不同预处理剂对乳牙牙本质粘接耐久性的影响

树脂粘接修复术是儿童口腔科治疗乳牙龋病的常用方法之一，牙本质粘接力主要来源于粘接剂向脱矿的牙本质胶原纤维网中渗透固化后形成的混合层所提供的微机械嵌合力。乳牙牙本质中存在的基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）在酸性坏境下容易被激活降解胶原纤维

。现有的粘接技术和粘接剂都不能完全包裹暴露的胶原纤维，暴露的胶原纤维容易发生酶解和水解，加速混合层退变，降低修复体的使用寿命

。氯己定作为抗菌剂在牙科领域应用广泛，具有抗菌和抑制内源性蛋白酶活性的作用，是众多蛋白酶抑制剂中研究最多的一种。2%氯己定预处理可以改善乳恒牙牙本质粘接界面的稳定性

，但其细胞毒性不容忽视

。

近年来，天然多酚成为牙本质粘接领域的研究热点，白藜芦醇（resveratrol）是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，具有抗癌、保护神经和心脏的作用

。研究发现白藜芦醇能抑制MMP-2、MMP-9 的活性

，抑制变异链球菌的致龋性

，具有良好的生物相容性

。研究表明使用白藜芦醇/乙醇溶液预处理恒牙牙本质可以提高树脂-牙本质粘接耐久性，降低粘接界面的纳米渗漏

。与恒牙牙本质相比，乳牙牙本质的矿化程度低，有机物含量高，二者的组织结构和微观形态均存在差别，因此乳恒牙牙本质粘接效果可能会有一定差异。探寻能够有效提高树脂-乳牙牙本质粘接耐久性的预处理剂具有重要意义。目前关于白藜芦醇对乳牙牙本质粘接效果的研究报道较少，因此本实验选择人乳牙作为实验对象，观察不同预处理剂对乳牙牙本质剪切粘接强度和界面纳米渗漏的影响，以期为临床选择合适的乳牙牙本质表面预处理剂提供参考。

本文对微环谐振腔结构中耦合间距与其耦合系数、传输性能的影响关系进行了理论分析与仿真,通过MEMS工艺制备了耦合间距不同的微环谐振腔。通过耦合实验测试,得到了不同耦合间距下的谐振响应谱线,并全面分析了耦合间距对耦合深度、耦合效率、3 dB带宽及品质因数Q的影响关系,为环形微腔的进一步优化设计提供了依据,避免了优化过程的盲目性,同时对微环谐振腔在改善滤波性能、提高品质因数以及在其他相关领域中的研究具有重要的意义。

1 材料和方法

1.1 实验材料和主要设备

白藜芦醇粉末（Sigma Aldrich，美国）；2%氯己定（朗力生物，中国）；人工唾液（LANSO，中国）；37%磷酸酸蚀剂（SPIDENT，韩国）；Single bond Uni-versal Adhesive（3M ESPE，美国）；复合树脂Z250（3M ESPE，美国）；无水乙醇；10%次氯酸钠溶液；氨化硝酸银溶液；电子万能试验机（Instron，美国）；低速金刚石切割机（沈阳科晶自动化设备有限公司，中国）；扫描电子显微镜（JEOL，日本）；体视显微镜（OLYMPUS SZ61，日本）；能量色散X 射线光谱仪（Hitachi，日本）。

1.2 实验牙收集

本研究通过了哈尔滨医科大学附属第一医院伦理委员会的批准（编号：2021XS27-02），收集了42 颗因滞留拔除的无龋或早期龋乳磨牙，要求牙冠完整，无裂纹和充填物，去除色素、牙石、牙周膜等软组织保存于4 ℃的生理盐水。

1.3 预处理剂配制

将白藜芦醇粉末溶于无水乙醇，在37 ℃恒温水浴箱水浴15 min，配制成10 mg/mL 的白藜芦醇预处理剂，4 ℃避光保存备用。

1.4 实验分组

本研究共分为3 组，A 组为对照组（蒸馏水预处理），B 组为氯己定预处理组，C 组为白藜芦醇预处理组，实验分组与预处理剂应用顺序见表1。

1.5 剪切粘接强度实验

选取24 颗乳磨牙，用高速涡轮手机冷却条件下去除牙根。用硬组织切割机沿牙冠近远中方向切割成颊、舌侧两部分，自凝树脂将样本包埋成9 mm×9 mm×9 mm 的规则模型，样本略高于自凝塑料平面3 mm，在流水降温条件下用高速涡轮手机磨除釉质暴露牙本质面，600 目碳化硅水砂纸打磨1 min，超声荡洗8 min，获得统一标准的牙本质粘接面。各实验组按照表1 的方法制备48 个剪切实验试件，形成与粘接界面垂直的树脂小柱（直径和高均为3 mm）。将制备好的试件在37 ℃人工唾液中储存24 h；每组16 个试件中取8 个试件进行即刻剪切粘接强度测试，其余8 个保存在10%次氯酸钠溶液中浸泡1 h 后测试。用电子万能试验机测试剪切粘接强度，剪切力的方向平行于粘接界面，加载速度为1 mm/min，直至树脂与牙面断裂，记录实验数据，计算剪切粘接强度值=树脂小柱断裂时的最大载荷（N)/ 粘接面积（mm

