血清HO-1、NBNA评分在早产儿脑损伤中变化分析及对脑发育预后评估的价值*

邓琳凡，王 敏，康晓萍，伍术晶

电子科技大学医学院附属绵阳医院/绵阳市中心医院儿科，四川绵阳 621000

目前，早产儿在产科分娩中越来越常见，据报道显示，全球早产儿占比高达10%，随着早产儿出生率增高，与之相关的脑神经功能后遗症发生率也有所增长，包括认知障碍、发育迟缓、视听障碍等[1]。早产儿脑神经功能损害与多种因素有关，如产程延长、应激反应、缺氧缺血等，危害性非常大，可能引起不同程度的智力障碍、脑性瘫痪[2]。为了改善早产儿的预后，产科需积极发现患儿的脑损害情况，给予辅助治疗，促进脑功能发育，基于此，神经功能评估对这类患儿至关重要。目前，临床针对新生儿神经功能进行评估的量表较多，包括Dubowitz神经学检查、新生儿行为评估量表、新生儿神经行为测定(NBNA)等，其中NBNA评估方法较简单，能对早产儿行为功能进行全面评价，稳定性好，可行性高[3-4]。临床可考虑采用NBNA评分法分析早产儿脑损伤程度，并预测预后，为及时干预提供依据。此外，研究发现血红素加氧酶-1(HO-1)在脑出血后应激反应作用下能诱导表达[5]。因此，本研究考虑采用血清HO-1、NBNA评分评估早产儿脑损害情况，分析二者对预后的评估价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2017年9月至2020年4月于本院产科分娩的130例早产儿，根据其有无脑损伤分为脑损伤组(n=52)、对照组(n=78)，两组基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。本研究获本院伦理委员会批准。

表1 两组基线资料比较

1.2纳入与排除标准

1.2.1纳入标准 (1)脑损伤组：胎龄<37周；体质量1 500～2 500 g；出生后完善头颅影像学检查，提示为脑损伤；能配合在出生后第3、7、14天检测血清HO-1水平以及进行NBNA评分；待矫正胎龄40周后可随访6个月；家属知情同意。(2)对照组：出生后完善头颅影像学检查提示未见脑损伤；胎龄、性别、体质量、分娩方式与脑损伤组匹配；能配合脑损伤组各时段完善血清HO-1检测及NBNA评分；家属知情同意。

1.2.2排除标准 (1)患先天性遗传代谢疾病者；(2)同时伴有肝、肾、心等重要脏器损害者；(3)患染色体疾病者；(4)先天性神经系统畸形者。

1.3研究方法 所有受试者均在出生后第3、7、14天检测血清HO-1水平，并进行NBNA评分。(1)血清HO-1检测：采集2 mL静脉血，以转速3 000 r/min，离心10 min，离心半径8 cm，分离血清，存放至-70 ℃环境中待测。经酶联免疫吸附法测定血清HO-1水平，试剂盒由上海钰博生物科技有限公司提供，根据说明书操作。(2)NBNA评分[6]：内容包括原始反射(3项，6分)、被动肌张力(4项，8分)、主动肌张力(4项，8分)、行为能力(6项，12分)、一般评估(3项，6分)，总共20个项目，分值范围为0～40分，得分为整数，总分38～40分、36～37分、≤35分分别提示正常、可疑、异常。(3)亚分组方法：①根据脑损伤组的胎龄分成A组(胎龄<32周，n=16)、B组(胎龄32～<34周，n=19)、C组(胎龄34～36周，n=17)。②在脑损伤患儿矫正胎龄至40周后随访6个月，经振幅整合脑电图(aEEG)评估脑发育情况。aEEG主要通过背景活动评估[7]：波谱带上边界>10 μV，且下边界>5 μV即振幅正常；波谱带上、下边界<5 μV，且边界>10 μV即轻度异常；波谱带上边界<10 μV，且下边界<5 μV即重度异常。据此评估预后，以重度异常者为不良组(n=13)，振幅正常、轻度异常者为良好组(n=39)。

2 结 果

2.1两组血清HO-1水平及NBNA评分比较 两组第7、14天的血清HO-1水平低于第3天，NBNA评分高于第3天，差异有统计学意义(P<0.05)。其中脑损伤组第3、7、14天的血清HO-1水平高于对照组，而NBNA评分低于对照组，且脑损伤组的血清HO-1水平均值高于对照组，NBNA评分均值低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组血清HO-1水平及NBNA评分比较

组别nNBNA评分(分)第3天第7天第14天均值脑损伤组5228.71±1.8229.85±1.46ab32.24±1.82ab30.27±1.24对照组7833.65±1.7835.24±1.72ab37.43±1.85ab35.44±1.63t15.36318.56815.77219.421P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.2不同胎龄脑损伤患儿的血清HO-1水平及NBNA评分比较 3组第7、14天的血清HO-1水平低于第3天，NBNA评分高于第3天，差异有统计学意义(P<0.05)。A组第3、7、14天的血清HO-1水平及均值高于B组、C组，且B组高于C组，而A组第3、7、14天的NBNA评分及均值低于B组、C组，且B组低于C组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 不同胎龄脑损伤患儿的血清HO-1水平及NBNA评分比较

