雅安地区健康成人网织红细胞参数参考区间的建立及验证*

陈 涛，黄 滔，付立芳，郑 悦，李晓芳，杜顺锦，何 霞△

雅安市人民医院：1.检验科；2.体检中心，四川雅安 625000

随着全自动血细胞分析仪的快速发展，血常规中一些新颖参数，如网织红细胞(Ret)相关参数Ret绝对值(Ret#)、Ret百分比(Ret%)、Ret血红蛋白含量(RET-He)、高荧光强度Ret比率(HFR)、中荧光强度Ret比率(MFR)、低荧光强度Ret比率(LFR)、未成熟Ret比率(IRF)的检测和应用也日渐广泛。Ret是一种骨髓新释放的尚未完全成熟的红细胞，单位体积血液中Ret的数量可以评估骨髓红细胞的生成情况，有助于分析贫血的发病机制[1]。目前，中国地区可见Ret参考范围的研究多为单一区域研究，如韩启福等[2]和胡卫红等[3]的研究，多数医院参考区间来源于《全国临床检验操作规程》、仪器厂家说明书、教科书、试剂厂家说明书等[4]。雅安属中国西南地区的中小城市，目前鲜见该地区的Ret参考区间的研究，因此，笔者根据美国临床实验室标准协会C28-A3文件标准[5]，利用Sysmex XN-1000全自动血细胞分析仪对2 785例健康成人进行Ret计数及分群测定，探讨Ret参数与年龄、性别的关系，初步建立雅安地区健康成人Ret相关参数的参考区间，以期为Ret在雅安地区的临床应用提供准确的实验依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年9月至2020年9月雅安市人民医院健康体检者作为研究对象。纳入标准：(1)长期生活于四川省雅安市；(2)白细胞计数(WBC)(3.5～9.5)×109/L ；(3)男性血红蛋白(Hb)>120 g/L，女性Hb>110 g/L；(4)体质量指数(BMI)≤24.0 kg/m2[6-8]。排除标准：(1)有肿瘤、血液病病史；(2)有吸烟、酗酒史；(3)女性在月经期及妊娠期内。最终符合条件的研究对象共2 785例，男1 561例，年龄21～91岁，女1 224例，年龄21～87岁。男女各分成3个年龄组，分别是>20～40岁组、>40～60岁组、>60岁组。

1.2仪器与试剂 Sysmex XN-1000全自动血细胞分析仪及配套试剂，仪器定期接受校准，本研究中涉及所有参数常年参加Sysmex全球在线质控，成绩良好。

1.3标本采集和检测 采集受试者空腹静脉血液2.0 mL，用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝。检测Ret 7项参数(Ret#、Ret%、Ret-He、HFR、MFR、LFR、IRF)。从采样到检测2 h内完成。

2 结 果

2.1各年龄组间Ret参数的比较 不同年龄组间7项Ret参数比较，除Ret%和Ret-He差异无统计学意义外，其余参数比较差异均有统计学意义(P<0.01)。随着年龄增长，Ret#、LFR降低，IRF、MFR、HFR增高(P<0.01)，其中Ret#的差异主要表现在>20～40岁组与>60岁组及>40～60岁组与>60岁组之间，其余参数的差异主要表现在>20～40岁组与>40～60岁组及>20～40岁组与>60岁组之间。分别比较成年男女不同年龄的Ret相关参数发现，随年龄变化，Ret#的变化主要体现在成年男性中，其随年龄增加而升高(P<0.01)。LFR、IRF、MFR、HFR的差异主要体现在成年女性中，LFR随年龄增加而降低(P<0.01)，IRF、、MFR、HFR随年龄增加而升高(P<0.01)。见表1～3。

表1 不同年龄组成人7项Ret参数比较[M(P25，P75)]

表2 不同年龄组成年男性7项Ret参数比较[M(P25，P75)]

表3 不同年龄组成年女性7项Ret参数比较[M(P25，P75)]

2.2各年龄组不同性别成人Ret各参数的比较 在>20～40岁组和>40～60岁组中，男女间均表现为除Ret%差异无统计学意义外，其余参数比较差异均有统计学意义(P<0.05)；其中，LFR为男性小于女性(P<0.01)，Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He均表现为男性大于女性(P<0.01)。在>60岁组中，则表现为男女间仅Ret-He参数男性大于女性(P<0.01)，其余参数差异均无统计学意义(P<0.05)。见表4～6。

表4 ＞20～40岁不同性别成人Ret参数比较[M(P25，P75)]

