一例放养鸡场马立克氏病的诊断

周 林，钱 林，王 娜，鲍 娟，邓位喜，杨泓涛，杨玉能，孙宝盛，经有林

（遵义职业技术学院，贵州 遵义 563000）

马立克氏病（Marek’s disease，MD）是由马立克氏病病毒（Marek’s disease virus，MDV）引起鸡的高度接触性传染性肿瘤疾病，通常以感染性腺、肌肉、外周神经、虹膜、眼、皮肤及各脏器的单核细胞浸润和形成肿瘤病灶为特征［1］。1961 年在英国的比格斯建议下定名为马立克氏病［2］。该病一直受到兽医工作者和社会各界的关注［3］。

1 病原特征

马立克氏病病原是细胞结合性疱疹病毒，马立克氏病病毒在鸡体的羽毛囊上皮中形成带囊膜的完整病毒粒子，直径为273～400 nm。在组织培养的感染细胞核中可见到直径为85～100 nm 的六角形病毒颗粒或核衣壳，偶尔也在细胞浆中见到［4］。不同品种的鸡对马立克氏病的易感性不同，采用马立克氏病疫苗可有效地控制该病的感染，但其免疫效果受诸多因素的影响。

2 流行病学特点

马立克氏病一年四季均可发生，主要危害2～5月龄鸡，野鸡、鹌鹑、火鸡也有发病，哺乳动物不感染马立克氏病病毒。病鸡和带毒鸡是该病的主要传染源，患病鸡的皮肤和羽毛囊上有大量的病毒，从病鸡身上脱落带毒的皮屑，是主要的传播因素。该病病毒在自然条件下有较强的抵抗力，鸡感染后可以长期排毒，甚至终生带毒［4］。根据患鸡的不同临床表现和病变发生的部位，可分为4 种类型，神经型、内脏型、眼型和皮肤型，有时病鸡呈混合型发病。

3 病例情况与临床症状

以贵州省正安县送检的60 ～90 日龄疑似马立克氏病病鸡为研究对象。部分患鸡羽毛蓬松杂乱，鸡冠和肉髯苍白；部分病鸡拉白色或黄色稀粪，部分患鸡张口呼吸等，部分病鸡只出现一侧或两侧的关节肿大，可以站立缓慢行走，但却摇晃不稳（图1）。

图1 患病鸡腿部情况

4 病理变化

对病鸡进行解剖，可见马立克氏病的主要病理变化，如图2。

图2 患病鸡内脏情况

5 实验室诊断

根据病例的临床表现、病理变化情况综合判断，初步诊断为马立克氏病，确诊需实验室诊断。取病鸡肝脏、肌胃、肝脏、肾脏等组织提取样本检测DNA。 上 游 引 物5＇ －TACTTCCTATATAGATTGAGACCGT－3＇，下游引物5＇－GAGATCCTCGTAAGGTGTAATATA－3＇。以提取的总DNA 为模板，用多功能梯度PCR 仪扩增。取模板1 μL，2×TaqPCR Master Mix 12.5 μL，上下游引物各1 μL，补足ddH2O 至25 μL。反应条件，94 ℃预变性4 min；94 ℃变性45 s，55 ℃退火45 s，72 ℃延伸45 s，共35 个循环；72 ℃延伸10 min。取7 μL PCR 反应产物经1%琼脂糖凝胶电泳，在432 bp 处出现特异性条带（图3）。该病确诊为马立克氏病。

图3 马立克氏病DNA 扩增结果

6 预防措施

6.1 加强饲养管理

加强饲养管理，禁用发霉变质的饲料，每天清理粪便，定期对鸡舍消毒，鸡场进出口均设立消毒区，饲料中的营养成分要全面，尤其是维生素和微量元素要满足畜禽的营养需要。

6.2 隔离育雏

雏鸡容易被感染，尤其是1 日龄的雏鸡。在出壳当天进行马立克氏病疫苗接种后，将雏鸡隔离在清洁并消毒过的圈舍中饲养至少4 周，这可减少雏鸡感染马立克氏病的机会。

6.3 淘汰病鸡、无害化处理

在鸡场一旦发现马立克氏病的疑似病例，立刻将其隔离饲养，经确诊后，对其做深埋处理，并立即对鸡场清洁消毒。

6.4 做好预防

马立克氏病尚无治疗的特效药物，疫苗接种是预防该病的有效方法。

7 小结与讨论

马立克氏病是严重危害养鸡业健康发展的病毒性传染病，具有高度接触传染性，病鸡和带毒鸡的排泄物、分泌物具有传染性［5］，可通过直接或间接接触而感染。马立克氏病不能垂直传播，病毒主要经空气传播由呼吸道侵入体内。神经系统病变表现为神经干增粗，横纹消失，失去正常颜色，呈黄白色或灰白色，个别的神经干水肿、出血，多为单侧病变，可两侧对比诊断［6］。鸡马立克氏病是危害养鸡业的三大疫病之一，尚无特效药，所以该病防大于治，养殖户要制定综合防控措施。对于该病的预防，养殖户要加强饲养管理，做好消毒工作，做好免疫接种工作［7］。一旦发病，要将病死鸡无害化处理，并将鸡舍严格消毒。做好预防工作才能降低马立克氏病的发生，实现养鸡的较高收益［8］。