组别nNBNA评分(分)第3天第7天第14天均值A组1627.11±0.8928.53±0.76a30.95±0.52ab28.86±0.95B组1928.45±0.56c29.43±0.47ac32.25±0.45abc30.04±0.72cC组1730.51±0.52cd31.57±0.42acd33.45±0.50abcd31.84±0.68cdF109.114129.170107.86860.480P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.3不同脑发育预后患儿的血清HO-1水平及NBNA评分比较 两组第7、14天的血清HO-1水平低于第3天，NBNA评分高于第3天，差异有统计学意义(P<0.05)。不良组第3、7、14天的血清HO-1水平及均值高于良好组，NBNA评分及均值低于良好组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 不同脑发育预后患儿的血清HO-1水平及NBNA评分比较

组别nNBNA评分(分)第3天第7天第14天均值良好组3929.43±0.3630.54±0.52a33.51±0.84ab31.64±1.13不良组1327.43±0.6428.52±0.71a31.69±0.76ab29.83±1.25t14.07711.0396.9184.872P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.4血清HO-1水平及NBNA评分对脑损伤患儿脑发育预后的评估价值 血清HO-1水平及NBNA评分评估脑损伤患儿脑发育预后的AUC分别为0.724、0.748，二者联合评估的AUC为0.846，见表5及图1。

表5 血清HO-1水平及NBNA评分对脑损伤患儿脑发育预后的评估价值

图1 血清HO-1水平及NBNA评分评估脑损伤患儿脑发育预后的ROC曲线

3 讨 论

脑损伤在早产儿中较常见，既往研究指出，与足月儿相比，早产儿更易受负面环境作用的影响，导致大脑结构异常，此外，早产儿胚胎生发基质含有较多线粒体，对缺氧、缺血较敏感，更容易出现脑损伤[8]。这类患儿通常伴有脑损伤危险因素，如感染、缺氧、缺血等，经头颅超声或MRI检查，可见脑白质受损、脑水肿等表现[9]。早产儿的脑血管发育欠佳，破裂出血风险较高，易诱发脑损伤，或危及生命，即便存活也可能留下不同程度的神经系统损害[10]。尽早诊疗是改善早产儿脑损伤预后的关键，研究表明NBNA评分的内容比较全面，灵敏度、特异度高，能反映脑损伤严重程度，辅助评估患儿病情[11]。然而，临床对于NBNA评分与脑发育预后的关系尚不明确。另有研究认为，HO-1作为应激蛋白，在应激状态下呈高表达，与脑损伤发生有关，但具体机制不明确[12]。因此，临床仍需对此进行探讨。

本研究结果显示，与无脑损伤者相比，脑损伤者的血清HO-1水平增高，NBNA评分下降。HO-1在细胞分解血红素中发挥了重要作用，其在组织细胞微粒体内广泛存在，正常情况下表达量极低，但一旦人体出现缺血、缺氧、脑出血、发热等应激反应，则会对其表达进行诱导，导致血清HO-1水平上调[13]。脑损伤后可导致触珠蛋白、血红蛋白相结合，从而形成二者结合物，并分解成血红素，而血红素神经毒性作用强，若转移到溶酶体内，则HO-1可将其分解后生成铁、胆绿素、一氧化碳，保护神经功能[14]。本研究提示早产儿发生脑损伤后，血清HO-1水平应激性增高，可能是通过抑制炎症、抗氧化等反应，缓解细胞损害，应激性保护神经细胞。NBNA评分能反映新生儿神经功能与行为，分值越高表明神经功能越好。本研究显示，脑损伤患儿的NBNA评分较无脑损伤者明显下降，原因可能为脑损伤会影响患儿的神经功能发育，导致智力、行为等发育落后。杜桂莲等[15]发现，NBNA评分能对早产儿脑损伤进行预测，与本研究结论相近。本研究显示，两组早产儿随着出生时间延长，血清HO-1水平下降，而NBNA评分升高，这主要是因其脑发育较出生时明显改善所致。

本研究结果提示，A组第3、7、14天的血清HO-1水平及均值高于B、C组，而NBNA评分及均值低于B、C组，表明随着胎龄越大，患儿的脑损伤越轻，胎龄越小的患儿脑损伤越重。分析原因，可能在于胎龄相对较大的患儿脑发育较完善，导致神经行为受到的影响相对较小，故血清HO-1水平应激性增高程度较小，NBNA评分更高。通过分析脑损伤患儿的预后，发现预后不良者的血清HO-1水平较良好者更高，NBNA评分较良好者降低，最终绘制ROC曲线，证实二者对患儿脑发育预后有一定评估价值，AUC均高于0.700。本研究显示当出现脑损伤应激反应后，患儿的血清HO-1水平随着出生时间延长呈下降趋势。这提示出生时间越长，血清HO-1应激性增高越轻，意味着脑损伤程度减轻，其中预后良好者的血清HO-1水平下降更明显，原因在于预后良好者的脑损伤改善更明显，能抑制血清HO-1水平应激性增高。李土明等[16]以缺血性脑血管病患者进行研究，发现HO-1在这类患者的血清中呈高水平表达，进一步证实HO-1参与了脑损害进展。本研究显示，预后越好的患儿NBNA评分越高，表明脑损伤改善越好，患儿的肌张力、神经行为功能改善越明显。临床可通过检测血清HO-1水平以及对患儿进行NBNA评分，评估脑发育预后。

综上所述，与正常早产儿相比，脑损伤患儿的血清HO-1水平明显上调，且NBNA评分下降，二者能作为评估脑损伤早产儿脑发育预后的指标。本研究的不足在于仅纳入52例脑损伤病例，样本量较少，未来需增加样本量对此进行更深入探讨。