急性脑卒中病人血浆组织蛋白酶S和血小板反应蛋白-1水平变化及其与预后的关系

黄天志，蔡 真，黄 戬

急性脑卒中是由脑部血流状态异常引起的急性脑血管疾病，由脑血管破裂引发的脑卒中称为出血性脑卒中，由脑血管阻塞导致的血管内循环障碍称为缺血性脑卒中[1]。急性脑卒中病因复杂，血糖、血脂代谢异常均可引发，且发病急、致死率高，存活病人常伴有神经功能障碍等后遗症，近年来已逐渐发展为我国成年人因病致残的主要因素[2]。目前临床对急性脑卒中尚无行之有效的治疗方法，多以预防为主，因此，迫切需要寻找可以预测急性脑卒中发生的临床指标。血浆组织蛋白酶S(Cat S)是一种半胱氨酸组织蛋白酶，Galibert等[3]研究发现血浆中Cat S的表达水平与心脑血管疾病密切相关。血小板反应蛋白-1(TSP-1)是细胞外基质糖蛋白家族中的一员，可以参与血管生成、血液凝固、细胞增殖等生物学过程，促进血栓的发生发展。相关研究表明，Cat S和TSP-1在心脑血管疾病病人血浆中高表达，但其与急性脑卒中关系的研究较少[4]。本研究旨在分析血浆Cat S、TSP-1水平与急性脑卒中预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年4月—2017年8月我院急诊科收治的82例急性脑卒中病人作为研究组，其中，男40例，女42例；年龄43～72(58.71±6.23)岁；出血性脑卒中37例，缺血性脑卒中45例。另选取同期在我院体检的健康志愿者82名为对照组，其中，男41名，女41名；年龄45～75(60.45±6.19)岁。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。研究对象同意配合研究，并签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：①经全国心脑血管会议制定的急性脑卒中诊断标准[5]确诊为急性脑卒中；②首次发病；③发病时间在48 h内。排除标准：①先天性中枢神经系统感染；②近期有手术、创伤史；③既往有脑卒中、外伤性脑出血；④合并过敏性疾病、精神疾病；⑤合并恶性肿瘤、糖尿病。

1.3 研究方法

1.3.1 临床资料收集 测定研究对象体质指数(body mass index，BMI)、收缩压(systolic blood pressure，SBP)、舒张压(diastolic blood pressure，DBP)、空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)、总胆固醇(total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)水平。

1.3.2 血浆Cat S、TSP-1水平测定 抽取急性脑卒中病人治疗前和治疗2周后空腹静脉血，经抗凝离心处理后，采用酶联免疫吸附法测定血浆Cat S和TSP-1水平，试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。

1.3.3 神经功能、生活自理能力评估 分别采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)和Barthel指数(BI)评估病人神经功能及生活自理能力。NIHSS评分范围为0～42分，16～42分表示死亡概率较高，6～<16分表示预后恢复一般，0～<6分表示预后恢复良好；BI评分范围为0～100分，60～100分表示生活能基本自理，20～<60分表示生活需要帮助，0～<20分表示生活完全不能自理。

1.3.4 随访 出院后对病人进行随访，以病人病情加重、有后遗症或死亡判定为预后不良，以病人基本康复判定为预后良好。

2 结 果

2.1 两组BMI、血压及常规生化指标检测结果比较 研究组BMI、收缩压、舒张压、FBG、TC和LDL水平明显高于对照组(P<0.05)，HDL水平明显低于对照组(P<0.05)。详见表1。

表1 两组BMI、血压、常规生化指标检测结果比较(±s)

2.2 两组血浆Cat S、TSP-1水平比较 研究组治疗前血浆Cat S、TSP-1水平均明显高于对照组(P<0.05)，研究组治疗后血浆Cat S、TSP-1水平均低于本组治疗前，但仍高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。详见表2。

表2 两组血浆CatS、TSP-1水平比较(±s)

2.3 急性脑卒中病人治疗前后NIHSS、BI评分比较 急性脑卒中病人治疗后NIHSS评分明显低于治疗前(P<0.05)，BI评分明显高于治疗前(P<0.05)。详见表3。

表3 急性脑卒中病人治疗前后NIHSS、BI评分比较(±s) 单位：分

2.4 急性脑卒中病人血浆Cat S、TSP-1水平与NIHSS、BI评分的相关性 Pearson相关分析结果显示，急性脑卒中病人血浆Cat S水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.682，P<0.001)，与BI评分呈负相关(r=-0.595，P<0.001)；急性脑卒中病人血浆TSP-1表达水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.598，P<0.001)，与BI评分呈负相关(r=-0.684，P<0.001)。详见表4。

表4 血浆Cat S、TSP-1水平与NIHSS、BI评分的相关性

2.5 急性脑卒中病人不良预后发生的影响因素 单因素分析结果显示，收缩压、舒张压、FBG、Cat S和TSP-1均是急性脑卒中病人预后的影响因素。多因素分析结果显示，Cat S和TSP-1水平是急性脑卒中病人预后的影响因素。详见表5。

