刘桂喜,文银容,胡辉灿,方 琼,邓 辉,唐杰华,张金梁,孙 瑜※
(1.邵阳县动物疾病预防控制中心,湖南 邵阳 422000;2.邵阳市动物疾病预防控制中心,湖南 邵阳 422000)
猪瘟(CSF)作为家猪和野猪最重要的病毒性疾病之一,危害严重,影响动物健康和养猪业的发展。尽管疫苗能够有效预防和控制,但是在生猪生产中,世界大部分地区CSF依然偶尔出现。猪瘟目前已被列为必须向世界卫生组织报告的动物疫病之一[1],我国也将其列为一类动物传染性疾病。
猪瘟是由猪瘟病毒引起,以高烧、呼吸道症状、皮肤出血、便秘或腹泻以及神经症状为主要特征的高度传染性疾病。感染猪具有明显的免疫抑制,包括B淋巴细胞和T淋巴细胞的减少或衰竭;该病和非洲猪瘟的发病症状比较相似,需要谨慎区分。本病在自然条件下只感染猪,无明显的季节性。该病主要通过猪于猪之间的直接接触或者通过受污染的饲料(如泔水)媒介传播;此外人和其他动物也能机械传播病毒;也可因受感染的公猪精液用于人工授精而传染猪瘟。目前猪瘟没有特效药治疗,主要以免疫预防为主,因此及时开展免疫效果监测,评估免疫效果,对于其有效防控和风险评估尤为重要[2]。本文对2019年至2021年湖南省邵阳市各县市区的猪瘟免疫保护情况进行抽查,期待为本市猪瘟疾病的控制和净化起到一定的帮助作用。
在邵阳市的12个县市区随机抽取32个规模化养猪场(2019年、2021年各10个规模猪场、2020年12个规模猪场)和32个散养户猪场(2019年、2021年各10个散养猪场、2020年12个散养猪场),每个场(户)各采集了10份生猪的新鲜血液,被采集的猪都接种了猪瘟疫苗,疫苗类型为细胞源猪瘟活疫苗。本次实验使用美国爱德士生物科技公司生产的抗体检测试剂盒(生产批号:AA601)进行了检测。
1.2.1 实验器材准备。准备50μL、100μL单道和多道微量移液器、一次性微量移液器使用的吸头、去离子水、洗板机、恒温培养箱、微量反应板用的封条、酶标仪等。
1.2.2 试剂准备。实验前将血清学实验室室内温度调到26℃,再将试剂盒从冰箱取出进行回温,直至室温,洗涤液(10倍浓缩的洗涤液)在使用前必须用去离子水进行10倍稀释。
1.2.3 样品准备。每次采集好的猪全血使用离心机进行离心,将转速调至3000r/min,时间设置为3min,提取出符合实验要求的猪血清。
1.2.4 操作步骤。所有操作严格按照抗体检测试剂盒说明书进行。
1.2.5 判定标准。通过试剂盒检测到样本和对照的吸光度值按照说明书指定的计算方法换算出每个样本的阻断率,阻断率大于或等于40%,样本被判定为阳性(有CSFV抗体存在);阻断率小于或等于30%,被检样本被判为阴性(无抗CSFV抗体存在);而介于30%~40%之间,判定为可疑,应再次进行实验,如再为可疑应判阳性。
2019年—2021年,检测的64个养殖场(户)640份猪血清样品中,猪瘟抗体的总合格率为(605/640)94.5%。2019年猪瘟抗体合格率为(189/200)94.5%、2020年猪瘟抗体合格率为(233/240)97.08%、2021年猪瘟抗体合格率为(183/200)91.5%,抗体合格率总体呈先低后高再低趋势(图1),但是均达到了农业农村部要求的70%以上的标准。
图1 不同年份猪瘟抗体合格率检测结果
由表1可知,规模猪场和散养户CSF抗体水平均达到80%以上。2019年至2021年规模猪场免疫抗体分别为100%、96.7%、89%;散养户分别为91%、97.5%、94%。从三年总体来看,除2020年规模猪场免疫抗体水平略低于散养户外,其它两年规模猪场均高于散养户。
表1 2019年—2021年规模猪场与散养户春防免疫抗体检测结果
本实验应用美国IDEXX公司生产的猪瘟疫苗抗体检测试剂盒已经被广泛地应用于检测猪瘟抗体,其检测结果稳定,且能够用于评估猪场猪瘟疫苗的免疫状况[3]。
本次检测结果表明,2019年—2021年,邵阳市猪瘟免疫抗体水平均高于70%(国家标准),且均高于国家标准10%以上,每年抽检的规模猪场、散养户猪瘟免疫抗体阳性率均达到80%以上,远远高于国家标准70%。总体上来看,邵阳市猪瘟抗体水平较高,免疫效果较好。但是2020年的检测水平要高于2019年和2021年,证明免疫水平还是有波动,后期还是需要引起重视;因为在猪场疫病的防控中,疫苗免疫程序的建立和实施始终是预防疫情发生的一种最有效的手段,所以疫苗免疫水平的检测在完善各猪场防控建设中起到了关键作用。根据抗体水平的波动情况能够方便对免疫接种方案进行检验,为提高疫苗免疫效果采取有效的措施,能够及时做好疫苗补免与淘汰工作,做到防微杜渐,以确保邵阳生猪养殖事业能够长久稳定地发展。