陈星震
摘要:目的建立测定布瓦西坦片含量的高效液相色谱法。方法色谱柱:YMC C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈(65:35),流速为1.0ml/min,检测波长为215nm。结果平均回收率99.8%(n=9),RSD=0.26%;精密度试验RSD=0.12%;对照品溶液的稳定性RSD=0.13%(n=5);线性范围:25.21~75.01μg/ml,r=1.000。结论方法简便、准确、重现性好。
关键词:高效液相色谱仪;布瓦西坦;含量测定
【中图分类号】 F763 【文献标识码】 A 【文章编号】2107-2306(2022)08--01
引言
布瓦西坦属于第3代抗癫痫药物,是一种新型的突触囊泡蛋白2A(SV2A)高亲和性配体,同时对电压依赖性钠离子通道亦有一定的抑制作用。2005年,布瓦西坦获得FDA及歐盟批准用于治疗罕见症状性肌阵挛癫痫发作,具有广阔临床应用前景。
布瓦西坦片的含量检测方法在国内外药典均未收载,也未见文献报道。本文建立了布瓦西坦片的高效液相色谱测定方法,用于本品含量测定,为控制该药的质量提供依据。该法准确可靠,操作简单,可用于该产品质量的控制。
1、仪器与试药
1.1仪器
日本岛津LC-2030高效液相色谱仪;AP225WD型电子天平;津腾过滤器。
1.2试药
布瓦西坦原料、布瓦西坦片、布瓦西坦对照品(北京鑫开元医药技科有限公司海南分公司,面积归一化法99.7%);乙腈(色谱纯,上海星可);磷酸(AR,罗恩试剂)。
2、方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱:YMC C18 4.6mm×250mm,5μm;流动相:0.1%磷酸溶液-乙腈(65:35);流速:1.0ml/min;检测波长:215nm;柱温:40℃;进样量:25μl。
2.2辅料干扰试验
按处方比例配制空白辅料、对照品、供试品溶液(参比制剂)适量,分别置100ml量瓶中,加水使溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液。
结论:空白溶剂、空白辅料对本品含量测定没有干扰。
2.3线性关系试验
取布立西坦对照品适量,精密称定,加水溶解并稀释制成每1ml中含500μg的溶液。精密量取4.0、4.5、5.0、5.5、6.0ml,分别置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。精密量取各25μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,以浓度(?g/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标,线性回归方程为y=15990.0x+9650.4,相关系数r=1.000>0.998,,能满足本品布立西坦片含量测定验证要求。
2.4精密度试验
取线性溶液项下浓度为50μg/ml的溶液,连续进样6次,计算峰面积的RSD为0.12%,表明精密度较好。
2.4稳定性试验
取对照品溶液,分别在0、2、4、6、8h取溶液注入液相色谱仪,记录色谱图,计算峰面积的RSD分别为0.13%,结果表明对照品溶液在8h内稳定。
2.5回收率试验
取对照品适量,按处方量加入辅料,分别加水制成每1ml中含40、50、60?g的溶液(各三份)。另取布瓦西坦对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含50?g的溶液,精密量取25?l,注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算,平均回收率为99.8%(RSD=0.26%,n=9)。
2.6样品测定
取本品20片,精密称定,研细,精密称取细粉适量(约相当于布瓦西坦50mg),加水使溶解并稀释制成每1ml中约50?g的溶液。另取布瓦西坦对照品适量,加水使溶解并稀释制成每1ml中约50?g的溶液。精密量取各25?l,注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算标示含量。结果如下:
结束语
通过对本品含量方法学验证结果表明,各结果均符合要求,说明本方法能准确、有效测定本品含量。
参考文献:
肖拥军,罗湘冀.高效液相色谱仪测定左乙拉西坦片的含量[J].广东药学院学报,2005,21(6):687-688.