TGF-β1、HIF-1α 在输卵管妊娠中的表达和意义

金力荣，杨麦青，徐洪波，魏燕妮

（1.昌邑市人民医院产科，山东 昌邑 261300；2.昌邑市人民医院病理科，山东 昌邑 261300；3.潍坊市人民医院病理科，山东 潍坊 261041；4.昌邑市人民医院输血科，山东 昌邑 261300；5.潍坊护理职业学院健康管理系，山东 潍坊 261041）

当受精卵植入子宫腔外时，就会发生异位妊娠，其是妇产科常见的急腹症。在美国，异位妊娠的患病率为1%～2%，占妊娠相关死亡的2.7%[1]。而异位妊娠中以输卵管妊娠最为常见，严重者可以因破裂导致孕妇死亡[2，3]。因此，早期发现和诊断异位妊娠对于孕早期的产妇尤其重要。转化生长因子β（TGF-β）由3 种亚型（TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3）组成，TGF-β1是一种多功能细胞因子，参与调节维持机体细胞分化、凋亡和免疫稳态过程[4-6]。任何原因引起的TGF-β1水平改变，均会导致机体免疫稳态的失衡，从而导致各种疾病的发展[7-9]。在慢性肾炎、骨折愈合、癌症等疾病形成过程中都发现有TGF-β1表达水平的改变[8-10]。低氧诱导因子1（HIF-1）已被证明是低氧反应基因表达的关键转录调节因子，在氧平衡调节过程中起着重要的作用，它有2 个亚基HIF-1α 和HIF-1β，而HIF-1α 决定其生理活性[11，12]，调节多种血管生成因子的基因表达，在葡萄胎代谢、新生血管形成等过程中至关重要，并参与多种疾病的发生[13-16]。本研究通过检测输卵管妊娠患者血清TGF-β1表达水平，分析其与临床病理参数的关系和与HIF-1α 表达的相关性，来探索TGF-β1、HIF-1α在输卵管妊娠的作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年1 月-2021 年9 月昌邑市人民医院产科就诊并经过临床诊断的输卵管妊娠患者40 例（停经6～8 周）设为实验组，将同期进行产检的30 名健康产妇设为对照组。纳入标准：所有纳入对象均是汉族，Torch 检查无异常；年龄20～45 岁；肝功、甲状腺功能、心脏、肺功能均正常。排除标准：存在高血压病、糖尿病、免疫性疾病者；生殖器解剖异常者；肿瘤史者。两组年龄、产次、孕次、体质指数、血压比较，差异无统计学意义（P＞0.05），可对比，见表1。所有纳入对象均知情同意并签署知情同意书。

表1 两组一般资料比较（）

表1 两组一般资料比较（）

1.2 方法 抽取受试者空腹血5 ml，静置1 h，离心后做好标记将血清置于-80℃冰箱冻存备用。应用贝克曼库尔特AU5800 全自动生化分析仪检测血清人绒毛膜促性腺激素β 亚单位（β-hCG）、孕酮（P）水平；采用双抗体夹心ABC-ELISA 法检测血清TGF-β1、HIF-1α 水平。ELISA 试剂盒购买自武汉赛培生物科技有限公司，操作时严格按照说明书进行，使用美国全自动酶联检测仪450 nm 测定吸光度，根据标准曲线及标准公式计算受试样本的浓度。

1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析。计量资料以（）表示，采用t检验；计数资料以（n）表示，采用χ2检验；采用Pearson 相关性分析TGF-β1、HIF-1α的关系；采用ROC 曲线评估TGF-β1、HIF-1α 对输卵管妊娠的诊断灵敏度；以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组TGF-β1、β-hCG、P、HIF-1α 水平比较 实验组血清TGF-β1、HIF-1α、β-hCG、P 水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组TGF-β1、β-hCG、P、HIF-1α 水平比较（）

表2 两组TGF-β1、β-hCG、P、HIF-1α 水平比较（）

2.2 血清TGF-β1、HIF-1α 低表达与临床病理参数的关系 TGF-β1、HIF-1α 低表达与血清β-HCG、P 有关（P＜0.05）；而与年龄、孕次、产次、收缩压、舒张压、体质指数无关（P＞0.05），见表3。

