葛向平
(山东省胶州市动物疫病预防控制中心 266300)
犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)属于副黏病毒科、麻疹病毒属,CDV 病毒粒子大多为长杆形、圆形或椭圆形,少数呈不规则、长丝形,为不分节段的单股负链RNA 病毒,有囊膜,对外部环境敏感,直径约为18nm,分子量约6×106Da,可引起核内包涵体。目前至少有9 个已确定了的犬瘟热病毒基因型,分别为美洲Ⅰ型、美洲Ⅱ型、亚洲Ⅰ型、亚洲Ⅱ型、欧洲Ⅰ型、欧洲Ⅱ型、欧洲Ⅲ型、南非型和南美Ⅰ型、南美洲Ⅱ型。
因CDV 为有囊膜的病毒,对外界环境比较敏感,抵抗力弱,不耐热,56℃30min 即可灭活,不耐酸,在pH3.0 条件下即可失去活性,对有机溶剂、紫外线、甲醛、乙醚均敏感,通常使用的消毒剂都可将CDV 灭活。
犬瘟热一年四季均可发生,但在冬季、春季、秋季比较多发,具有一定的周期性,一般每2~3 年流行1 次,但有的地区也会呈现不定时的发病流行,犬瘟热宿主广泛,包含犬科、鼬科、猫科、浣熊科、灵猫科和熊科等,CDV 的宿主范围还在不断扩大。CDV 患病动物、潜伏期带毒动物、死亡动物尸体都是CDV 传染源,CDV 可通过呼吸道和消化道传播,长期带毒的动物主要通过排泄物、分泌物排毒,造成其他动物感染。
2 月龄以内的幼犬或未断奶的幼崽对CDV 均有一定的抵抗力,主要受母源抗体保护,断奶后随着母源抗体水平逐渐降低或消失,对CDV 的易感性增强,导致发病,死亡率可达80%以上,对幼犬的危害性非常大。感染CDV 后通常前3~5d 无明显症状,早期出现眼鼻脓性分泌物、精神不振、食欲下降,体温升高并呈现双向热,体温第1 次升高后逐渐恢复正常,但并不代表病犬恢复正常,当体温第2 次升高时会呈稽留热,受高热影响,病犬鼻镜干燥、龟裂、腹泻,便中带血,同时伴随呕吐,有的病犬会出现神经症状,CDV 容易侵害神经系统,根据侵犯部位的不同而呈现不同的临床症状。发病犬通常出现脚垫增厚、肿胀。本病容易导致细菌病继发感染,如大肠杆菌、沙门氏菌等,使死亡率升高。
CDV 感染死亡犬剖检可见上呼吸道呈卡他性或化脓性感染,肺充血、出血,有渗出液,通常呈大叶性肺炎,心外膜有出血点,肠黏膜充血,肠系膜淋巴结充血肿大,胃黏膜膜卡他性炎症,内容物呈咖啡色糊状,严重者呈“血肠”状;CDV 侵害神经系统后,病犬剖检可见脑膜充血、出血,脑室出现明显扩张,并可见脑脊髓液增多。
PCR 诊断方法是具有敏感性高、特异性强等特点的一种以聚合酶链式反应为基础的诊断技术,在CDV 流行病学调查中发挥了非常重要的作用,在分子生物学诊断中得到广泛应用,通过提取CDV 基因组,使用设计好的特异性引物进行RTPCR 扩增,获得的PCR 产物进行序列测定后使用DNAstar 软件进行序列比对,可以了解CDV 的流行变异情况。
CDV 感染后极有可能在细胞核或细胞质中出现包涵体,主要存在于细胞质中,但导致包涵体病变的并非只有CDV,因此,这种方法仅可以作为CDV 诊断的一般辅助技术。采集犬外周血、刮取鼻腔黏膜或刮取眼结膜,制成涂片,经过HE 染色后在光学显微镜下观察,染色后的包涵体一般为红色,边缘性好,呈圆形或椭圆形,一般每个细胞2~3 个。
