盐酸小檗碱肠溶缓释片制剂工艺研究

林青薇，钟华林，李沛波，吴灏，彭维，苏薇薇，程春雷，王永刚*

(1.中山大学生命科学学院，广东省中药上市后质量与药效再评价工程技术研究中心/广东省热带亚热带植物资源重点实验室，广东 广州 510275；2.山东省食品药品检验研究院，山东 济南 250101)

小檗碱是从小檗科、芸香科等植物中提取的异喹啉类原小檗碱型生物碱，临床常用其盐酸盐，盐酸小檗碱片为一种甲类非处方药有广泛的应用。盐酸小檗碱在抗癌抗肿瘤[1-2]、抗炎抗氧化[3-6]、代谢调节[7-10]、肝肾保护[11-14]、心脑保护[15-18]等方面有相当的应用潜力，其不良的味觉体验以及一天3次的服药模式会影响患者依从性和临床应用。基于减少副作用、减少服药次数、提高味觉体验等目的，结合羟丙甲纤维素骨架缓释技术与肠溶包衣技术，研制了一种盐酸小檗碱肠溶缓释片。

1 试药与仪器

1.1 试药 乙醇(广州化学试剂厂，分析纯)；乙腈(Honeywell，色谱纯)；磷酸二氢钾(天津市北联精细化学品开发有限公司，分析纯)；氢氧化钠(西陇化工股份有限公司，分析纯)；羟丙甲纤维素K4M(卡乐康)；无水乳糖(镇江市康富生物工程有限公司)；微晶纤维素(安徽山河药用辅料有限公司)；聚维酮K30(安徽山河药用辅料有限公司)；硬脂酸镁(湖州市菱湖新望化学有限公司)；Eudragit L100-55(德国)，柠檬酸三乙酯(Morimura Bros.,Inc)，滑石粉(湖州展望药业有限公司)。

1.2 仪器 万分之一电子分析天平(ME204，瑞士Mettler Toledo公司)；十万分之一电子分析天平(MS105US，瑞士Mettler Toledo公司)；数控超声波清洗器(KQ500DE，昆山市超声仪器有限公司)；紫外分光光度计(Cary 60 UV-Vis，美国 Agilent公司)。单冲压片机(DP30，北京国药龙立科技有限公司)；多功能流化床(WBF-1G，重庆英格造粒包衣技术有限公司)。

2 方法与结果

2.1 片芯累积释放度测定 先采用紫外分光光度法测定盐酸小檗碱肠溶缓释片的含量，具体方法按药典指导原则经方法学验证，在此不赘述。再取盐酸小檗碱缓释片，照溶出度与释放度测定法(通则0931 第一法)，以水1 000 mL为释放介质，转速为120 r·min-1，在取样时间点取5 mL溶液滤过并补充对应释放介质，精密量取续滤液2 mL于50 mL量瓶，加水至刻度，摇匀，以水为空白，按紫外-可见分光光度法(通则0401)，在263 nm波长处测定吸光度。计算累积释放度，绘制释放度曲线。

2.2 肠溶缓释片累积释放度测定 酸中溶出量：取盐酸小檗碱缓释片，照溶出度与释放度测定法(通则0931 第一法)，以0.1 mol·L-1盐酸溶液750 mL为释放介质，转速为120 r·min-1，2 h后在规定取样点吸取溶出液适量，滤过，以相应介质为空白，按紫外-可见分光光度法(通则0401)，在263 nm波长处测定吸光度，计算每片的酸中溶出量。

缓冲液中溶出量：弃去上述各溶出杯中酸液，加入1 000 mL磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(pH 6.8)为释放介质，转速为120 r·min-1，依法操作，在取样时间点取5 mL溶液滤过并补充对应释放介质，精密量取续滤液2 mL于50 mL量瓶，加相应介质至刻度，摇匀，以相应介质为空白，按紫外-可见分光光度法(通则0401)，在263 nm波长处测定吸光度。计算累积释放度，绘制释放度曲线。

