CD138在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达特点及临床意义

白 雪，程 珍，严 敏，潘湘涛

（苏州大学附属太仓医院，江苏 太仓 215400）

弥漫大B 细胞淋巴瘤（Diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）是一类侵袭性高、异质性强的淋巴瘤。国际预后指数（International prognostic Index，IPI）是目前临床上评估DLBCL 患者预后最重要的指标。近期有研究发现，包括CD138 在内的一系列新型指标进一步从蛋白水平判断了分子亚型在DLBCL患者治疗及生存方面的作用，具有一定的临床指导意义「1-3］。CD138 又称多配体聚糖1，是Syndecans家族成员之一，其余3 位成员分别是Syndecan-2、Syndecan-3、Syndecan-4， 目 前 研 究 最 多 的 是CD138/Syndecan-1。CD138 表达于正常淋巴细胞的不同阶段，主要表达于抗原活化的B 细胞，预示着B 细胞处于向浆细胞方向分化的终末阶段，包括免疫母细胞、浆母细胞和浆细胞。近年来的研究发现，CD138在淋巴瘤中也有表达[4]，甚至在乳腺癌、胃肠道肿瘤等实体肿瘤中也有表达的报道[5-6]。但关于CD138 的实际阳性率及其临床意义并不十分明确，特别是在DLBCL 中有关CD138 表达的研究较少。因此，本研究应用免疫组化（IHC）技术检测了94 例淋巴瘤患者病变组织中CD138 的表达，并对其中的60 例DLBCL患者进行了相关临床生物学及预后分析，以期深入了解CD138 在DLBCL 中的表达特点及临床意义。

1 资料与方法

1.1 基线资料

选取2010 年7 月至2020 年1 月期间苏州大学附属太仓医院收治的淋巴瘤患者94 例作为研究对象，其中DLBCL 患者有60 例。在60 例DLBCL 患者中，有男32 例，女28 例；其年龄为23 ～86 岁，平均年龄为63.5 岁。这些患者的病情均经组织病理学检查、免疫组化分析等得到确诊。淋巴瘤的诊断标准采用2016 年修订的第4 版WHO 淋巴瘤分类标准，淋巴瘤的分期诊断采用2014 年Lugano 会议修订的标准。

1.2 方法

1.2.1 CD138 在淋巴瘤中的表达对94 例淋巴瘤患者进行IHC 检测，以了解CD138 在淋巴瘤中的表达情况，严格按照试剂盒的说明书进行各项检测操作。

1.2.2 CD138 的表达与DLBCL 的关系将60 例DLBCL患者根据CD138 的表达情况分为CD138 阳性组和CD138 阴性组，分析CD138 的表达与患者的年龄、性别、临床分期、淋巴瘤症状分组、IPI 及血液学指标、预后等临床生物学特征的关系。

1.2.3 IHC 实验方法 1）将标本置于防脱载玻片（ZLI-9506）上，石蜡切片3μm。2）72℃烤片1h。3）二甲苯脱蜡2 ～3 缸，10min/ 每缸，梯度酒精100%、100%、95%、75%，2min/ 每缸。4）PBS 清洗5 次，2min/ 次（PBS 中加入1‰的Tween 20）。5）高压修复：高压锅内预热修复液，沸腾后将置于塑料染色架上的玻片放入修复液中，必须完全覆盖组织，待限压阀转动喷气后开始计时2.5min，计时的同时将电磁炉从高火调至中火，计时结束后离开热源，冷水冲凉至室温，注意不要将冷水注入高压锅内。6）PBS 清洗3 ～5 次，2min/每次（PBS 中加入1‰的Tween 20）。7）加入3% 的过氧化氢，室温孵育10min。8）用蒸馏水清洗干净，用PAP 笔画圈（画圈时离组织2 ～3mm）。9）PBS 清洗3 ～5 次，2min/ 次（PBS 中加入1‰的Tween 20）。10）滴加适量一抗，37℃1 h（加一抗时需将切片上的水甩干净，注意不能干片）。11）PBS清洗3 ～5 次，2min/ 次（PBS 中加入1‰的Tween 20）。12）滴加适量的一步法检测系统（PV-8000/6000，37℃ 30min，加二抗时需将切片上的水甩干净，注意不能干片）。13）PBS 清洗3 ～5 次，2min/ 次。14）二管DAB（ZLI-9018）显色，现配现用，6 ～8min，不需镜下控制显色，自来水终止并冲洗3 ～5min。15）苏木素复染，切忌复染颜色过深（根据苏木素的新旧调整复染时间）。16）自来水冲洗。17）盐酸酒精分化（根据苏木素复染的情况灵活掌握时间）。18）根据实际情况，可选用已使用过的EDTA pH8.0 修复液返蓝3 ～5min，流水冲洗3 ～5min。19）逐级梯度酒精脱水，二甲苯透明、中性树胶封片。

