法医毒物检验中毒物的快速筛查与检测

周伟

摘要：社会生物体出现损害或变异物质而产生较小剂量的外源物质，称为中毒。目前，中毒和毒品类的事故比例明显上升，其中不良事故所牵涉的物质问题更加广泛，而通过法医对毒品的快速筛查和检验也是目前中国毒品检测项目的核心内容，对其追查的速度和准确率也提出了更高的要求。

关键词：法医;中毒物;检验;筛查

随着临床中毒物种类的复杂多样，目前主要以碱性药物、酸性药物及常见的农药物为主要筛查内容，进而采取准确性和速度时效性更高的筛查技术【1】，现阶段，固相萃取-色谱与质谱联合检测法、免疫检测法以及常见未知物筛查法均属于当前毒物检验的常见手段【2】，本文将针对以上三种方法进行深入的研究分析，为检验学的发展提供借鉴意义。

1.不同毒物的筛查方式

1.1碱性药物

临床调查显示，碱性药物是毒物出现的重要影响因素。通常，碱性药物中存在的羟基和氨基会与一般固相萃取柱或硅胶基质中的化学键，与填充物的固定位相发生相互作用，從而产生了难以脱离和吸附或保留的现象。随着人们对碱性药物萃取工艺的深入研究，在过去以阳离子交换柱又或者反相柱或固相萃取柱都可高效提取碱性药物，例如：HLB或C十八的提取方法，而且操作简便，有较大的回收率;在对碱性药物的固体提取时，要着重于适宜的PH值，而相同类药物则可保证较高的疏水性，有利于后期的回收。

1.2酸性药物

处于强酸条件下的游离状态药品属强酸药品，与此同时，碱式制剂则易溶于有机溶剂但却不能溶于水中。如巴比妥类和斑蝥素等受碱性环境的影响，使之形成钠盐而可溶于水中。当对碱式制剂进行固相浓度提取之后，就必须尽可能的调节PH值进而防止化合物带电荷;然后通过固相浓度提取、液相色谱-质谱法对饲料中的巴比妥制剂给予测定，具体过程是：首先通过三氯甲烷以进行饲料的提取，通过氮以将提取溶液予以吹净，使用磷酸盐缓冲液以给予残渣溶液进行溶解，最后通过百分之二的高浓度甲醇溶液以顺序淋洗，并进行空气抽干和通过二氯甲烷给予洗脱;实验数据显示，巴比妥药物的溶液浓度值处于0.010至0.200μg/mL区间，具有良好的线性，其中，最小的定量限值为50μg/kg，且RSD低于8.5%。

1.3农药（杀虫剂）

中国属于杀虫剂应用与制造的国家，其中对于杀虫剂的产品的品种相当多且产量相当大，有关研究统计表明，有机磷杀虫剂的种类超过400种;与此同时，杀虫剂也属于我国食物中毒案件发生率的主要影响因素，由于杀虫剂品种产量的多样化，其生化特性和杀虫剂的构造特性显得越来越复杂，所以，针对其环保、农残和食用等领域，因此，分析我国常见农药类别的检验和筛查属于法医领域研究的重要内容，

2.中毒物的快速筛查技术与方式

2.1固相萃取-色谱与质谱联合检测法

随着毒物筛查技术的不断提高，固相萃取属于常见的样品前处理技术的其中一种，其主要目的是将生物样品进行分离和富集，比如说：将生物检材内的目标待检测物品与杂质进行组分分离操作，进而取得更高的回收率，并且容易操作，处理流程比较快;在法庭的科学领域，可通过生物检材的特征，选取相对应的固相萃取方式，与此同时，根据目标待检验物品的酸碱性，来确定适合的固相萃取方式。

