黄芪注射液辅助PHGF治疗对病毒性肝炎患者肝功能及血清sST2、IL-33的影响

黄丽静，邓喜亮，覃金凤，吴海松，潘大烨，梁英源，李锡芳

病毒性肝炎是由嗜肝病毒引起的法定乙类传染病，以肝脏炎症和坏死病变为主要病理特征[1]。目前，现代医学多采用抗病毒、保肝护肝等方法对病毒性肝炎进行治疗，但长期临床经验发现，部分患者治疗效果稳定性差，易出现反跳现象，成为临床棘手问题之一。促肝细胞生长素(PHGF)提取自新鲜乳猪肝脏，是我国第一个一类生化新药，凌顺等[2]动物实验研究发现，PHGF可通过抑制肝细胞凋亡，减轻肝组织损伤，改善肝功能。黄芪注射液提取自中药黄芪，可益气养元、扶正祛邪、养心通脉、健脾利湿[3]。胡雪原等[4]报道，黄芪注射液可下调乙型肝炎模型小鼠血清中炎性因子表达，并改善肝功能。但PHGF联合黄芪注射液应用于临床是否能扩大患者受益尚不明确。现阶段已证实病毒性肝炎可引起肝衰竭，但其机制仍未阐述清楚，有证据显示与机体具有免疫功能的某些促炎细胞因子有关[5]。胡萍等[6]、侯建明和吴贺文[7]研究发现，Th1/Th2与病毒性肝炎的发生及肝功能损伤密切相关。而可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)、白细胞介素-33(IL-33)能通过辅助蛋白相互作用，参与Th1/Th2型免疫应答，但在病毒性肝炎中具有何种作用仍有待探讨[8]。鉴于此，本研究选取病毒性肝炎178例，从血清sST2、IL-33等角度，分析黄芪注射液辅助PHGF的应用价值，报告如下。

1 资料和方法

1.1一般资料 选取2019年1月—2021年2月我院收治的病毒性肝炎178例为研究对象，根据治疗方法不同分为研究组和对照组，每组89例。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。本研究经医院伦理委员会批准执行。

表1 不同方法治疗病毒性肝炎两组一般资料比较

1.2纳入与排除标准 ①纳入标准：均根据症状体征、病原学及肝功检测等明确诊断为病毒性肝炎；中医符合气虚血瘀证诊断标准[9]，主症见胁肋刺痛、倦怠乏力、食欲减退、脘腹胀满，次症见便秘或腹泻、胁下有痞块、面部或手掌赤丝红缕、面色灰暗，舌苔薄白或薄黄、舌质暗淡、舌边有瘀点，脉弦细或弦涩；入组前4周未接受相关治疗；自愿签署知情同意书；可配合随访与治疗。②排除标准：药物引起肝损伤者；代谢类疾病引起的肝损伤者；肝癌患者；存在相关药物过敏史或过敏体质者；妊娠期或哺乳期妇女；合并严重糖尿病、高血压病患者；合并肾、脑、肺等严重疾病者；未按疗程完成治疗者。

1.3方法

1.3.1常规干预：①一般治疗：嘱患者戒烟戒酒，急性肝炎、慢性肝炎活动期者，需卧床休息，并给予饮食营养干预，保证维生素、蛋白质、热量供给，恢复期逐渐增加活动。②抗病毒治疗：均给予重组人干扰素α-2b(海南通用同盟药业有限公司，国药准字S20040028)抗病毒治疗，300万单位隔日肌内注射，连续给药6个月，酌情选用利巴韦林、拉米夫定等治疗。③护肝治疗：甘草酸二胺注射液(江苏苏中药业集团股份有限公司，国药准字H20073957)150 mg静脉滴注，1/d，连续给药4周。