1.3 观察指标

观察CD138 在淋巴瘤中的表达情况。观察CD138 的表达与DLBCL 患者临床特征、血液学指标及预后的关系。

1.4 统计学方法

用SPSS 23.0 软件对本研究中的数据进行统计学处理，根据资料的性质分别采用t检验、F检验（包括组与组之间的q检验）和χ² 检验，相关性分析及Kaplan-Meier 生存曲线与log-rank 检验应用Pearson相关分析法，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD138 在淋巴瘤中的表达情况

94 例淋巴瘤患者CD138 的阳性率为25.5%（24/94），其中B 细胞淋巴瘤患者CD138 的阳性率为28.2%（22/78），T 细胞淋巴瘤患者CD138 的阳性率为12.5%（2/16 例）。在94 例淋巴瘤患者中，DLBCL患者CD138 的阳性率为25.0%（15/60），其他B 细胞淋巴瘤患者CD138 的阳性率为38.9%（7/18 例）。在94 例淋巴瘤患者中，DLBCL 患者与其他B 细胞淋巴瘤患者CD138 的阳性率相比，差异无统计学意义（χ²=1.32，P＞0.05）。CD138 在DLBCL 组 织 中 阴性和阳性的表达情况分别见图1 和图2。

图1 CD138 呈阴性表达（×400）

图2 CD138 呈阳性表达（×400）

2.2 CD138 的表达与DLBCL 患者临床特征的关系

CD138 的表达与DLBCL 患者的年龄、性别、临床分期、淋巴瘤症状分组、IPI、是否为GCB 亚型无关（P ＞0.05）。在60 例DLBCL 患者中，CD138 阳性患者的结外病灶多于CD138 阴性患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 CD138 的表达与DLBCL 患者临床特征的关系[例（%）]

2.3 CD138 的表达与DLBCL 患者血液学指标的关系

在60 例DLBCL 患者中，CD138 阳性患者Hb 和ALB 的水平均明显低于CD138 阴性患者，CRP 的水平和RDW-CV 则明显高于CD138 阴性患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；CD138 阳性患者与CD138阴性患者其余各项血液学指标相比则均无统计学意义（P均＞0.05）。详见表2。

表2 CD138 的表达与DLBCL 患者血液学指标的关系（±s）

表2 CD138 的表达与DLBCL 患者血液学指标的关系（±s）

注：Hb 为血红蛋白，RDW-CV 为红细胞体积变异系数，WBC 为白细胞计数，N 为中性粒细胞计数，LY 为淋巴细胞计数，M 为单核细胞计数，PLT为血小板计数，CRP 为C 反应蛋白，ALB 为白蛋白，LDH 为乳酸脱氢酶，β2-MG 为β2- 微球蛋白，CEA 为癌胚抗原，CA125 为糖链抗原125，D-D为D-二聚体；* 代表P ＜0.05，** 代表P ＜0.01，其余均为P ＞0.05。

