张永欣,杨 燚,崔红军,刘冠星,苏建东
(天津瑞普生物技术股份有限公司,天津 300308)
为了确定Ⅰ型鸭病毒性肝炎卵黄抗体的最小预防剂量,将2批Ⅰ型鸭病毒性肝炎卵黄抗体以不同剂量注射不同日龄健康易感雏鸭,通过攻毒保护试验来确定卵黄抗体最小预防剂量,现将试验结果报道如下。
1、4、5、7日龄健康易感雏鸭各100只,由卵黄抗体中和效价检测阴性的种蛋孵化。
试验鸭用饲料购自北京荣达兴饲料技术有限公司。
Ⅰ型鸭病毒性肝炎卵黄抗体(批号为201801和201802),卵黄抗体中和效价分别为1∶298、1∶286,由天津瑞普生物技术股份有限公司制备。
Ⅰ型鸭肝炎病毒RP-Z 株,由天津瑞普生物技术股份有限公司制备。
1 mL、5 mL 注射器,购自上海治宇医疗器械有限公司。
用生理盐水将201801 批和201802 批卵黄抗体中和效价稀释为1∶256,取1 日龄和4 日龄健康易感雏鸭各100 只,注射卵黄抗体,剂量分别为0.1、0.3、0.5、1.0 mL·只-1,每个批次每个剂量注射不同日龄健康易感雏鸭10 只,为试验抗体组。同时另设同批不同日龄健康雏鸭各10 只作为攻毒对照,10只作为健康对照。注射抗体后24 h,攻毒对照组鸭和试验抗体组鸭各肌肉注射RP-Z 株强毒0.2 mL(含100 LD50)。各组鸭同条件下隔离饲养观察10 d,记录结果。试验分组及攻毒情况见表1。
表1 1日龄和4日龄雏鸭分组及攻毒情况
用生理盐水将201801 批和201802 批卵黄抗体中和效价稀释为1∶256,取5 日龄和7 日龄健康易感雏鸭各100 只,注射卵黄抗体,剂量分别为0.3、0.5、1.0、1.5 mL·只-1,每个批次每个剂量注射不同日龄健康易感雏鸭10 只,为试验抗体组。同时另设同批不同日龄健康雏鸭各10 只作为攻毒对照,10 只作为健康对照。注射抗体后24 h,攻毒对照组鸭和试验抗体组鸭各肌肉注射RP-Z株强毒0.2 mL(含100 LD50)。各组鸭同条件下隔离饲养观察10 d并记录结果。试验分组攻毒情况见表2。
表2 5日龄和7日龄雏鸭分组及攻毒情况
1日龄和4日龄雏鸭攻毒试验结果见表3。
表3 1日龄和4日龄雏鸭不同剂量抗体攻毒保护试验结果
由表3可知,2批卵黄抗体注射1日龄、4日龄健康易感雏鸭后,注射0.1 mL 时,攻毒保护率为30%~50%;注射0.3 mL 时,攻毒保护率为80%~90%;注射0.5 和1.0 mL 时,攻毒保护率为100%;攻毒对照组死亡率为100%;健康对照组100%健活。
5 日龄和7 日龄雏鸭攻毒试验结果见表4。由表4可知,2批卵黄抗体注射5日龄和7日龄健康易感雏鸭,注射0.3 mL 时,攻毒保护率为50%~70%;注射0.5 mL 时,攻毒保护率为80%~90%;注射1.0和1.5 mL时,攻毒保护率为100%;攻毒对照组死亡率为90%~100%;健康对照组100%健活。
综合分析表3 和表4 结果得出,卵黄抗体注射1、4、5、7日龄健康易感雏鸭,1日龄和4日龄雏鸭注射量≥0.3 mL时,攻毒保护率≥80%。5日龄和7日龄雏鸭注射量≥0.5 mL时,攻毒保护率≥80%。
表4 5日龄和7日龄雏鸭不同剂量抗体攻毒保护试验结果
以攻毒保护率达到80%作为判定标准,Ⅰ型鸭肝炎病毒卵黄抗体对1日龄和4日龄鸭的最小预防剂量为0.3 mL·只-1,对5 日龄和7 日龄鸭的最小预防剂量为0.5 mL·只-1。
为了确保本制品临床使用效果,5日龄以下雏鸭临床紧急预防使用剂量确定为0.5 mL·只-1,5日龄及以上确定为1.0 mL·只-1。