表3 输卵管妊娠患者血清TGF-β1、HIF-1α 与临床病理参数的关系（n）

2.3 血清TGF-β1与HIF-1α的相关性分析 TGF-β1低表达与HIF-1α 低表达呈正相关（r＝0.341，P＝0.016），见图1。

图1 TGF-β1 与HIF-1α的相关性分析

2.4 血清TGF-β1与HIF-1α 在输卵管妊娠中的诊断效能分析 ROC 曲线分析显示，血清TGF-β1低表达用于诊断输卵管妊娠的曲线下面积是0.721（P＝0.002）；血清HIF-1α 低表达用于诊断输卵管妊娠的曲线下面积是0.692（P＝0.006），见图2。

图2 血清TGF-β1、HIF-1α 低表达在诊断输卵管妊娠中的ROC 曲线图

表3（续）

3 讨论

宫外孕的发病机制比较复杂，其危险因素包括盆腔炎病史、吸烟史、输卵管手术史、既往异位妊娠史和不孕症。异位妊娠是妊娠早期孕产妇死亡率的主要原因，任何妊娠早期出现阴道出血或下腹疼痛且尚未确定宫内妊娠的患者都应考虑宫外孕[1]。宫外孕中输卵管妊娠约占其中的98%，输卵管妊娠据着床部位的不同可以分为壶腹部妊娠、峡部妊娠、伞部妊娠和间质部妊娠[17，18]。由于输卵管的管腔狭窄且管壁较薄，伴随孕囊的生长，比较容易破裂，但输卵管免疫细胞的组成、表型和活性的改变都有助于输卵管妊娠的发生。

TGF-β1是TGF-β 亚型的一种，在多个方面上控制细胞的生长。在成人机体中，TGF-β1对免疫细胞的发育和成熟至关重要，维持免疫耐受和内环境的稳定，并调节免疫反应的各个方面。TGF-β1能够显著抑制Th 淋巴细胞的激活和增殖，在B 细胞和浆细胞生物学的调节中也起着关键作用，从而限制炎症可能导致的组织破坏性反应[19]。有文献报道[20]，TGF-β1在早期自然流产中表达降低，并且TGF-β1的表达与血清β-hCG、P 和雌激素水平有关，提示TGF-β1参与维持正常妊娠过程。本研究结果发现，实验组血清TGF-β1低于对照组，且其与β-hCG、P的表达有关（P＜0.05），提示TGF-β1参与了输卵管妊娠的发生、发展，其表达水平降低，可能通过致纤维化作用降低和改变炎细胞炎性因子的分泌，从而改变孕囊着床部位纤维组织修复和炎细胞浸润的平衡，导致输卵管妊娠的发生。

HIF-1α的水平主要靠氧气浓度来调节。当细胞微环境氧气浓度正常时，HIF-1α 可被泛素化降解，维持正常的表达水平，但当细胞缺氧时，HIF-1α的降解受阻，浓度就会升高，从而会启动与低氧耐受相应的转录过程[14-16]。有研究报道[12-14]，HIF-1α 在癌症、骨质疏松、心肌梗死等疾病中异常表达，参与了这些疾病的发生、发展，并且在高龄孕妇易流产疾病研究和妊高症研究中也发现有HIF-1α的异常表达，说明HIF-1α 在妊娠过程中有一定的作用。本研究结果发现，实验组血清HIF-1α 低于对照组，且其与β-hCG、P的表达有关（P＜0.05），提示HIF-1α 参与了输卵管妊娠的发展过程。孕囊早期的血供对于维持孕囊正常发育起着重要的作用，血管形成不足会导致低氧影响孕囊的发育。HIF-1α 在输卵管妊娠患者血清中显著降低，提示输卵管妊娠中这些异位孕囊所处的微环境不能有效调控低氧情况。此外，本研究相关性分析显示，TGF-β1低表达与HIF-1α低表达呈正相关（r＝0.341，P＝0.016），说明TGF-β1与HIF-1α 在输卵管妊娠中的作用是协同作用。ROC 曲线分析显示，血清TGF-β1低表达用于诊断输卵管妊娠的曲线下面积是0.721（P＝0.002）；血清HIF-1α 低表达用于诊断输卵管妊娠的曲线下面积是0.692（P＝0.006），提示TGF-β1、HIF-1α 低表达对于输卵管妊娠有一定的诊断意义。

综上所述，输卵管妊娠患者血清TGF-β1、HIF-1α的表达降低，TGF-β1、HIF-1α 低表达与β-hCG、P的表达有关，且血清TGF-β1、HIF-1α 低表达在输卵管妊娠诊断中的敏感性较高。