2.3 单因素试验考察缓释片辅料的选择

2.3.1 润滑剂及填充剂的选择 选择缓释片常用的乳糖与微晶纤维素作为填充剂，硬脂酸镁为润滑剂，进行压片。

2.3.2 缓释材料的筛选 按处方比例称取原辅料，分别加入羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素K15M、海藻酸钠为缓释材料，或不加缓释材料，混匀，制粒，压片。测定1、2、4、6、8 h的累积释放度，绘制释放度曲线。结果以羟丙甲纤维素为缓释材料释放效果最好(见图1)，故选择羟丙甲纤维素为缓释材料。

图1 不同缓释材料的盐酸小檗碱缓释片释放度曲线

2.3.3 黏合剂的选择 按处方比例称取原辅料，分别以乙醇、10%聚维酮K30乙醇溶液为黏合剂制粒，压片。结果以乙醇为黏合剂，制得颗粒细粉多，流动性差，不利于压片。以10%聚维酮K30乙醇溶液为黏合剂，制得颗粒粒度均匀，流动性好，故选择10%聚维酮K30乙醇溶液为黏合剂。

2.3.4 羟丙甲纤维素黏度对药物释放的影响 按处方比例称取原辅料，分别加入羟丙甲纤维素K4M、羟丙甲纤维素K15M为缓释材料，混匀，制粒，压片。测定1、2、4、6、8、12 h的累积释放度，绘制释放度曲线，以羟丙甲纤维素K4M为缓释材料的盐酸小檗碱缓释片在12 h内具有更好的释放度(见图2)，故选择羟丙甲纤维素K4M为缓释材料。

图2 含有不同黏度羟丙甲纤维素的盐酸小檗碱缓释片释放度曲线

2.3.5 羟丙甲纤维素用量对药物释放的影响 按处方比例称取原辅料，分别加入10%羟丙甲纤维素K4M、20%羟丙甲纤维素K4M作为缓释材料，混匀，制粒，压片。测定各处方盐酸小檗碱缓释片在1、2、4、6、8、12 h的累积释放度，绘制释放度曲线。当羟丙甲纤维素K4M用量为10%时盐酸小檗碱缓释片在12 h内具有更好的释放度(见图3)。

图3 不同羟丙甲纤维素用量的盐酸小檗碱缓释片释放度曲线

2.3.6 填充剂用量对药物释放的影响 按处方比例称取原辅料，分别加入20%、25%、30%乳糖混匀，制粒，压片。测定1、2、4、6、8、12 h的累积释放度，绘制释放度曲线。当乳糖用量为25%时，盐酸小檗碱缓释片在12 h内具有较好的释放度(见图4)。

图4 不同填充剂用量的盐酸小檗碱缓释片释放度曲线

2.3.7 压片压力对药物释放的影响 按处方比例称取原辅料，混匀，制粒，压成不同硬度的片剂。测定不同硬度盐酸小檗碱缓释片在1、2、4、6、8、12 h的累积释放度，绘制释放度曲线。不同硬度的盐酸小檗碱缓释片在12 h内释放度基本无差异，压片压力基本不影响盐酸小檗碱缓释片的释放(见图5)。

图5 不同硬度盐酸小檗碱缓释片释放度曲线

2.4 正交试验考察缓释片辅料的选择 在单因素试验基础上，以羟丙甲纤维素K4M、乳糖、聚维酮K30的用量为考察因素，采用L9(34)正交表，以2、6、12 h的累积释放度为指标，进行3因素3水平正交试验，因素水平表见表1。

表1 因素水平设计(%)

称取盐酸小檗碱(重量比50%)，按L9(34)正交表及因素水平表称取羟丙甲纤维素K4M、乳糖，片重600 mg，以微晶纤维素补足重量，混匀，分别按L9(34)正交表及因素水平表以聚维酮K30乙醇溶液为黏合剂制软材，制粒，干燥，整粒后，加入1%硬脂酸镁，压片。