色谱法也适用于微生物的分离与分析。主要是通过将物质分类并在不同的环境条件下实现相态的选择性分配，使混合物中的各个部分根据其特性的差异而给予隔离。色谱法中对样品萃取、净化和浓缩过程的待处理要求也更为严苛，由此来防止了在筛查过程中出现基质干扰和伪阳性的问题，而且，由于色谱分析法柱中对目标物质的隔离还需要相当的时间，因而，以上流程也无法达到快速检测的要求。

上述二个方法加以结合，可把二个检测方法的优势加以整合，克服缺陷性，从而实现了对复杂基体中的特殊毒物和非特殊毒物得到更高效的萃取、净化以及检验，节省检材的消耗，时效快且具有较高的灵敏度，更适用于法医对于中毒物的筛查。

2.2免疫检测法

免疫学法中的放射免疫法、酶联免疫学分析、免疫胶体以及荧光偏振免疫的分析法属于法医检验毒物的常用方式。

RIA法具有特异性强、便携性、敏感度高和节约检材的优势，对生物碱吗啡、苯妥英钠、庆大霉素、氯丙臻等药的测查也有着积极效果，其对血浆中生物碱吗啡的测定限可处于0.3ng/mL。但在此过程中，会出现交叉反应或伪阳性结构，如果对组织样本不能进行科学处理，其未被灭活的可降解蛋白质、盐，以及pH值都会对测定结果正确程度产生一定的负面影响，同时受放射性元素的影响，在实验者的体内也会产生相应的生物危害性，从而逐步被荧光免疫分析法所取代。

荧光免疫分析法，主要是利用荧光基团可以代替辐射性同位素为标志物质的研究方法，它可以进行多次应用，而且敏感性高度、特异性也和色谱分析的方法比较相似，进而有效进行自动化的筛选方式。上述所有方法的研究，都广泛适用小分子结构的物质测定。

免疫胶体金科技主要指使用胶质金进行标识，并运用在与抗原抗体反映的免疫学标记技术上，由于容易使用而且检测速度快，因此更有利于现场的实际操作;现阶段，法医毒品研究实验室所使用的巴比妥、氯胺酮、苯环己哌啶、可卡因和对甲苯二氮卓等精神类药物快速检测的仪器盒，均使用了免疫胶体金工艺，其检出浓度约为200至3000ng/mL;但与此同时，用在免疫技术的仪器盒和仪器检出精度低下更适用于毒物的初筛。

2.3常见的未知物筛查法

法医在对毒品的检验工作中常会对一般未知物质和多目标物质进行筛选。其中，多目标物质主要是指社会上频繁应用且滥用的中毒品，因此对数据的处理说明也比较简洁;但它仅仅属于毒物的一小部分，而无法解决对大批尚未被高频应用的毒物筛选需求。所以高分辨率质谱科技的存在，就可以实现对物质的精确测量，对大批尚未被高频应用的毒物筛选进行参考。针对常用的不明毒物可以在高分辨率质谱技术的前提下，将不明毒物予以识别，但在实践中会生成巨量的复杂数据，因此必须通过更高级化的软件简化过程并在谱库内进行查询，将与其相匹配的物质进行报告说明。

3、结束语

法医毒物的包含种类和检材种类繁多，而随着新毒物的不断出现，需要进行快速且针对性较高的筛查【3】，满足实际检验的需求;而对于固相萃取-色谱与质谱联合检测法、免疫检测法以及常见未知物筛查法等方式进行不断的优化和提高，可以提出检验技术的新手段【4】，有助于法医毒物检验工作的顺利进行。

参考文献：

[1] 闵涛. 法医毒物分析中LC-MS/MS定性分析结果的判定指标研究[D]. 山西：山西医科大学，2018.

[2] 李健. 佐匹克隆的法医毒物动力学研究和组织病理学观察[D]. 河南：河南科技大学，2019.

[3] 袁桂艳. 急性农药中毒检测和百草枯中毒代谢组学及其肺损伤药物干预研究[D]. 山东：山东大学，2021.

[4] 王乐乐. 地西泮中毒标志物的法医毒物动力学研究[D]. 山西：山西医科大学，2020.