饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔生长性能、屠宰性能、肌肉品质和抗氧化性能的影响

刘公言 白莉雅 孙海涛 李明勇 刘 曼 刘 策 姜文学 杨丽萍 王文志 王 鹏 高淑霞*

(1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，济南250100；2.青岛康大兔业发展有限公司，国家农业农村部兔遗传育种与繁殖重点实验室，青岛266000；3.山东正宇兔业有限公司，临沂273400)

高档功能性食品是指对人类身体某种或多种机能有益处、有足够营养效果且能改善健康状况或能减少患病的食品。基本特征包括：一是来自于天然成分；二是可以作为食物在日常饮食中食用；三是可被人体消化吸收且具有增强人体某些机能、改善身体和心理状况、延缓衰老甚至预防和治疗某些疾病等功能[1]。兔肉具有高消化率、高蛋白质、高赖氨酸、低脂肪、低能量、低胆固醇等特点，是高血压及心血管病患者的理想营养肉品，被认为是一种理想的功能性食品[2]。维生素E和硒是动物机体重要的抗氧化物质，二者相互协同，共同抵御氧化物质对机体的损伤。亚硒酸钠等传统无机硒源具有吸收率低、毒性高等缺点，且对环境产生污染；酵母硒属于优质的有机硒源，吸收率高，在满足动物对硒的生理需求后，还可以在动物体内储存。因此，在动物生产上使用有机硒取代无机硒具有重要生态意义。王旭等[3]研究报道，饲料中添加维生素E可显著提高香鱼仔稚鱼成活率及肝胰脏抗氧化酶活性。高海桐等[4]研究报道，饲粮中添加酵母硒能够显著提高猪肉的常规营养成分含量，改善猪肉的食用品质，提高贮藏品质。饲粮中联合添加酵母硒和维生素E可以提高肉鸡生长性能，改善肌肉品质，增强肌肉抗氧化能力[5]。张浩等[6]研究表明，饲粮中添加酵母硒有提高产蛋鸡生长性能和蛋品质的趋势，也有提高鸡蛋中硒富集效率的趋势。饲粮中添加0.3 mg/kg有机硒可提高湖羊的生长性能和肌肉品质，提高肌肉和器官中硒含量[7]。然而，近年来关于具有抗氧化功能的富硒兔肉等研究报道较少。因此，本试验以闽西南黑兔为研究对象，探讨饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔生长性能、屠宰性能、肌肉品质和抗氧化性能的影响，为开发功能性兔肉产品提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验设计

试验选用35日龄、体重相近、断奶的闽西南黑兔160只，随机分为4组，每组10个重复，每个重复4只(公母各占1/2)。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮，不额外添加维生素E和酵母硒；Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别在基础饲粮中添加100 mg/kg维生素E、0.15 mg/kg硒和100 mg/kg维生素E+0.15 mg/kg硒。维生素E添加形式为DL-α-生育酚乙酸酯(以α-生育酚计)，硒添加形式为酵母硒(以硒计)，添加量参考文献[8]。预试期5 d，正试期70 d。饲粮制成长度1.0～1.5 cm，直径约0.3 cm的全价配合颗粒饲料。基础饲粮配方参考De Blas等[9]，基础饲粮组成及营养水平见表1。饲粮中α-生育酚和硒含量实测值见表2。试验兔在封闭兔舍内每笼2只饲养，试验期间，试验兔每天饲喂2次，全程自由采食和饮水。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

表2 饲粮中α-生育酚和硒含量实测值(风干基础)

1.2 样品采集与制备

试验结束当天，每个重复选取1只与该组平均体重相近的试验兔，心脏采集血液，分离血清样品，-20 ℃保存，用于血清抗氧化指标测定。同时，采集背腰最长肌(第1和第7腰椎之间)，测定肌肉物理性状、营养成分和抗氧化指标。