表5 ＞40～60岁不同性别成人Ret参数比较[M(P25，P75)]

表6 ＞60岁不同性别成人Ret参数比较[M(P25，P75)]

2.4参考区间的验证 选择2020年5月5-15日来本院健康体检者血常规标本40份，其中男20例，女20例,对上述参考范围进行验证，检测结果全部落在所建立的参考区间范围内，验证通过。

3 讨 论

Ret相关参数对多种疾病的诊断、治疗具有重要价值，包括评估肿瘤化疗患者骨髓抑制和恢复情况、癌症儿童缺铁状况、孕妇缺铁状况、炎症性肠病儿童缺铁情况、透析患者铁代谢情况等[9-16]；尤其对贫血的鉴别诊断具有重要价值[17-19]；此外，Ret相关参数可监测骨髓移植后的造血功能[20]。

但多项研究结果显示，不同地区人群由于地理环境、生活方式等差异，Ret相关参数存在较大差异[21-26]，目前中国南方健康成人的Ret相关参数参考区间鲜有报道。本研究对雅安地区健康成人的Ret相关参数进行研究发现，Ret参数在不同年龄组之间存在差异，其中Ret#的差异主要体现在>20～40岁组、40～60岁组和>60岁组的男性之间，成年男性Ret#随年龄增加而降低，考虑主要与老年男性雄激素的部分缺乏引起促红细胞生成素分泌减少有关。而IRF、MFR、HFR的差异主要体现在>20～40岁组女性低于>40～60岁组和>60岁组的女性，相反，LFR表现为>20～40岁女性高于>40～60岁组和>60岁组的女性，考虑与女性月经、内分泌因素有关。但此结果与李小龙等[27]的研究结果恰好相反，考虑可能因地域和研究人群不同引起。

对同一年龄组不同性别之间的Ret相关参数分析发现，>20～40岁组和>40～60岁组的Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He和LFR存在性别差异，其中Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He表现为男性高于女性，LFR表现为男性低于女性，这与成年男性RBC和Hb参考范围均高于女性是一致的，且与乐家新等[28]的研究结论也相同。考虑可能与在这个年龄段，男性雄性激素水平较高，而睾酮有促进红细胞生成作用有关[29]，且男性运动量普遍大于女性，而运动能刺激骨髓造血功能增生活跃，从而促进RBC更新代谢[30]，而MFR、HFR、IRF正是反映机体RBC生成的灵敏指标，其值越高，说明RBC代谢越旺盛。>60岁组中，Ret相关参数仅表现为Ret-He男性大于女性(P<0.000 1)，其余Ret相关参数则表现为在性别之间差异无统计学意义(P>0.05)，这可能是因为随男女性步入老年以后内分泌生理因素、运动量在性别间的差异逐渐减小，因此Ret相关参数的差异也随之消失。

此外，本研究结果显示，Ret-He的成年男性[(26.3，37.2)pg]、成年女性[(24.1，36.1)pg]参考区间，与北京[31]成人男性[(29.25，33.83)pg]、成年女性[(29.25，33.83)pg]，以及深圳[32]成年男性[(32.96，39.28)pg]、成年女性[(31.11，36.99)pg]的参考区间有较大的差异，表现为参考区间下限值偏低，参考范围变大，甚至和深圳[32]地区的缺铁性贫血男性[(24.72±3.91)pg]、缺铁性贫血女性[(22.63±3.76)pg]有较大重合部分，但高于汕头[33]地区的缺铁性贫血人群[16.70(14.32，19.70)pg]。这可能是因为本研究的人群为雅安地区人群，属西南地区中小城市，而后者为北方、沿海等地，这充分说明了不同人群可能由于地理环境、生活方式及生理结构等因素的差异而导致机体内铁含量的不同，从而导致不同人群Ret-He有所差异，甚至差异很大，因此建立不同地区实验室的参考区间尤为重要。

综上所述，Ret相关参数的参考区间因受地区、民族、性别、年龄、仪器等众多种因素影响而不同，不同地区各实验室应根据本地区人群建立适合自己实验室的参考区间，若是使用不适合本地区的Ret相关参数参考区间，极易造成临床误诊。因此，设置区域化的Ret相关参数参考区间对临床诊断和疗效判断十分必要。本研究按照年龄和性别分组初步建立雅安地区健康成人Ret相关参数参考区间，已在本实验室验证，验证全部通过，可推广至雅安甚至川西地区验证使用。