1.3.2对照组：在常规干预基础上给予PHGF(安徽城市药业股份有限责任公司，国药准字H22026703)80～100 mg静脉滴注，1/d，疗程4周。

1.3.3研究组：在对照组基础上加用黄芪注射液(上海福达制药有限公司，国药准字Z31020084)2～4 ml肌内注射，1/d，疗程4周。

1.3.4临床疗效判定：根据治疗前后中医证候积分变化评估疗效，次症积分按重、中、轻、无依次取3、2、1、0分，主症积分按重、中、轻、无依次取6、4、2、0分。中医证候积分为次症与主症积分之和，治疗4周后中医证候积分降低>90%为显效、降低40%～90%为有效、降低<40%为无效，总有效率=(显效+有效)例数/总例数×100%。

1.4观察指标 ①比较两组治疗4周后的临床疗效。②比较两组治疗前、治疗4周后肝功能指标,包括血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)，使用赖氏法试剂盒(长春迪瑞医疗科技股份有限公司)检测ALT，使用酶联免疫吸附试验试剂盒(上海沪震实业有限公司)检测AST，使用重氮法试剂盒(浙江东方基因生物制品有限公司)检测TBIL。③比较两组治疗前、治疗4周后血清sST2、IL-33水平，均应用酶联免疫吸附试验检测，sST2试剂盒购于酶联(上海)生物试剂科技有限公司，IL-33试剂盒购于上海润裕生物科技有限公司。④比较两组治疗前、治疗4周后T淋巴细胞亚群指标,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平使用流式细胞仪检测。⑤统计两组不良反应发生情况，包括恶心呕吐、腹泻、头晕、皮疹等。

2 结果

2.1临床疗效比较 治疗4周后，研究组临床总有效率高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 不同方法治疗病毒性肝炎两组临床疗效比较[例(%)]

2.2治疗前后肝功能指标比较 治疗前，两组血清AST、ALT、TBIL水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗4周后，两组血清AST、ALT、TBIL水平较治疗前降低，且研究组低于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 不同方法治疗病毒性肝炎两组治疗前后肝功能指标比较

2.3治疗前后血清sST2、IL-33水平比较 治疗前，两组血清sST2及IL-33水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗4周后，两组血清sST2及IL-33水平较治疗前降低，且研究组低于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 不同方法治疗病毒性肝炎两组治疗前后血清sST2、IL-33水平比较

2.4治疗前后T淋巴细胞亚群比较 治疗前，两组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗4周后，两组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较治疗前增高，且研究组高于对照组(P<0.05)。见表5。

表5 不同方法治疗病毒性肝炎两组治疗前后T淋巴细胞亚群比较

2.5不良反应比较 两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表6。两组不良反应均为偶发，且程度较轻，未影响用药，调整作息、饮食后逐渐消失。

表6 不同方法治疗病毒性肝炎两组不良反应比较[例(%)]

3 讨论

病毒性肝炎是导致慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭、肝癌的重要诱因，对患者生命健康造成极大危害，因此研究其有效疗法意义重大。以往应用干扰素、核苷类药物等抗病毒治疗可抑制病毒复制，能一定程度上改善肝功能，但长期应用可能产生耐药性，部分患者不能取得预期效果[10]。PHGF是治疗各种病毒性肝炎的重要药物，具有以下作用：①降低血清转氨酶、胆红素水平；②改善肝脏细胞的吞噬功能，抑制炎性因子活性，促进肝坏死后的修复；③能刺激新生肝细胞DNA合成，促进肝细胞再生，有利于恢复肝功能[11]。但麦泳瑶等[12]进行meta分析发现，单纯应用PHGF治疗仍有患者未获满意效果，故需联合其他疗法。

