气相色谱-质谱法同时测定水中唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺

雷海燕，史晓琼

（核工业二0 三研究所，陕西 西安 710086）

唑嘧菌胺是一种高选择性的杀菌剂，可高效灵活地防治霜霉病和晚疫病；嘧菌胺对苹果和梨上的黑星病茵，黄瓜、葡萄、草莓和番茄上的灰葡萄孢菌有防效；嘧菌环胺具有保护、治疗、叶片穿透及根部内吸活性，可做大麦种衣剂用药。3 种杀菌剂因具有广谱、高效等特点而广泛应用于农业生产，但使用过程中仅20%左右起到实际杀菌等作用，其他大部分通过降水、农田灌溉退水等方式进入地表水、地下水和土壤中，从而对生态环境系统造成一定危害[1，2]。因此，加强对水中唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺等杀菌剂农药的监测具有一定的现实意义。

目前，唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺的分析方法主要有气相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱法和液相色谱-质谱法等，其中气相色谱-质谱法可提高目标化合物定性和定量的准确性，抗干扰能力较强[3-6]。本文通过优化传统的液液萃取法，建立了气相色谱-质谱法测定地表水中唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺的分析方法[7]。

1 实验部分

1.1 主要仪器和试剂

7890B-5975C 型气相色谱质谱联用仪（美国安捷伦）；RE-52AA 型旋转蒸发器（上海亚荣生化）；JC-WD-24S 型氮吹仪（山东聚创环保）；Sunner-P 型超纯水机（德立世）。

乙腈中唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺溶液标准物质，标准值均为100μg·mL-1，农业部环境保护科研监测所；乙腈、石油醚、正己烷、二氯甲烷，均为色谱纯，迪马公司；无水Na2SO4、NaCl，均为分析纯，沈阳新化试剂公司。

1.2 仪器条件

色谱条件 VF-5MS 毛细管色谱柱（30m×0.25 mm×0.25μm）；载气：高纯He，流速1.0mL·min-1；不分流进样；进样口温度250℃，进样量1.0μL。升温程序：50℃保持1min，以20℃·min-1升至170℃，再以10℃·min-1升至240℃，保持8min。

质谱条件 碰撞气为高纯Ar；EI 离子源，电子能量70eV；离子源温度230℃；传输线温度300℃；多反应监测模式（MRM）；溶剂延迟时间4min。唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺质谱参数见表1。

表1 3 种杀菌剂的质谱参数Tab.1 Mass spectrum parameters of three fungicides

1.3 水样处理流程

取待测水样500mL 于分液漏斗中，加入20g NaCl和50mL 二氯甲烷∶乙腈（V∶V=1∶1）溶液，振摇分液漏斗数次后排气，再振摇5min 后静置分层，放出水相。将有机相通过装有无水Na2SO4的玻璃漏斗去除水分，收集于锥形瓶中。将萃取液置于旋转蒸发器在45℃条件下浓缩至5mL 左右，转移至氮吹离心管中。用少量乙腈洗涤锥形瓶2～3 次，合并至离心管中。将离心管置于氮吹仪中，氮吹浓缩至近干，用乙腈定容至1mL，按气相色谱质谱条件进行分析。

2 结果与讨论

2.1 萃取试剂的确定

液液萃取前处理条件中，萃取溶剂的选择对检测结果准确度影响较大，因此，需要对前处理萃取溶剂进行选择。配制浓度为20.0μg·L-1唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺的样品溶液，按1.3 条件，分别选择乙腈、二氯甲烷、石油醚和二氯甲烷∶乙腈（1∶1）为萃取试剂，考察对样品的富集效果。结果见表2。

表2 萃取剂对3 种杀菌剂回收率影响（%）Tab.2 Effect of extractant on the recoveries of three fungicides（%）

由表2 可知，选择二氯甲烷∶乙腈（1∶1）萃取液时，唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺的测试回收率最高。

2.2 线性范围和检出限

用乙腈稀释唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺标准溶液，配制成3 种农药浓度分别2.00、5.00、10.0、30.0、50.0、100μg·L-1的标准系列溶液。采用本方法对唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺标准系列进行测定，以3 种农药的浓度为横坐标,信号响应值为纵坐标绘制标准曲线。

取1L 浓度为10.0μg·L-1唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺的混合水样，按本方法平行测定7 次，计算7次测定结果的标准偏差（s），以3.14 s 确定方法检出限[8]。

由表3 结果表明，唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺在2.00～100μg·L-1浓度范围内线性关系良好，相关系数均大于0.999，线性方程、相关系数、检出限见表3，选择离子对色谱图见图1。

表3 线性参数和检出限Tab.3 Linear parameters and detection limits

图1 3 种杀菌剂质谱图Fig.1 Mass spectra of three fungicides

2.3 精密度实验

配制浓度为8.00μg·L-1唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺的水样，按本方法重复实验6 次。结果见表4。

表4 精密度试验结果Tab.4 Precision test results

由表4 可知，3 种农药的相对标准偏差（n=6）为1.05%～1.85%，方法精密度良好。

2.4 样品加标回收试验

在3 份空白水样中，分别加入适量唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺标准液，按1.3 水样处理流程进行前处理，配制浓度分别为5.00、15.0 和45.0μg·L-1的加标测试液。在上述仪器条件下对3 种浓度的加标测试液进行分析,计算方法的加标回收率，结果见表5。

表5 加标回收试验结果Tab.5 Results of standard addition recovery test

由表5 可知，唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺3 种浓度的加标回收率在91.1%～98.0%，符合分析测试要求。

2.5 方法应用实例

分别取1L 本地区农田地表水（1#）、池塘地表水（2#）、地下水（3#）和化工园区地表水（4#）实际水样，按本方法流程进行前处理，按1.2 色谱和质谱条件分别进行测定，计算唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺检测结果。结果表明，4 份水样中均未检出唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺等杀菌剂的残留。

3 结论

本文采用二氯甲烷∶乙腈（1∶1）试剂富集水中残留的唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺，再采用气相色谱-质谱法进行分析。通过对方法的线性、检出限、重现性和加标回收率等参数的考察，该方法前处理操作简单，线性关系良好，检出限低，重现性和准确度高，可用于水中唑嘧菌胺、嘧菌胺和嘧菌环胺等杀菌剂残留的日常分析。