）。剪切粘接强度实验过程见图1。

1.6 断裂模式分析

性，但其气味大、味微苦，儿童难以接受，且对成牙本质样细胞有较强的细胞毒性作用

。有研究表明低于10 mg/mL 白藜芦醇和10 mg/mL 白藜芦醇改性粘接剂的细胞毒性和生物相容性均在可接受范围

，因此本实验选择白藜芦醇的浓度为10 mg/mL。白藜芦醇可以抑制MMPs 的活性

，低浓度的白藜芦醇具有基因保护活性，能减低牙本质粘接剂成分的细胞毒性和DNA 损伤

，抑制变异链球菌的活性

，提高恒牙牙本质粘接耐久性

，乳恒牙的牙本质微观形态和组织结构存在较大差异，乳牙牙本质粘接混合层更容易降解

，因此，评估白藜芦醇预处理对乳牙牙本质粘接性能的影响具有重要意义。

1.7 界面纳米渗漏实验

选取18 颗离体乳磨牙，用高速涡轮手机冷却条件下去除牙根，流体树脂封闭髓腔。用自凝塑料将样本包埋成1.2 cm×1.2 cm×1.2 cm 的规则模型，牙齿 面高于自凝塑料平面3 mm，磨除 面釉质暴露牙本质粘接面（方法同前），按表1 方法处理粘接面，分次放置复合树脂，形成3 mm 高的树脂修复体。将制备好的试件在37 ℃人工唾液中储存24 h；每组随机取3 个样本用于即刻检测，其余3 个在10%次氯酸钠溶液中老化1 h。用硬组织切割机将样本沿牙齿长轴方向切割成2 mm 厚的片状试件。每组试件在距离树脂-牙本质粘接界面1 mm以外均匀涂布两层指甲油，自然干燥后避光保存在质量分数为50%氨化硝酸银溶液中（pH=9.5）24 h，蒸馏水冲洗，浸泡于显影液中荧光灯照射8 h，定影液固定8 h。所有试件依次使用600、800、1 500、2 000 目碳化硅砂纸在流水条件下打磨抛光，超声荡洗15 min，干燥，喷金，场发射扫描电子显微镜背散射模式下观察粘接界面纳米渗漏情况，每个样本随机选取5 个视野（每组15 张图像），使用Image J 计算每个图像中银颗粒占整个图像面积的百分比，其分级表示如下：0，无纳米渗漏；1，渗漏≤25%；2，25%＜渗漏≤50%；3，50%＜渗漏≤75%；4，渗漏＞75%。使用能量色散X 射线光谱仪面扫分析粘接界面Si 元素、Ca 元素、Ag 元素的分布情况。

没有了刚兑，没有了承诺收益率，投资者有必要更仔细的阅读资管产品说明书了。对于私募产品，每季度都要关注产品的净值和其他重要信息；对于固定收益类产品，要对每笔非标准化债权类资产产品投资的客户信息、项目名称、产品收益，投资期限、交易结构以及风险状况等相关内容进行充分的了解；对于权益类产品，要对产品投资股票面临的风险进行明确的认识；对于商品及金融衍生品类产品，也需要对产品的持仓风险、挂钩资产、控制措施以及衍生品公允价值变化进行详细的了解；而对于混合类产品，要关注产品的投资资产组合情况。

1.8 粘接界面观察

扫描电子显微镜下观察各组的粘接界面形态如图5，各组牙本质小管内均有不同长度的树脂突，C 组的树脂突最长，与A 组和B 组比较更加致密。A 组和B 组老化后均在混合层顶部出现裂隙。

1.9 统计学分析

患者口腔是测试和评估粘接修复体的最终环境。模拟口内老化的常用方法有水储存、冷热循环、次氯酸钠溶液浸泡、pH 循环等。研究表明10%次氯酸钠溶液浸泡1 h 相当于冷热循环10 000 次、水储存半年、pH 循环15 次的老化程度，10%次氯酸钠溶液浸泡快速高效

。因此本实验采用10%次氯酸钠浸泡1 h 模拟修复体在口内的老化环境。

2 结 果

2.1 剪切粘接强度测试结果

各组剪切粘接强度测试结果如表2 所示，A 组的即刻粘接强度为（33.62±13.67）MPa，老化后的粘接强度为（17.71±3.82）MPa，二者比较具有显著差异（