1.3 测定指标和方法

1.3.1 生长性能

在试验正式开始(40日龄)和结束当日(110日龄)，称量每个重复肉兔重量。平均日增重(ADG)按每个重复肉兔重量除以试验天数和试验兔只数计算所得。平均日采食量(ADFI)按每个重复总采食量除以试验天数和试验兔只数计算所得。料重比(F/G)按总采食量除以总增重计算所得。

1.3.2 屠宰性能

试验结束前1天晚上禁食12 h，试验结束当天每个重复选取1只与该组平均体重相近的试验兔屠宰，称重并记录宰前活重。颈部放血处死后，立即剥皮，在腕关节处去除前肢及在跗关节处去后肢，移走肠道及内容物和泌尿生殖器官后(保留头、气管、食管、胸腔器官、肝脏和肾脏及肾周脂肪)称重即为胴体重[10]；胴体重在第一颈椎处去头，同时去除气管、食管，并保留肝脏(摘去胆囊)、肾脏及肾周脂肪称重，即为半净膛胴重。半净膛胴胴体重去心脏、肝脏、肾脏及肾周脂肪后称重即为全净膛胴重，同时对心脏、肝脏(摘去胆囊)和肾脏进行称重，并分别除以宰前活重，计算屠宰率、半净膛屠宰率、全净膛屠宰率、心脏指数、肝脏指数和肾脏指数。

1.3.3 肌肉物理性状

采集背腰最长肌测定pH、肉色[亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值]、剪切力、滴水损失、失水率和熟肉率，具体测定方法参考文献[11]。

1.3.4 肌肉营养成分

肌肉中干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)和粗灰分(Ash)含量分别采用国家标准GB 5009.3—2016[12]、GB 5009.5—2016[13]、GB/T 14772—2008[14]和GB/T 9695.18—2008[15]测定。饲粮和肌肉中维生素E(α-生育酚、β-生育酚和γ-生育酚)含量采用国家标准GB/T 9695.30—2008[16]在液相色谱仪(Agilent，型号：1260)上测定。饲粮和肌肉中微量元素(铁、铜、锌、锰和硒)含量采用国家标准GB 5009.268—2016[17]在电感耦合等离子体质谱仪(Thermo，型号：iCAPQ)上测定。

1.3.5 血清和肌肉抗氧化指标

血清和肌肉谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量以及总抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)分别使用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定(货号分别为A005、A001-1、A003-1和A015-3-1)。

1.4 数据处理

采用SAS 9.1.3统计软件中的GLM程序进行数据的方差分析，采用Duncan氏法进行数据的多重比较，结果以平均值±标准差表示，P<0.05为差异显著。

2 结 果

2.1 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔生长性能的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔生长性能的影响见表3。由表可知，饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔终末体重、平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著影响(P>0.05)。

表3 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔生长性能的影响

2.2 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔屠宰性能的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔屠宰性能的影响见表4。由表可知，饲粮中添加维生素E和酵母硒对宰前活重、胴体重、半净膛胴重、全净膛胴重、心脏重、肝脏重和肾脏重以及屠宰率、半净膛屠宰率、全净膛屠宰率、心脏指数、肝脏指数和肾脏指数均无显著影响(P>0.05)。

表4 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔屠宰性能的影响

2.3 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉物理性状的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉物理性状的影响见表5。由表可知，饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉肉色a*和b*值有显著影响(P<0.05)；其中，Ⅳ组的肌肉肉色a*值显著高于对照组(P<0.05)，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的肌肉肉色b*值显著高于对照组(P<0.05)。饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉pH、肉色L*值、剪切力、滴水损失、失水率和熟肉率均无显著影响(P>0.05)。

表5 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉物理性状的影响

2.4 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉营养成分含量的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉营养成分含量的影响见表6。由表可知，饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中DM、CP、EE和Ash含量均无显著影响(P>0.05)。

