厚鳞柯果实不同浓度乙醇浸出物的探究

田甜 黄清泉 蒋明艳 曾祥林 文金华 黄月明

摘 要：为了对厚鳞柯果实不同浓度乙醇浸出物进行探究，本试验测定了乙醇在不同的浸提浓度下醇浸出物含量。结果表明，通过单方向方差分析得出60%乙醇浸提效率显著高于其他浓度水平，通过厚鳞柯果实醇浸出物含量对乙醇浓度的拟合函数分析，得出乙醇的最优浸提浓度为67.60%。综合考虑实验操作的便捷性和高效性，参照2020版《中国药典》第四部通则2201中热浸法对厚鳞柯果实醇浸出物含量进行测定时，用乙醇作为浸出溶剂，且乙醇的最优浸提浓度为60%（V/V），为厚鳞柯果实醇浸出物的测定以及后续质量标准制定提供了一定的基础。

关键词：厚鳞柯;果实;乙醇浓度;醇浸出物

Study on Different Concentration Ethanol Extracts from Fruit of Lithocarpus pachylepis

TIAN Tian1， HUANG Qingquan2， JIANG Mingyan2， ZENG Xianglin1， WEN Jinhua1， HUANG Yueming1

（1.Guangxi Minsheng Sino Assessment Group， Nanning 530007， China; 2.Guangxi Institute for Food and Drug Control， Nanning 530021， China）

Abstract： In order to explore the ethanol extract of different concentrations of Lithocarpus pachylepis fruit， the content of ethanol extract under different extraction concentrations was determined. The results showed that the extraction efficiency of 60% ethanol was significantly higher than that of other concentration levels by one-way ANOVA， and the optimal extraction concentration of ethanol was 67.60% by fitting function analysis of ethanol extract content to ethanol concentration. Comprehensive considering convenience and efficiency of the experimental operation， it was recommended to use ethanol as the extraction solvent for the determination of alcohol extract content of Lithocarpus pachylepis fruit by referring to the hot leaching method of general rule 2201， part IV of Chinese Pharmacopoeia， 2020 edition， and the optimal extraction concentration of ethanol was 60%（V/V）. The results provided a basis for the determination of alcohol extract and quality standard establishment of Lithocarpus pachylepis fruit. At the same time， it fills the research gap at home and abroad.

Keywords： Lithocarpus pachylepis; fruit; ethanol concentration; alcohol extract

厚鱗柯（Lithocarpus pachylepis）属于壳斗科柯属的一种。《中国植物志》[1]记载“其种仁煮熟后可食用”，现在常见的是以果实泡酒或煲汤的方式食用。厚鳞柯果实在市场上经常作为补肾壮阳、治疗肾虚疾病的民间中药材或保健食品售卖，但目前对于其药用价值并无任何书籍记载，也缺乏系统研究和报道，而且一些不法分子甚至以假乱真，欺骗消费者，对人们的生命健康和财产造成损失，因此制定厚鳞柯果实的质量标准很有意义[1-3]。有研究探究了木姜叶柯、多穂柯、烟斗柯等多数柯属植物的叶片或种仁中各品质指标的含量，而对厚鳞柯果实品质的探讨尚处于空白[4-6]。

醇浸出物是评价中药材质量的一个重要指标，而且不同的醇浓度下醇浸出物含量不同[7-9]。本试验对厚鳞柯果实不同浓度乙醇浸出物进行了探究，为厚鳞柯果实醇浸出物的测定以及后续质量标准制定提供一定的基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

本试验中厚鳞柯果实是于2020年10月收集于广西。将全果通过粉碎机粉碎后，过60目尼龙筛，自封袋封装，冷藏（0～4 ℃）保存。无水乙醇（分析纯，成都科龙）;纯水。

1.2 仪器设备

BSA224S型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）;DK-98-II型万用电炉（天津市泰斯特仪器有限公司）;ZKB-1A型真空泵（广东环凯微生物科技有限公司）;HH-S8型水浴锅（江苏金怡仪器科技有限公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 试验方法

本试验参照2020版《中国药典》第四部通则0832烘干法[10]测得供试样品中水分含量为10.38%，然后参照第四部通则2201热浸法[10]测定厚鳞柯果实醇浸出物含量，其中采用的浸出溶剂为乙醇。具体测定步骤为精密称取样品3 g，置于250 mL锥形瓶中，加入不同浓度的乙醇75 mL，密塞，称定重量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h;放置冷却后，取下锥形瓶，密塞，再次称定重量。用不同浓度的乙醇，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 mL，置于已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥 3 h，再置于干燥器中冷却30 min，精密称定重量，以干燥样品计算样品中醇溶性浸出物的含量（%）。其中乙醇的浓度（V/V）共设置6个平行，分别为0%、25%、50%、60%、80%及95%，每个处理重复3次。

