不规则抗体和冷凝聚素引起血型鉴定和配血困难1例

马祥斌　张汾　邢杰　石秋

摘要：目的：探討在临床输血中疑难血型鉴定及相容配血困难的解决方法。方法：通过临床病例分析，红细胞ABO正反血型鉴定，吸收试验、放散试验、不规则抗体筛查、直接抗人球蛋白试验，凝聚胺法、抗人球蛋白卡法交叉配血，正确鉴定ABO血型和交叉配血。结果：冷凝聚素和不规则抗体的存在，给临床血型确定和交叉配血带来很大的难度。结论：在临床输血中，患者体内的冷凝聚素增多可引起ABO血型鉴定正反不符，不规则抗体引起交叉配血困难，特别是ABO不完全抗体，严重干扰输血相容配合和输血安全;对于疑难血型鉴定标本，应有针对性选择不同的方法加以验证，以防误报;对于不规则抗体筛查阳性的配血病人，应采用抗体筛查、放散吸附等处理措施，核实可能存在的不完全自身抗体，采用可靠地配血方法，相容性配合血液成分，确保临床用血安全有效。

关键词：冷凝聚素 不规则抗体 血型鉴定 相容性配血

冷凝聚素是自身抗体的一种，正常人血清中冷凝聚效价不超过1：16^〔1〕.在某些病理或特殊因素的诱导下，冷凝聚素的效价增高，导致血型鉴定困难;自身不规则血型抗体的存在，同样导致ABO血型正反定型不符，同时也影响交叉配血。直接影响临床输血治疗的及时性、有效性和输血安全。现将我院1例含有冷凝聚素和不规则血型抗体患者的血型鉴定及输血相容配血过程报告如下：

1.临床病例资料

患者男性，77岁，农民，汉族，既往无手术史、输血史，因咳嗽、胸闷、喘累、气促在社区治疗四天（用药不详）无效，于2020年10月2日以“慢性阻塞性肺病并加重”收入呼吸与危重症科，重度贫血，后转入血液科治疗。实验室检查见：HBG66.4g/L，RBC1.87*10¹²/L，尿隐血+，尿蛋白+，T-BILL42.7nmol/L，D-BILL16.7umol/L，I-BIL26umol/L，LDH896U/L，CPAb（IgM）+，血液抗凝呈沙粒状，离心血浆为红色。血型鉴定正反不符，正定型为B型，反定型为O型。怀疑患者血清中存在冷凝聚素或自身抗体。需进一步作血型血清学相关检查。

2.血型血清学相关检查

2.1试剂和仪器

2.1.1试剂 抗A抗B单克隆血清（上海血液生物医药有限责任公司 批号20190101）反定型红细胞（长春博迅生物技术有限公司批号20200721）ABO正反定型卡（北京九强生物技术股份有限公司批号GE0120191213）不规则抗体筛查红细胞（长春博迅生物技术有限公司批号20200803）抗人球蛋白微柱凝胶卡（长春博迅生物技术有限公司批号20200606）凝聚胺试剂（珠海贝索生物技术有限公司批号119062）

2.1.2仪器 爱康Aigel300，TDZ4-WS离心机，FYQ微柱孵育器 45°C恒温水浴箱。

2.2血型鉴定 常规血型鉴定，离心抗凝标本，按Aigel300操作程序上机自动检测判读，发报结果。

2.3吸收试验 取患者压积红细胞盐水洗涤3次，洗涤后的压积红细胞分为三份，标识123号，1份加患者血清1ml，混匀置4°C冰箱1小时，不时震荡，离心取血清加入2号压积红细胞管中，重复操作至3号管，得到的血清作反定型和配血主侧用。试验目的吸收自身抗体和冷凝聚素。

2.4放散试验 压积红细胞洗涤6次，1：3比例配制红细胞悬液，置45°C水浴箱30分钟，不时振摇，离心取上清液（放散液），红细胞作正定型和交叉配血次侧用。实验目的，去除红细胞上吸附干扰物质和致敏的不完全抗体。

2.5间接和直接抗人球蛋白试验 用微柱凝胶抗人球蛋白卡，按操作说明执行。

2.6输血相容试验 用凝聚胺法和抗人球蛋白卡法进行交叉配血试验。

3.结果

3.1常规血型鉴定结果见表1，处理前正反定型不符，经放散吸收处理后患者血型为B型。

3.2血型血清学实验结果见表2.患者不规则抗体筛查阳性，直接抗人球蛋白阳性，血清中有高效价冷凝聚素，患者血清中含有抗B-IgG抗体。

3.3患者处理前和吸收放散处理后的样本与B型、O型供血样本用凝聚胺和抗人球蛋白卡法交叉配血都不相容。

4.讨论

4.1冷凝聚素是人体内产生的抗自身红细胞的嗜异性冷抗体，抗体为IgM类，在体外室温下可与自身红细胞或ABO系统及其他血型红细胞发生非特异性凝聚反应;一般健康人血清中含量少，凝集效价小于1：16，高效价冷凝聚素在某些病理情况下如自身免疫性贫血、肿瘤、细菌支原体感染、EB病毒感染等可诱导产生^〔2〕。

4.2不规则抗体是指不符合血型命名原则，抗A、抗B以外的血型抗体，抗体为IgG类，又称为意外抗体，是引起输血溶血反应的主要因素之一^〔3〕。不规则抗体的产生主要原因：机体免疫功能异常、恶性肿瘤、输血、妊娠、烧伤、器官骨髓移植、细菌感染、药物影响等，不规则抗体是引起机体自身溶血性贫血的主要原因。

4.3本例患者血清中有高效价冷凝聚素，致血液离体自凝，常规血型鉴定正反不符;不规则抗体阳性，直接抗人球蛋白阳性，红细胞被抗B-IgG抗体致敏，引起患者自身溶血。

4.4有自凝现象的标本，进行血型鉴定和交叉配血时要高度警觉重视，必需进一步进行血型血清学试验，利用吸收放散等方式，去除冷凝聚素或自身抗体等干扰因素^〔4〕，用不同的检测方法，准确判断患者血型，检测出患者可能存在的意外抗体，选择合适的配血方法，保证临床输血安全。

4.5本例患者血型为B型，不规则抗体阳性，直接抗人球蛋白阳性，患者血清中有抗B-IgG抗体，可判断该患者为自身免疫溶血性贫血。与B型O型供血者用凝聚胺和抗人球蛋白卡法交叉配血都不相容。依据输血安全原则，次患者不宜异体输血。

参考文献：

[1]刘景汉，兰烔采.临床输血学〔M〕.人民卫生出版社：2011.

[2]杨世明，张勇萍，潘小莉.冷凝聚素综合征的血清学特征及检测方法探讨[J].细胞与分子免疫学杂志，2006，22（4）：54-543.

〔3〕王憬惺，严力行.输血技术〔M〕.人民卫生出版社，2013.

〔4〕任伟，陈慧欣，韩杰.ABO血型正反定型不一致原因分析及解决策略〔J〕.临床血液学杂志，2016，29（4）：289-291.346D3776-91A6-4529-A8C4-F2612466EBF5