表5 急性脑卒中病人不良预后的影响因素

3 讨 论

急性脑卒中以脑出血和脑梗死较为常见，脑出血主要是由病人体内血压异常导致脑动脉硬化或微血管瘤，一般在病人突然用力或情绪过于激动时发生破裂，致使发病；脑梗死主要是由病人体内血脂代谢异常导致脑动脉狭窄，内膜血脂沉积形成斑块，阻塞血管，引起脑部缺血缺氧致使发病[6]。研究表明，血管内皮细胞损伤及血糖、血脂、血压异常等均是引起心脑血管疾病的危险因素，对血栓形成起促进作用[7]。本研究结果显示，急性脑卒中病人BMI、收缩压、舒张压、FBG、TC和LDL水平明显高于对照组，HDL水平明显低于对照组，提示BMI、收缩压、舒张压、FBG、TC、LDL水平升高和HDL水平降低可能与急性脑卒中发生有关。

Cat S具有较强的蛋白溶解活性，在机体免疫应答中起重要作用，可以呈递抗原，降解动脉壁弹性蛋白和胞外基质分子，参与动脉硬化内膜及新血管形成[8]。近年来，研究发现Cat S高表达与机体炎症反应及癌症细胞的增殖、侵袭有关，可参与多种肿瘤疾病的发生发展，如肝癌、肺癌、胃癌等，但其自身分布有一定局限性，在人体正常动脉血管中低表达或几乎无表达，在心脑血管疾病病人血管平滑肌细胞、内皮细胞、动脉内膜巨噬细胞及血浆细胞中可以检测到高表达[9]。Cat S在体内高表达时可增加细胞外基质内生长因子的生物利用度，促进胞外基质降解，从而加剧肿瘤细胞增长[10]。Cat S受机体半胱氨酸蛋白酶抑制剂调控，在体内抗原呈递、炎症反应中起重要作用，调节血管炎症反应，是胞外基质降解的执行者。刘枫荻等[11]研究表明将小鼠胰岛细胞瘤模型敲除Cat S后，小鼠癌症细胞增殖受到抑制，新血管生成减缓。高海等[12]研究表明，Cat S在老年冠心病病人血清组织中异常表达，表达水平与疾病严重程度呈正相关，提示Cat S水平变化可能作为预测老年冠心病发生发展的独立影响因素。本研究结果显示，研究组治疗前血浆Cat S水平明显高于本组治疗后和对照组，提示血浆Cat S在急性脑卒中病人血浆组织中高表达。

TSP-1作为一种分泌型多分子钙结合糖蛋白，最早被发现于活化的血小板内及炎症反应过程中的内皮细胞中，研究表明，体内多种细胞如单核细胞、肿瘤细胞等均可产生TSP-1，在胚胎发育、新血管生成、细胞凋亡过程中发挥作用。TSP-1连接多种胞外基质蛋白、生长因子和细胞表面受体，调节特殊细胞反应，促进血小板聚集，参与癌症细胞的生长和转移[13]。近年来，多项研究表明，TSP-1在健康血管壁中低表达，在炎症性血管疾病中高表达，推测TSP-1可能参与心血管疾病的发生发展[14]。Rojas等[15]研究表明，缺血性脑卒中病人血浆组织中TSP-1表达水平明显高于对照组，考虑其可能与脑血管疾病发生有关。有研究表明，TSP-1可通过调节一氧化氮(NO)水平抑制血管炎症反应，NO在血管生理学中起抗炎作用，可减缓血小板聚集，抑制炎性细胞黏附[16]。Jurk等[17]研究表明TSP-1可调节细胞因子参与血管炎症反应，小鼠TSP-1缺失后，可加快动脉粥样硬化斑块的形成，使金属基质蛋白酶9水平升高，加剧炎症反应。TSP-1对血管疾病的影响可能是因为体内细胞膜通透性改变影响了蛋白质空间构象，导致血小板活性发生变化，引起凝血功能异常[18]。本研究结果显示，研究组治疗前血浆TSP-1水平明显高于本组治疗后和对照组，推测血浆TSP-1高表达可能促进急性脑卒中的发展。急性脑卒中病人治疗后NIHSS评分明显低于治疗前，BI评分明显高于治疗前，提示急性脑卒中病人恢复良好。相关性分析结果显示，急性脑卒中病人血浆Cat S、TSP-1表达水平与NIHSS评分呈正相关，与BI评分呈负相关，提示血浆Cat S和TSP-1水平可能影响急性脑卒中病人神经功能及生活自理能力恢复情况。Cox回归分析结果显示，Cat S和TSP-1水平是急性脑卒中病人预后的影响因素。

综上所述，Cat S、TSP-1在急性脑卒中病人血浆中高表达，Cat S、TSP-1表达水平与NIHSS评分呈正相关，与BI评分呈负相关，是急性脑卒中病人不良预后发生的影响因素。推测血浆Cat S和TSP-1可能参与急性脑卒中的发生发展，且对预后有影响。