急性髓系白血病患者血浆IL-10水平的变化与意义研究＊

文/王玉芳，齐福，王朝喆，孙瑞婧, 王静，王希娣

白细胞介素 10 (IL-10) 是一种多效性细胞因子，主要由2型辅助细胞 (Th2)，单核细胞和巨噬细胞，以及正常和恶性B淋巴细胞产生。 IL-10可以通过抑制 Th1型细胞因子而发挥免疫抑制作用，包括干扰素-γ和白细胞介素-2。因此，作为免疫紊乱的急性髓系白血病，与免疫功能密切相关的IL-10表达水平可能发生病理性改变。我们针对文献关于白血病与IL-10水平关系报道的异质性，选择了部分急性髓系白血病患者进行了治疗前后的血浆水平检测，以便进一步明确IL-10的变化特点。

1 材料方法

1.1 研究对象

按照国际上统一的FAB诊断标准，选择门诊或住院急性髓系白血病患者35例，并作为检测和研究的对象。35例类AML患者，男18例，女17例，年龄21-61岁。25例健康查体者为正常对照组，男14例，女11例，年龄27-58岁。根据临床诊断和疗效标准，判断治疗效果。标本收集均按照两个医院的医学伦理规定进行。

1.2 样本处理

抽取患者或正常健康查体人群的外周血5-6ml，室温放置15分钟，自凝后，2000rp离心20分钟，分离血清后，-20℃冰箱保存。标准曲线：IL-10的标准曲线浓度分别为320 pg/ml, 160 pg/ml, 80 pg/ml，40 pg/ml，20 pg/ml，10 pg/ml，0 pg/ml。

1.3 ELISA检测

按照试剂盒说明书，在96孔酶标板上加入样品稀释液稀释5倍的样品50 μl。轻轻摇动，充分混匀。同时设置空白对照孔。待用封板膜封板后，放在保湿盒中，放置37℃恒温箱中，进行30分钟的温育。依次经过洗涤3次后，拍手。每个实验孔中加入酶标试剂50 μl。按照上述温育方法进行30分钟温育。温育后，同法进行3次洗涤。结果显色：每孔依次加入入显色剂A 50 μl，再加入显色剂B 50 μl，在 37℃条件下，避光显色，定时右眼观察，约15分钟时，加入终止液50 μl。最后用空白空调零，450 nm波长下测量各孔吸光度。其中，浓度检测高于标准上限时，继续稀释后再做检测。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 白血病患者血浆IL-10水平的变化

检测结果表明，正常对照组的血清 IL-10水平为(26.99±17.17) pg/ml, 初发急性髓系白血病的血清 IL-10水平为(77.20±63.27) pg/ml，经过统计学差异分析，初发白血病患者组的血清 IL-10水平明显高于正常健康人对照组的血清 IL-10水平，t=2.996,P=0.0096, 差异具有统计学意义（图1）。

图1 正常对照组和初发急性髓系白血病的血清 lL-10水

2.2 白血病患者治疗前后血浆IL-10水平的变化

选择一组化疗后完全缓解组的白血病患者，对缓解前后的血清 IL-10水平进行了对比性检测，结果表明治疗前白血病患者的血清IL-10水平为(73.73±29.67) pg/ml, 完全缓解时病的血清 IL-10水平为(50.76±11.38) pg/ml，经过统计学差异分析，治疗前白血病患者组的血清 IL-10水平明显高于完全缓解组的血清 IL-10水平，t=2.489,P=0.0271, 差异具有统计学意义（图2）。骨髓移植治疗前和取得完全缓解后的白血病患者血清IL-10水平分别为(88.45±76.06) pg/ml和(60.92±23.73) pg/ml，经过统计学差异分析，移植前白血病患者组的血清 IL-10水平明显高于移植后完全缓解组的血清 IL-10水平，t=2.099,P=0.0438, 差异具有统计学意义（图3）。

图2 治疗前与完全缓解组急性髓系白血病的血清 lL-10水平变化（pg/ml）（*，P＜0.05）

图3 骨髓移植前后急性髓系白血病的血清 lL-10水平变化（pg/ml）（*，P＜0.05）

3 讨论

白细胞介素 10 (IL-10) 是一种多效性细胞因子，主要由2型辅助细胞 (Th2)，单核细胞和巨噬细胞，以及正常和恶性B淋巴细胞产生。IL-10是细胞因子家族的创始成员，还包括 IL-19、IL-20、IL-22、IL-24、IL-26、IL-28A、IL-28B 和 IL-29。无论是在动物模型和人体研究，发现IL-10参与许多疾病的发生与发展过程。然而，尽管 IL-10 生物学取得了相当大的进展，许多悬而未决的问题仍然存在。主要的原因之一是IL-10 产生的细胞比较广泛，对IL-10 反应的细胞种类较多，其介导的免疫反应往往取决于不同疾病、不同组织环境。在该领域的研究方面，需要更深入的了解IL-10 生物学的地位，特别是控制 IL-10 产生和作用的分子机制，以及这种细胞因子在不同情况下可能发挥的具体作用。

IL-10可以通过抑制 Th1型细胞因子而发挥免疫抑制作用，包括干扰素-γ和白细胞介素-2。IL-10对细胞具有比较广泛的活性。IL-10 可显著抑制人单核细胞诱导产生的 IL-1α等细胞因子，由于其对上述细胞因子合成的抑制作用，IL-10 可能是一种具有免疫功能的负调控因子。但是，其在血液系统恶性肿瘤中的变化和意义仍然在不断地明确过程中。因此，作为免疫紊乱的急性髓系白血病患者，与免疫功能密切相关的IL-10表达水平变化值得进一步研究。我们针对文献关于白血病与IL-10水平关系报道的异质性，选择了部分急性髓系白血病患者进行了治疗前后的血浆水平检测，以便进一步明确IL-10的变化特点。结果表明，初发白血病患者组的血清 IL-10水平明显高于正常健康人对照组的血清 IL-10水平, 差异具有统计学意义。同时发现治疗前白血病患者组的血清 IL-10水平明显高于完全缓解组的血清 IL-10水平。移植前白血病患者组的血清 IL-10水平明显高于移植后完全缓解组的血清 IL-10水平。结果表明白血病患者血清IL-10水平降低与白血病的发生和病期有关，其血清水平的恢复可以作为病情检测的生物学指标。