检测项目 CD138 阳性 CD138 阴性 t 值Hb（g/L） 107.93±16.71 121.38±23.48 2.0202*RDW-CV（%） 15.08±3.55 13.63±1.37 2.3023*WBC（×109/L） 5.93±3.27 6.40±2.27 0.6183 N（×109/L） 4.23±2.71 4.35±2.19 0.1731 LY（×109/L） 1.05±0.44 1.37±0.63 1.8120 M（×109/L） 0.52±0.33 0.53±0.31 0.1062 PLT（×109/L） 266.93±8275 221.16±89.68 1.2228 CRP（mg/L） 53.25±35.37 26.39±17.71 2.9921**ALB（g/L） 34.58±6.27 38.18±5.01 2.2609*LDH（U/L） 309.91±35.31 292.42±57.71 0.3198 β2-MG（mg/L） 3.45±2.09 2.77±1.72 0.3301 CEA（U/L） 2.40±1.56 1.19±1.02 1.0703 CA125（U/mL） 58.30±57.88 50.66±45.99 0.1659 D-D（mg/L） 1.33±0.98 1.45±1.40 0.2385

2.4 CD138 的表达与DLBCL 患者预后的关系

在60 例DLBCL 患者中，CD138 阴性患者的中位生存时间为20.5 个月，明显高于CD138 阳性患者的13.2 个月（P=0.029）。详见图3。

图3 CD138 的表达与DLBCL 患者预后的关系（P=0.029）

3 讨论

既往有关CD138 的研究主要是集中在多发性骨髓瘤等浆细胞疾病的诊断和预后方面，而在DLBCL中的研究鲜有报道，且认为几乎是不表达的[7-9]。但更多的研究证实CD138 在DLBCL 中确实是有表达的，如Tzankow 等[10]报 道CD138 在DLBCL 中 的 阳性率为17%。本研究发现，CD138 在各种B 细胞淋巴瘤中均有不同程度的表达，甚至在个别T 细胞淋巴瘤中也有表达。我们发现CD138 在DLBCL 中的阳性率为25.0%（15/60），略高于张宏伟等[5]报道的15.1%。而郭新建等[11]报道GCB-DLBCL 中CD138的 阳 性 率 为15.1%（8/53）、non-GCB 中CD138 的阳性率为14.2%（7/90）。上述报道中CD138 阳性率的不同可能与IHC 检测技术、阳性值判断标准存在差异有关，也可能与病例数的多少及相关研究文章的时间跨度等有关。但总的说来，DLBCL 中确实有CD138 表达。本研究中我们发现CD138 在DLBCL中的表达仅与患者有无结外部位累及有关，而与其性别、年龄、临床分期、淋巴瘤症状分组、IPI 及是否为GCB 亚型无关。该结果与郭新建等[11]的报道基本一致。在血液学指标方面，本研究中CD138 阳性患者Hb 和ALB 的水平均明显低于阴性患者，而CRP 和RDW-CV 均明显高于CD138 阴性患者。说明CD138 阳性患者机体的炎症反应更为严重。既往的研究证实，炎症状态下CRP 的升高一方面可导致铁调素（Hepcidin）的表达升高，使机体对铁失利用，从而引起贫血，另一方面还可不同程度地损害机体的营养状况，表现为ALB 降低，而ALB 降低又会影响Hb的水平，导致患者预后不良[12-15]。虽然早期有研究认为CD138 的表达对DLBCL 患者预后的预测意义不大[5]，但更多的研究证实CD138 是DLBCL 患者预后的独立预测因子[4,16]。张素芳等[6]对83 例DLBCL 患者进行研究发现，CD138 阴性是患者预后良好的独立保护因素。郭新建等[11]报道指出，DLBCL 患者表达CD138 是导致其生存期缩短的危险因子（OR=1.399，95%CI 为1.022 ～1.914，P＜0.05）。本研究的结果表明，CD138 阳性患者的预后较CD138 阴性患者差（二者的中位生存时间分别为13.2 个月和20.5 个月，P＜0.05）。另外我们还发现CD138 在GCB 亚型与非GCB 亚型患者中均有表达，且无明显区别，这与相关文献[11]报道的结果相一致。

由于本研究为单中心研究，且病例数偏少，时间跨度较长，因此研究结果可能存在一定程度的偏倚，但部分DLBCL 患者确实表达CD138，且CD138 的表达与DLBCL 患者的预后有关。因此今后值得进一步扩大病例数、改进检测技术，以期进一步明确CD138在DLBCL 中的确切表达情况及临床意义，从而更好地指导临床治疗。