表6 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉营养成分含量的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中α-生育酚含量有显著影响(P<0.05)；其中，Ⅱ组和Ⅳ组肌肉中α-生育酚含量显著高于对照组(P<0.05)。饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中β-生育酚和γ-生育酚含量均无显著影响(P>0.05)。

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中铜、锰和硒含量有显著影响(P<0.05)；其中，Ⅲ组和Ⅳ组肌肉中铜和锰含量显著低于对照组和Ⅱ组(P<0.05)，Ⅲ组和Ⅳ组肌肉中硒含量显著高于对照组(P<0.05)。饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中铁和锌含量均无显著影响(P>0.05)。

2.5 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔抗氧化性能的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔抗氧化性能的影响见表7。由表可知，饲粮中添加维生素E和酵母硒对血清中GSH-Px活性、MDA含量和T-AOC有显著影响(P<0.05)；其中，Ⅲ组和Ⅳ组血清中GSH-Px活性显著高于对照组(P<0.05)，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组血清中MDA含量显著低于对照组(P<0.05)，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组血清中T-AOC显著高于对照组(P<0.05)。饲粮中添加维生素E和酵母硒对血清中SOD活性无显著影响(P>0.05)。

表7 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔抗氧化性能的影响

饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中SOD活性、MDA含量和T-AOC有显著影响(P<0.05)；其中，Ⅳ组肌肉中SOD活性显著高于对照组(P<0.05)，Ⅳ组肌肉中MDA含量显著低于对照组(P<0.05)，Ⅱ组和Ⅳ组肌肉中T-AOC显著高于对照组(P<0.05)。饲粮中添加维生素E和酵母硒对肌肉中GSH-Px活性无显著影响(P>0.05)。

3 讨 论

3.1 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔生长性能和屠宰性能的影响

维生素E是一类脂溶性维生素，包括了α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚及三烯酚等，主要参与动物前列腺素的合成、血液凝固、稳定细胞膜结构和调节免疫反应，是机体重要的抗氧化成分。维生素E缺乏主要导致肉兔肌肉发育不良和繁殖性能下降，妊娠母兔流产率和死胎率增加[18]。Oriani等[19]在61日龄肉兔饲粮中添加0、60、150或375 mg/kg α-生育酚醋酸酯，连喂4周，发现期对肉兔生长性能没有产生显著影响。同样，Eiben等[20]研究发现，在最后7周的育肥期内，饲粮中添加150 mg/kg维生素E和饲粮中添加60 mg/kg维生素E饲喂的育肥兔之间生长性能不存在显著差异。张伟等[21]研究表明，在生长肉兔饲粮中添加不同水平的维生素E不能改变其生长性能，然而富含维生素E的饲粮(200 mg/kg)能够减少种公兔自由基的产生并提高精液品质(精子成活率、精子膜的完整性和精子活力等)，能够提高种兔繁殖性能[22]。本研究结果发现，饲粮中单独添加维生素E或联合添加酵母硒对育肥兔生长性能均无显著影响，与上述研究结果基本一致。

在大多数畜种中，微量元素硒与维生素E密切相关。硒是GSH-Px重要组成部分，该酶具有清除代谢过程中形成的过氧化物作用。Dokoupilová等[23]研究报道，在35日龄的肉兔饲粮中添加0.12和0.50 mg/kg硒(添加形式为酵母硒)，饲喂4周，并不影响其生长性能、饲料转化率和出栏率等。Marounek等[24]研究表明，饲喂硒含量为0.08或0.40 mg/kg饲粮的肉兔生长性能之间不存在显著差异。同样，Mattioli等[25]研究报道，在生长兔饲粮中添加0.46 mg/kg硒饲喂7周，也不会影响肉兔生长性能。Zhang等[26]研究发现，饲粮中硒添加水平对断奶至2月龄肉兔生长性能无显著影响。本研究结果发现，饲粮中单独添加酵母硒或联合添加维生素E对肉兔生长性能均无显著影响，与上述研究结果基本一致。

