呼吸道感染MP、CP、LP病原体中以MP感染率最高,CP感染次之,以LP最低,但在不同年龄段患儿易感性不同,3~6岁患儿MP、CP、LP病原体感染阳性率高于0~2岁与7~12岁患儿,同时病原体流行存在季节差异,以冬季感染率最高。临床上应针对儿童RRTIs病原菌感染流行特点,制定合理预防和诊疗方案。