王 森,黄宇希,彭 欢,黎睿君
(大连海洋大学水产与生命学院,辽宁省海洋动物免疫学与疫病防控重点实验室,大连海洋大学水生动物医院,辽宁 大连 116023)
2021年3月中旬,辽宁省庄河市某养殖场循环水系统养殖的大竹荚鱼出现离群缓游、体表出血等症状。病鱼经显微镜检测、组织内细菌分离及优势细菌鉴定,结果表明引起大竹荚鱼死亡的主要病原为格氏乳球菌(Lactococcus gar vieae)。笔者通过药敏试验筛选抑菌药物的临床指导,使该病得到有效控制。
大竹荚鱼于3月中旬开始发病,患病鱼体长约35厘米,胸鳍基部、背鳍、臀鳍、眼球外缘、上颚均有出血情况,尾部严重出血(图1),解剖可见肝脏发黄,脾脏充血肿大,肾脏充血(图2),鳃部镜检未见寄生虫。
图1 患病大竹荚鱼体表
图2 患病大竹荚鱼解剖
肉眼观察患病鱼体表,多个部位出血情况严重;取鳃丝进行镜检,未见寄生虫,排除由寄生虫引起的发病。将病鱼解剖后分别取脑部、肝脏、肾脏、脾脏组织于NA培养基上进行细菌接种分离,28℃恒温培养12小时,组织中均分离到菌落形态特征一致的细菌。菌落为乳白色、圆形、较透明、表面光滑、边缘整齐,生长较为缓慢。将纯化后的细菌进行革兰氏染色鉴定,染色结果为紫色,细菌呈球状或球杆状、散状分布或呈不规则短链状排列,鉴定为革兰氏阳性菌(图3);使用细菌DNA提取试剂盒分别提取脑部、肝脏、肾脏、脾脏处分离纯化后的细菌DNA,进行16S r DNA鉴定,分子鉴定结果结合生理生化鉴定结果,表明该优势细菌为格氏乳球菌。
图3 革兰氏染色结果
对分离到的格氏乳球菌进行药敏试验,选择8种兽医行政管理部门已批准的水产抗菌类药物测定该细菌对药物的敏感性,结果表明格氏乳球菌对盐酸多西环素(水产用)、恩诺沙星(水产用)两种抗菌药敏感;对氟甲喹药物中敏;对余下5种抗菌药呈耐药(表1)。
表1 药敏试验结果
1.清除病原 患病鱼与未发病鱼分池隔离饲养,养鱼用具应彻底消毒,患病鱼池与健康鱼池工具禁止混用,死鱼应及时打捞处理,不得随意丢弃。
2.药物杀菌 使用盐酸多西环素粉(水产用)药物进行拌料投喂,每千克鱼体重投喂20毫克盐酸多西环素粉,每天1次,连续投喂5天。
3.加强营养 在饵料中适量添加维生素C等营养物质,增强鱼体免疫力与抗应激能力。
采用上述方案对该病进行防治,大竹荚鱼死亡数量逐日减少,表明该治疗措施对大竹荚鱼细菌性疾病治疗正确有效,可供大竹荚鱼等其他海水鱼类细菌性疾病防治提供参考。