肉兔屠宰性能与生长性能密切相关。Castellini等[27]报道，在整个育肥期(35～85日龄)单独和联合补充饲喂添加维生素E(50和200 mg/kg)饲粮和维生素C(500和1 000 mg/L)饮水的肉兔的屠宰性状没有显著差异。本研究有关屠宰性能的结果与Castellini等[27]报道基本一致。其他研究也表明，肉兔育肥期的屠宰性能并不受饲粮维生素E和硒水平的影响[20,24-26]。

3.2 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔肌肉品质的影响

兔肉富含不饱和脂肪酸，肉兔全价配合饲料中维生素、硒等抗氧化剂的使用可以提高肉兔肌肉品质。殷启润等[28]研究表明，饮用维生素C溶液可显著增加肉鸡胸肌的肉色a*值，可在一定程度上维持肌红蛋白的含量。刘公言等[29]研究报道，饲粮中添加维生素B6能够降低肉兔的肉色L*值，提高肉色a*和b*值，对改善肌肉颜色具有重要意义。Gao等[30]研究发现，饲粮中添加维生素E能够缓解氧化应激，改善肌肉品质。然而，Kim等[31]研究发现，饲粮中添加维生素E或硒对肌肉pH没有显著影响。Corino等[32]研究表明，饲粮中添加α-生育酚乙酸酯能够稳定生肉的颜色。这可是因为饲粮中添加α-生育酚乙酸酯后肌肉中α-生育酚等抗氧化成分含量增加，进而改善肌肉颜色。

近年来，人们对饲粮中添加维生素E和硒对α-生育酚及硒在组织中的沉积、肉质特性、抗氧化能力和兔肉货架期的影响进行了相关试验，结果表明，α-生育酚在兔肉中富集是非常有效的，并且与饲粮的添加水平有较强的相关性[33-34]。Tres等[35]研究报道，每千克饲粮中添加100 mg α-生育酚乙酸酯可以使兔肉中α-生育酚含量增加3倍。另外大量研究表明，育肥兔饲粮中添加硒可使肌肉中硒含量增加2～4倍[23,25,36]。本研究结果表明，饲粮中添加维生素E和酵母硒能够增加肌肉中的α-生育酚和微量元素硒含量，且二者联合添加效果比单独使用效果更佳。

3.3 饲粮中添加维生素E和酵母硒对肉兔抗氧化性能的影响

本研究发现，饲粮中添加维生素E和酵母硒等抗氧化剂可以提高肉兔机体抗氧化性能。Castellini等[37]研究报道，饲粮中额外补充0.5 mg/kg硒并不能提高肉兔血清维生素E含量。育肥兔饲粮中补充0.1 mg/kg有机硒能够使兔肉中硒含量显著增加，然而当饲粮硒水平高于0.1 mg/kg时，它既不影响兔肉的GSH-Px活性，也不影响兔肉的氧化稳定性[23]。对于家禽和反刍动物等其他物种，饲喂含硒的不饱和脂肪酸藻类来源的抗氧化物质，且与维生素E联合使用，可对机体内的氧化稳定性产生积极的协同效应[38-39]。然而，肉兔机体组织在清理过氧化物时，对硒的依赖性小于其他哺乳动物。Lee等[40]报道，肉兔存在的大部分GSH-Px并没有用硒作辅助因子。另外，Erdélyi等[41]在肉兔的肝脏、肾脏、生殖器官和肌肉等也没有观察到硒与GSH-Px之间的任何关系。因此，与其他动物比较，肉兔在降低组织的氧化负荷上可能更多地依赖维生素E，而较少地依赖硒，其具体作用机理有待于进一步研究。

4 结 论

饲粮中添加维生素E和酵母硒对闽西南黑兔生长性能和屠宰性能无显著影响，但能够提高机体抗氧化性能，改善肌肉颜色，增加肌肉α-生育酚和硒含量，提高兔肉的营养价值。