病理常规HE切片质量问题原因及措施

杨阳

关键词：病理学检测;HE切片;质量问题;发生原因;处理措施

【中图分类号】 G644.5 【文献标识码】 A       【文章编号】2107-2306（2022）06--01

Key words：pathological detection;HE section;quality problem;cause of occurrence;treatment measures

HE切片其實就是应用苏木精-伊红染色切片，辅助病理科进行相关检查，属于最常见制作组织切片方法，更是真实显现人体病变组织真实情况的重要环节[1]。从实际检验可发现，HE切片质量水平直接影响病理诊断准确性与可靠性。在病理检验期间，相关人员必须遵循严格要求采集病变组织，并对组织进行准确染色，制作相应切片，才能保障切片实际质量[2]。但从实际工作可发现，部分病理科工作人员的工作经验较少，日常操作存在不当现象，经常有染色不均、模糊不清、薄厚不均、对比不明显等多种不良现象，所以最终病理学诊断结果受到影响。本文主要分析病理常规HE切片质量问题原因及措施，报道内容如下。

1.资料与方法

1.1临床资料

2020年7月到2021年12月，选取进行病理常规检查的HE切片5000张进行研究，包含胃镜标本1421张，穿刺标本2001张，宫颈活检标本987张，其他标本591张。

HE切片使用标准[3]如下，（1）切片完整性较好，厚度处于4-6μm，切片薄厚度相对均匀，无刀痕、褶皱存在;（2）细胞核及细胞质染色分明，洁净透明，红蓝颜色湿度，封固相对美观，观察难度偏低，可辅助临床进行准确诊断。

1.2方法

HE切片质量问题，（1）苏木精染色过淡：苏木精染色比较淡，所以细胞核染色有苍白以及暗淡等多种表现。多因苏木精染色期间液体在切片上的停留时间偏短、苏木精有过度氧化问题、分化时间偏长等问题发生，继而影响苏木精染色问题，无法满足HE切片的使用标准。（2）伊红着色偏淡：应用伊红溶液时，溶液PH值超出相应标准要求，或因染色期间的蓝化液过度残留、切片过薄、乙醇脱水时间过长等原因导致。（3）脱蜡后有白色斑点：切片烤片这一环节中有持续时间不足、温度偏低、切片并未充分烤干、切片中的二甲苯停留时间偏短、二甲苯应用时间过长，最终导致切片脱蜡不完全，导致脱蜡后的切片有白色斑点形成。（4）细胞核颜色改变：主要指细胞核存在红色改变或是棕色改变这一现象，多因苏木精染色液存在过度氧化现象，或实际应用苏木精进行染色时存在切片返蓝不足，或因伊红染色问题诱发伊红溶液覆盖细胞核问题。（5）苏木精染色偏深：实际染色过程中，有苏木精染色过度偏深现象，导致细胞质位置受到挤占。导致该质量问题发生的原因较多，如病理厚度超标、切片在苏木精染色这一环节的停留时间过长、苏木精的PH值偏高、切片及细胞质共染。

1.3统计学方法

研究涉及的计数资料与计量资料录入SPSS22.0统计学软件处理。

2.结果

500张切片中，一共有23张HE切片发生質量问题。见表一。

3.讨论

本文统计学结果显示，共有23张切片出现质量问题，问题类型一共有五种。（1）苏木精染色过淡：发生该问题后，及时实施切片重新染色，适当延长苏木精的浸泡时间，缩短切片分化时间，还可利用浓度1.5%的醋酸溶液重新调整切片PH值，增强苏木精的细胞核染色针对性，减少细胞质共染现象的发生。（2）伊红着色偏淡：针对这一问题，切片染色之前需提前测试伊红溶液的实际PH值，保证数值<5，尽可能将PH值控制在4.6-5.0范围中，保证染色效果达到标准。所所用伊红染色属于水溶性液体，容易被外界影响，比如残留自来水混入、醋酸溶液挥发等，均可升高伊红溶液的PH值，对实际着色效果造成影响，所以可将这类伊红溶液更换成浓度0.2%的醋酸化伊红醇溶液，并在染伊红之前给予浓度95%的乙醇溶液浸泡。但切片必须进行充分蓝化，有效清除弱碱性溶液，然后进行下一步检测操作。在获取切片后，还需检查切片厚度，及时发现切片太薄这一问题，预防乙醇脱水时间过程导致的颜色稀释问题。（3）脱蜡后有白色斑点：为预防该质量问题的发生，需保证切片烘烤时间充足，有效清除切片中存在的水分。若存在切片烘烤时间超长现象，切片有一定几率发生脱落问题，后续进行处理是难以补救的，只能更换新的切片。给予二甲苯进行脱蜡时，必须保证时间充足。若有脱蜡不完全现象，可进行适当加温或适当延长脱蜡时间，用于脱蜡环节的二甲苯必须定时更换，比如500ml二甲苯的切片处理量不能超过500张。（4）细胞核颜色改变：为预防该质量问题，需提前做好苏木精质量检查。若有过度氧化现象或是变质现象发生，及时更换成质量合格的苏木精，染色期间必须提供返蓝溶液浸泡，保证蓝化时间合格且充足。（5）苏木精染色偏深：发生该问题后分析原因并针对性处理，如切片过厚则需重新切片，非切片过厚导致则需进行重新染色。

由上可知，明确HE切片质量问题的发生原因并预防，可提升切片质量。

参考文献：

[1]徐立，胡瑞斌，李兆波，等.STZ诱导糖尿病大鼠胰腺及肝脏石蜡切片HE染色改进方法[J].临床与实验病理学杂志，2019，35（9）：1122-1124.

[2]陈余朋，张声，唐坚清.加热诱导抗原修复技术对HE染色淋巴瘤核固缩的影响[J].临床与实验病理学杂志，2021，37（1）：104-106.

[3]菅晓婷，付超，岳丹，等.实验小鼠脂肪组织石蜡切片制作方法的改进[J].临床与实验病理学杂志，2020，36（6）：742-743.