1.3.2 数据处理

采用SPSS 22.0进行方差分析，多重比较方法为LSD法;采用Origin 2018进行函数拟合和制图。

2 结果与分析

2.1 厚鳞柯果实不同浓度乙醇浸出物含量的差异

对于厚鳞柯果实，当乙醇浓度由0%到95%时，醇浸出物含量首先由7.14%增加到9.03%，然后又减少到7.50%，表现为先增加后减少的趋势，其中在乙醇浓度为60%时，醇浸出物含量达到最大。单方向方差分析表明，不同浓度乙醇浸出物含量差异极顯著，P（240.81，5，12）=1.34×10-11<0.01。由图1可知，60%乙醇浸提效率最高，醇浸出物平均含量达到9.03%，而且显著高于其他浓度水平，是其他浓度水平平均浸提效率的1.22倍;在其他浓度水平中，50%乙醇浸提效率显著高于80%和95%乙醇，醇浸出物平均含量为7.75%;纯水和25%乙醇的浸提效率最低，而且显著低于其他浓度水平，醇浸出物平均含量仅7.16%。

2.2 厚鳞柯果实醇浸出物含量对乙醇浓度的拟合函数曲线分析

将乙醇浓度作为自变量c，厚鳞柯果实醇浸出物含量作为因变量w，通过多项式拟合，得出最优多项式拟合函数为w=7.10-0.017×c+0.0013×c2-1.16×10-5×c3（调整后R2=0.536），拟合曲线见图2。方差分析表明，回归效应极显著，P（158.49，4，2）=0.006 3<0.01。所以该函数模型能够有效解释原始数据，模型可靠。当乙醇浓度在0～100%变化时，通过规划求解，得出在乙醇浓度为67.60%时，醇浸出物含量最高，达到8.31%。所以通过曲线拟合，得出在厚鳞柯果实醇浸出物含量的测定过程中，乙醇的最优浸提浓度为67.60%。综合考虑实验操作的便捷性和高效性，推荐乙醇的最优浸提浓度为60%或70%。

图中小写字母（a、b、c、d）表示不同浓度乙醇浸出物含量的多重比较结果（P<0.05）。

3 结论与讨论

本试验对厚鳞柯果实不同浓度乙醇浸出物进行了探究。当乙醇浓度逐渐增大时，醇浸出物含量表现为先增加后减少的趋势，这与相关研究中所表明的变化一致[7-9]。本试验通过单向方差分析，表明60%乙醇浸提效率显著高于其他浓度水平，通过厚鳞柯果实醇浸出物含量对乙醇浓度的拟合函数分析，得出乙醇的最优浸提浓度为67.60%。综合考虑实验操作的便捷性和高效性，参照2020版《中国药典》第四部通则2201热浸法[10]对厚鳞柯果实醇浸出物含量进行测定时，推荐用乙醇作为浸出溶剂，且乙醇的最优浸提浓度为60%（V/V）。这为厚鳞柯果实醇浸出物的测定以及后续质量标准制定提供了一定的基础。

壳斗科柯属植物的开发利用价值有很多，例如从壳斗科植物种子中提取的淀粉可供食用和酿酒[11];柯属植物中鞣质含量高，从柯属植物中提取的鞣质可用于制备栲胶等[4];具有药用价值的柯属植物也有很多，例如从木姜叶柯（Lithocarpus litseifolius）和多穗柯（Lithocarpus polystachyus）的叶片中提取的甜味素为黄酮苷类物质，属低热高甜度物质，对糖尿病有一定疗效[12]。广西西部（那坡县）是厚鳞柯的主产区之一，厚鳞柯果实在民间主要作为药食同源的“补品”食用，而目前国内外对厚鳞柯果实药用价值的研究报道罕见，所以探究厚鳞柯果实的药用价值、开发利用新的壮药资源很有意义。在后续研究中，可对厚鳞柯果实中各类化合物进行提取、分离、纯化和鉴定，探讨厚鳞柯果实有无药用价值，为厚鳞柯果实的开发利用提供参考。

参考文献

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基金项目：2020年广西药品监督管理局药品安全科研项目（桂药监科[2020]内-01）。

作者简介：田甜（1989—），女，山西翼城人，硕士，农艺师。研究方向：食品农产品质量安全检测及研究。