＜0.05）。B 组、C 组的即刻粘接强度与老化后的粘接强度无显著差异（

＞0.05）。A、B、C 三组即刻粘接强度无显著差异（

＞0.05），老化后的粘接强度组间两两比较具有显著差异（

＜0.05），且C 组的粘接强度值最高，B 组次之，A 组最低。

2.2 断裂模式分析

各组的断裂模式分析见图2，A 组、B 组主要为混合断裂，C 组主要为复合树脂内聚断裂。各组体视显微镜图像如图3 所示：A 组即刻断裂模式为粘接剂界面断裂和牙本质内聚断裂；B 组即刻断裂模式为牙本质内聚断裂和复合树脂内聚断裂；C 组即刻断裂模式为粘接剂界面断裂、复合树脂内聚断裂以及牙本质内聚断裂；A、B 组老化断裂模式为粘接剂界面断裂和复合树脂内聚断裂，C 组老化断裂模式为牙本质内聚断裂。

2.3 界面纳米渗漏结果

粘接强度是评估树脂-牙本质粘接性能最常用的指标。评估粘接强度常用方法为微拉伸强度和微剪切强度测试，微拉伸强度测试对试件制备要求高，技术敏感性强，而微剪切粘接强度测试相较于微拉伸强度测试更为简单方便

，试件制备后无需进一步切割成一定形状。本实验选择乳磨牙为研究对象，乳牙的体积比恒牙小，牙本质的厚度远不如恒牙牙本质，微拉伸强度实验的试件制备存在一定难度，因而本实验选择剪切强度测试评估粘接强度。

2.4 粘接界面形态观察

从1.7 实验余留样本中每组随机选取2 个试件，待观察面依次用600、800、1 500、2 000 目碳化硅砂纸流水条件下抛光，37%磷酸酸蚀观察面10 s，冲洗，浸入5%次氯酸钠溶液中2 min，乙醇溶液梯度脱水，喷金，扫描电子显微镜下观察粘接界面情况。

3 讨 论

牙本质粘接界面退变是影响粘接耐久性的根本原因，而口腔环境会加速其退变的进程。粘接界面的退变包括粘接树脂的浸出、老化和胶原纤维的降解

。牙本质预处理是改善粘接耐久性的方法之一，理想的牙本质预处理剂对牙髓细胞、成牙本质细胞的毒性作用应该很低或无毒性。氯己定是非特异性基质金属蛋白酶抑制剂和抗菌剂，用于预处理牙本质可以改善牙本质的粘接耐久

体视显微镜下（40 倍）评估剪切实验测试后样本的断裂模式，断裂面的类型分为4 种：①粘接剂界面断裂；②牙本质内聚断裂；③复合树脂内聚断裂；④前三种断裂面形态的任意组合（混合断裂）。

界面纳米渗漏结果见表3，A 组、B 组的纳米渗漏结果显示在即刻和老化时有显著差异；C 组在即刻和老化时无显著差异。三组纳米渗漏程度即刻检测结果为A 组＞C 组＞B 组，但三组组间比较无显著差异。经10%次氯酸钠溶液老化1 h 后，三组纳米渗漏程度A 组＞B 组＞C 组，A 组与B 组、C 组比较差异均具有统计学意义，B 组与C 组比较无显著差异。图4a 为扫描电镜观察Ag 离子渗漏情况，图4b ～ 图4c 为EDX 分析粘接界面的纳米渗漏情况。红色区域代表Si 元素，主要为复合树脂分布区域（图4b）。青色区域代表Ag 元素，代表纳米渗漏情况，主要集中分布在粘接界面混合层底部（图4c）。黄色区域代表Ca 元素，主要为牙本质分布区域（图4d）。

各组剪切粘接强度值数据采用平均值±标准差表示，采用SPSS26.0 软件进行数据分析，剪切粘接强度实验数据采用方差分析，三组组间比较采用LSD 检验，纳米渗漏实验等级资料采用Kruskal-Wallis 检验进行分析，