按“2.2”项下方法，对各处方盐酸小檗碱缓释片的释放度进行测定，采用综合评分法，对各处方结果计算S值，S=|Q2h-25|+|Q6h-55|+|Q12h-95|(Q2h：2h累积释放度；Q6 h：6 h累积释放度；Q12 h：12 h累积释放度)，评分值低者为优，结果见表2。方差分析结果见表3。直观分析显示，优选处方为A2B2C1。但是实际操作中C1水平聚维酮K30用量少，制得颗粒细粉多，不利于压片。正交试验结果显示，C1水平与C2水平评分接近，且方差分析显示，羟丙甲纤维素K4M用量(A)具有显著意义(P<0.05)，乳糖用量(B)、聚维酮K30用量(C)没有显著差异，故最后确定以A2B2C2作为最终处方，即羟丙甲纤维素用量为10%，乳糖用量为25%，聚维酮K30用量为3%。

表2 正交试验结果

表3 正交试验方差分析

2.5 工艺的均一性与重现性

2.5.1 工艺均一性试验 按优选工艺制粒，压片。测定同批6片盐酸小檗碱缓释片各在1、2、4、6、8、12 h的累积释放度，绘制释放度曲线。同一批样品释放度差异小，工艺均一性良好(见图6)。

图6 各样品释放度曲线

2.5.2 工艺重现性试验 按优选工艺连续制备3批盐酸小檗碱缓释片(批号：20200507、20200525、20200526)。测定各批次盐酸小檗碱缓释片在1、2、4、6、8、12 h的累积释放度，绘制释放度曲线，结果见图7。批次间释放度差异小，工艺重现性良好。

图7 各批次盐酸小檗碱缓释片释放度曲线

2.5.3 释药模型的拟合 将盐酸小檗碱缓释片(批号：20190925)释放度数据分别用一级方程、Higuchi方程、零级方程进行拟合。结果见表4，Mt为时间为t时的累积释放量；M∞为时间为∞时的累积释放量；Mt/M∞为时间为t时的累积释放率。计算拟合结果、相关系数(r)及均方误差(MSE)，释放度数据用Higuchi方程拟合结果r最大且MSE最小，认为其释放符合Higuchi模型。

表4 盐酸小檗碱缓释片释药模型拟合

2.6 包衣工艺 以欧巴代薄膜包衣预混剂(胃溶型)为隔离层包衣材料，隔离层包衣增重5%～8%；以尤特奇L100-55为肠溶材料，柠檬酸三乙酯为增塑剂，滑石粉为抗粘剂配制包衣液，肠溶包衣增重4%～6%。测定盐酸小檗碱肠溶缓释片的酸溶出量与缓冲液中累积释放度，绘制释放度曲线。酸溶出量低于检测限，符合肠溶制剂酸溶出量要求。包衣后肠溶缓释片释放度曲线符合Higuchi方程，Mt/M∞=0.320 6 t1/2-0.148 6，r=0.996 9。

3 讨论

由于缓释材料会影响盐酸小檗碱在水中的释放，盐酸小檗碱肠溶缓释片的含量测定使用乙醇为提取溶剂。建立了一个盐酸小檗碱缓释片的处方，该处方以羟丙甲纤维素K4M为缓释材料，乳糖、微晶纤维素为填充剂，聚维酮K30为黏合剂，硬脂酸镁为润滑剂。片重600 mg，每片含盐酸小檗碱300 mg。该处方能在12 h内稳定、持续释药，其工艺均一性及重现性良好，释药模型拟合符合Higuchi模型。

盐酸小檗碱缓释片在介质中完全释放时，理论浓度为0.3 mg，以磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(pH 6.8)为释放介质时，试验满足漏槽条件，以磷酸钠-盐酸缓冲液(pH 6.8)为释放介质时，则不满足漏槽条件，故选用磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(pH 6.8)为释放介质。

肠溶包衣虽能阻止盐酸小檗碱在酸液中的释放，但是酸液水分进入片芯后会影响其后续缓释性能，因此在进行肠溶包衣前需进行隔离层包衣，包肠衣后，释药模型拟合仍符合Higuchi模型。制成肠溶缓释片后，可以减少对胃的副作用、减少服药次数、提高味觉体验等。常规片盐酸小檗碱的生物利度较低，后续将其在该肠溶缓释片的生物利度进一步研究。