祖国传统医学治疗病毒性肝炎拥有独特的理论基础，近年来逐渐受到人们关注。中医学中病毒性肝炎属于“黄疸”“肝瘟”等，病机与“湿热瘀毒”外侵有关，湿得热而益深，热因湿而愈炽，胶结难解，中阻日久，阻滞气机，形成血瘀，肝络阻塞，疏泄失常，浊不得泄，且湿热交织，困遏脾阳，气血生化不足，血行无力，正气亏虚，正虚毒郁而发病，故治以扶正祛邪、补气通络。黄芪为补气良药，《本草汇言》载有：“黄芪，补肺健脾，实卫敛汗，驱风运毒之药也”，《本草正》载有：“因其味轻，故专于气分而达表，所以能补元阳，充腠理”“补益中土，温养脾胃”，《本经疏证》载有：“黄芪一源三派，浚三焦之根，利营卫之气，故凡营卫间阻滞，无不尽通”。可见黄芪具有补中益气、通脉健脾、祛邪扶正之功效。黄芪注射液源于中药黄芪，现代医学认为，其含有皂苷、黄酮、多糖等多种成分，具有较强的抗病毒、抗菌、抗氧化应激、强化机体免疫功能等作用[13]。本研究联合应用黄芪注射液和PHGF治疗病毒性肝炎，结果显示，治疗4周后研究组总有效率高于对照组，AST、ALT、TBIL低于对照组，表明黄芪注射液辅助PHGF治疗，可改善病毒性肝炎患者肝功能，疗效显著。一方面PHGF可促进病毒引起肝坏死后的修复，并刺激肝细胞再生，改善肝功能；另一方面黄芪注射液可抑制病毒复制，减少氧化应激对肝组织损伤，保护肝功能，二者能够协同作用，故疗效良好。

有研究发现，机体免疫系统在病毒性肝炎发病过程中扮演重要角色[14]。T淋巴细胞亚群参与机体细胞免疫，具有调节免疫系统功能和抗病毒的作用，其功能发挥依赖于CD3+、CD4+、CD8+水平，正常情况下，各T淋巴细胞亚群通过对立和协调保持免疫系统平衡[15-16]。BARAL等[17]研究指出，CD4+/CD8+平衡紊乱是病毒感染基础。江若霞等[18]报道亦指出，病毒性肝炎患者存在明显的免疫功能紊乱，表现为外周血T淋巴细胞亚群异常。可见病毒性肝炎患者存在细胞免疫功能异常，并与疾病的发生有关。本研究发现，治疗4周后研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平高于对照组，表明黄芪注射液辅助PHGF可纠正病毒性肝炎患者T淋巴细胞亚群紊乱，改善细胞免疫功能，有助于病情的改善。

IL-33是具有双重作用的细胞因子，不仅作为可溶性细胞因子调节Th2型免疫反应，刺激前炎性因子合成分泌，又可作为核因子调控基因转录，在炎症性疾病、自身免疫疾病中均发挥重要作用，故研究IL-33对深入理解疾病发病机制及寻找新疗法具有积极意义[19]。sST2是IL-33特异性受体，可与IL-33结合介导Th2型细胞因子产生[20]。姜绍文等[21]研究指出，急性肝衰竭小鼠肝内及血清IL-33表达随着肝损伤加重不断增高，肝衰竭时上升至峰值，血清sST2水平在肝细胞损伤中期显著升高，说明sST2、IL-33参与了急性肝衰竭的发生发展过程。因此，sST2、IL-33也可作为病毒型肝炎治疗效果评估的重要指标，但临床关于其在疾病治疗前后水平变化的相关研究较少。郑绍同等[22]报道显示，慢性乙型肝炎患者血清sST2、IL-33与AST呈正相关，提示sST2、IL-33可间接反映患者肝功能。本研究发现，治疗4周后，研究组血清sST2及IL-33水平低于对照组，提示黄芪注射液辅助PHGF可改善病毒性肝炎患者炎症反应，这可能是二者发挥疗效的机制之一。同时研究组不良反应总发生率与对照组比较差异无统计学意义，表明二者联合治疗安全可靠。本研究不足之处在于，未对患者进行长期随访，远期疗效仍有待延长随访时间验证。

综上所述，黄芪注射液辅助PHGF治疗病毒性肝炎，可减轻炎症反应，改善患者T淋巴细胞免疫功能和肝功能，且安全可靠，下调sST2及IL-33可能是二者发挥疗效的机制之一。