＜0.05 为差异具有统计学意义。

实验结果显示各组即刻粘接强度无显著差异，说明氯己定或白藜芦醇预处理不会影响乳牙牙本质的即刻粘接性能，这与Giacomini 等

和Porto 等

以恒牙为研究对象的结果一致。经过10%次氯酸钠溶液老化后，对照组的粘接强度显著降低，2%氯己定组和白藜芦醇组的即刻粘接强度和老化后的粘接强度比较无显著差异，说明2%氯己定和10 mg/mL 白藜芦醇均可以改善老化后乳牙牙本质粘接强度。本实验中2%氯己定组和白藜芦醇组经10%次氯酸钠溶液老化后粘接强度无明显降低，这与先前的研究结果有差别，可能是由于老化方式不同，次氯酸钠主要降解有机相，而脱矿牙本质表面经氯己定或白藜芦醇预处理后更多的胶原纤维被粘接树脂包裹。老化后，对照组、2%氯己定组和白藜芦醇组的粘接强度均有显著差异，白藜芦醇组的粘接强度最高。白藜芦醇含有3 个酚羟基，可通过氢键与胶原纤维发生交联作用，无水乙醇作为白藜芦醇的溶剂，可以通过降低介电常数来促进多酚与胶原的交联作用，从而改变胶原纤维的机械性能。乙醇或以乙醇为溶剂的预处理剂处理酸蚀脱矿的牙本质后，脱矿胶原基质悬浮于乙醇溶液中使得胶原纤维直径缩小，增大纤维网间的间隙，增加牙本质表面的疏水性并引起水分含量的变化，促进疏水树脂单体向更深层渗透和浸润，提高粘接界面的稳定性

。

1.发票的开具。“营改增”之前企业通过“建筑业统一发票”来结算有关业务，纳税企业无需辨别承稅方的纳税资格。税改之后，企业则需开具“增值税专用发票”，所有企业，包括小规模纳税人，都交由国家税务机关开增值税发票，确保发票的统一性。

行政问责制起源于西方，是西方国家在完善政党制度和议会制度的过程中逐渐形成的。行政问责制对政府制定和执行政策、行使职权过程中的权责规划具有重要指导意义，完善的行政问责制可以有效地减少行政人员滥用职权、权不为民的行为发生，这对当代中国的行政体制改革具有深远意义。行政问责制的定义可以从广义和狭义两个角度进行解释。

轻度颅脑外伤后良性阵发性位置性眩晕与特发性良性阵发性位置性眩晕的临床特点比较 ………………………………………………………… 谈毅，郑云华，聂德新，等 189

牙本质酸蚀脱矿的深度大于粘接树脂的渗透深度，混合层底部未被粘接树脂包裹而暴露的胶原纤维区域即纳米渗漏区域。该区域机械性能较弱，且存在游离水分子能促进混合层水解作用，是影响粘接耐久性的因素之一。纳米渗漏是评估粘接界面封闭性的重要指标，本实验使用氨化硝酸银进行试件银染，使用扫描电子显微镜观察和EDX 能谱分析两种方法结合可以减少假阳性和假阴性成像，提高结果可信度

。结果显示2%氯己定组、白藜芦醇组的即刻纳米渗漏程度低于对照组，对照组和2%氯己定组老化后纳米渗漏程度显著增加，白藜芦醇组纳米渗漏程度在老化前后无显著差异，老化后白藜芦醇组纳米渗漏程度最低，这证实了氯己定和白藜芦醇预处理可不同程度降低乳牙牙本质纳米渗漏情况，维持粘接界面稳定。

本研究发现，当光照强度为0 ～ 380 μmol·m-2·s-1时，外施钾肥可使降香黄檀叶片的净光合速率Pn迅速升高。当光强为380 ～ 800 μmol·m-2·s-1时，各处理Pn值上升平缓，之后逐渐趋于稳定(图3)。Pnmax随钾肥用量的增加而增加，最大值为K2处理，分别比K1和CK处理增加了56.49%和132.35%；此外，K2处理下的LSP值最大， 但LCP、Rd 值均在CK处理时达到最大值，K2次之，K1最小(表3)。

本实验中对照组、2%氯己定组的断裂模式主要为混合断裂，白藜芦醇组主要为复合树脂内聚断裂，扫描电子显微镜观察白藜芦醇组的树脂突长且致密，进一步证明白藜芦醇预处理后粘接界面的混合层完整性更高。

6.3.1 抽奖方式与领奖方式。荐书抽奖：将读者荐购的图书与微信号同时放入抽奖池，主持人随意邀请X名读者(领导专家)上台抽奖，抽奖者背对银幕点击鼠标，微信号停止滚动，屏幕上则左侧弹出中奖读者的微信号，右边弹出该读者荐购的书籍，由此产生获奖名单。读者凭借中奖信息与后台工作人员核对领奖(或中奖读者举手示意，由工作人员送至读者手中)。

综上所述，氯己定和白藜芦醇均可以保护粘接界面胶原纤维降解，维持粘接强度，在一定程度上改善乳牙牙本质粘接耐久性，且白藜芦醇对改善乳牙牙本质的粘接效果优于氯己定。

Liu ED designed the study, performed the experiments, analyzed the data and wrote the article. Lv J performed the experiments, analyzed the data and wrote the article. Liu YQ and Jin XA revised the article. All authors read approved the final manuscript as submitted.

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