病毒分离和培养是常用的、比较可靠的一种诊断CDV 的方法,但由于CDV 对环境抵抗力比较差,因此,病毒分离时对病料采集、采集位置都有要求,一般分离CDV 时,采集死亡病犬的肺脏,因肺脏载毒量比较高,分离率比较高,处理时注意低温,以防病毒损失。CDV 适应性比较常用的细胞为Vero 细胞,CDV 接种细胞后主要产生细胞融合样病变,比较容易观察和辨别。
ELISA 检测是采用抗原抗体结合的原理,同时结合酶催化功能原理建立的一种检测方法,其特点是快速、灵敏、操作简单,在生产和实践中广泛应用,一次检测量可达百份。根据不同原理建立的ELISA 方法既可检测CDV 抗体,也可检测CDV抗原,敏感性、特异性强,对仪器要求低,采样简单,检测速度快。同时,在CDV 流行病学调查中也有广泛应用。
免疫胶体金技术采用抗原与特异性抗体结合后产生免疫反应为原理,关键在于抗体制备,一般采用单克隆抗体,特异性强,诊断结果可靠、准确。该方法在宠物医院使用率非常高,对怀疑CDV 感染的病犬可采集病犬的排泄物或眼鼻分泌物进行检测,具有快速、准确、使用简单的特点。
发生CDV 感染后一定要尽早治疗,一旦出现症状,立马进行隔离治疗。早期可直接注射犬瘟热高免血清,注射剂量为1ml/kg,小型犬一般为3~5ml,中大型犬为5~10ml,同时结合干扰素或单抗等药物进行治疗。如果发病犬出现高热、腹泻、呕吐等症状,可见眼窝凹陷,说明病犬严重脱水,治疗时要注意及时补充水分,通常使用输液法帮助患病犬迅速补充水分,一般使用5%的葡萄糖氯化钠注射液,多数情况补液量为100~300ml,补液时最好联合使用利巴韦林、抗生素、维生素C、辅酶A、肌苷等抗病毒、能量类药物。如果发病犬发生酸中毒,应在补液的时候添加5%碳酸氢钠,以纠正酸中毒。如果发病犬排便带血,说明犬消化道内有出血,此时应注射止血类药物。出现神经症状的发病犬如果症状严重可以考虑注射镇定药物。
(1)犬瘟热主要以预防为主,一旦发生犬瘟热疫情,为防止其他动物受感染,应做好病犬隔离,如果有死亡犬,一定要把病犬尸体进行无害化处理,并将犬舍进行彻底消毒。
(2)预防犬瘟热最重要的是做好免疫,提高动物自身免疫力,目前最常用的犬瘟热疫苗大多数为联苗(犬用),进口苗较多,主要是五联苗、六联苗等,国内常用的有吉林五星犬四联苗。首免日龄一般在50 日龄左右,这时犬免疫后能产生良好的免疫应答,也不会因免疫疫苗产生过大的免疫应激反应,更有利于抗体的产生,为更有效的预防犬瘟热,一般建议进行加强免疫,加强免疫的时间为10 周龄,成年犬一般每年加强1次免疫,免疫方式一般为肌肉免疫,剂量为1 头份。犬瘟热宿主较多,除了犬还有水貂等毛皮动物,水貂用犬瘟热疫苗多为犬瘟热活疫苗单苗或犬瘟热-水貂病毒性肠炎二联活疫苗,首免日龄一般为55 日龄。
(3)做好免疫接种并不代表犬瘟热一定不会发生,加强饲养管理,做好犬舍卫生清扫,并定期消毒,能有效减少犬瘟热的发生,同时,做好定期消毒对其他疾病也有很好的预防作用。CDV 对消毒剂非常敏感,一般常用的消毒剂有3%的氢氧化钠、甲醛、5%的碳酸消毒液,对CDV 均有良好的消毒作用。
(4)犬常发寄生虫病,寄生虫病容易诱发犬瘟热,定期给犬驱虫非常必要,一般常用的驱虫药物有阿维菌素、伊维菌素及丙硫咪唑,使用方法得当均有良好的驱虫效果。