饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡生长性能、血液酶活力和肠道形态的影响

■钟 光 朱沛霁* 贾代汉 齐玉凯 施寿荣

（1.江苏立华牧业股份有限公司，江苏 常州 231000；2.中国农业科学院家禽研究所，江苏 扬州 225125）

高温是造成动物产生热应激的主要原因，尤其是随着近些年“温室效应”的不断严重，热应激带来的问题成为当前畜禽生产中的一大难题[1]。热应激会造成动物采食量减少，组织和器官损伤，能破坏肠道黏膜形态，造成绒毛高度降低等问题，给畜禽生产造成巨大损失[2-4]。因此，缓解乃至解决热应激及其带来的问题，对畜禽的规模化生产具有划时代的意义。其次，从营养学角度着手解决热应激及其造成的问题，是兼顾可行性和经济性的最佳选择之一[5]。矿物元素铬，无论是有机形态还是无机形态，研究均已发现其有缓解肉鸡热应激的作用。Rao 等[6]给予1 日龄肉鸡1、2 mg/kg 的有机铬，而后开展热应激试验，发现有机铬可提高热应激下肉鸡的生长性能，降低肝脏过氧化程度，从而保护了肝脏健康。Ghazi 等[7]给予1日龄肉鸡0.6、1.2 mg/kg 的三氯化铬和蛋氨酸铬而后给予热应激处理，发现两者都可显著提高机体的初级和次级抗体反应，以及胸腺和脾脏相对比重。王钰等[8]也证实，饲粮中补充铬元素能提高热应激下蛋鸡空肠的绒毛高度和肠腺的长度，铬具有缓解高温带来的热应激问题。黄羽肉鸡是华东、华南地区广泛分布的配套系，出栏量大，但其抗热应激添加剂的相关研究和报道较少。其次，黄羽肉鸡体型小、生长速度慢，生理特点较白羽肉鸡也可能存在差异，因此研究黄羽肉鸡的抗热应激添加剂，对指导其生产有着积极的作用。本试验参考白羽肉鸡的研究结果，在饲粮中添加1.2 mg/kg的有机铬，研究其对热应激状态下黄羽肉鸡生长性能、免疫器官发育和肠道形态的作用，为黄羽肉鸡的规模化生产中合理使用有机铬缓解热应激损伤提供一定的指导作用。

1 材料与方法

黄羽肉鸡（“优黄”系列，中速型，购自扬州立华畜禽有限公司）；有机铬[吡啶甲酸铬（chromium picolinate，CrPic），纯度＞96%]、铬（Cr）含量为12.43%，购自江苏易实生物科技有限公司。

1.1 试验设计

选择体重相近、健康的32 d雄性黄羽肉鸡180只，随机分为常温组（CN）、热应激组（HS）和有机铬组（HS+Cr），每组6 个重复，每重复10 只鸡。常温组和热应激组饲喂基础饲粮，有机铬组在基础饲粮中添加1.2 mg/kg的有机铬。常温组环境为26 ℃，热应激组和有机铬组环境温度为35 ℃，试验设计与处理见表1。试验共14 d。

表1 试验设计与处理

1.2 饲养管理

试验采用三层笼养，鸡笼底面规格为120 cm×80 cm，以保证饲养密度在0.1 m2/只左右。使用北京库蓝科技有限公司生产的动物营养代谢环控仓控制温、湿度，湿度为55%～60%。为避免高温环境（35 ℃）降低肉鸡采食量造成有机铬的摄入不足，正式试验前7 d（25 d）开始饲喂对应的试验饲粮。自由采食和饮水，24 h光照，其他管理措施同黄羽肉鸡饲养标准。按照1.20 mg/kg 的铬元素添加量，试验用吡啶甲酸铬的纯度为96%，在饲粮中添加10 mg/kg 的吡啶甲酸铬。基础饲粮按照我国《鸡饲养标准》（NY/T 33—2004）进行配制并制粒，基础饲粮组成与营养水平见表2。

表2 基础饲粮组成与营养水平（风干基础）

1.3 测定指标和方法

1.3.1 生长性能

试验开始和结束时统计每个重复的体重、初始料重和余料重，计算32～45 d的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）和死淘率（Mortality）。

1.3.2 血液指标

热应激14 d，从每个重复中随机选取2 只鸡，翅下静脉采血并置于促凝管中，静置离心并分离血清。采用UniCel D×C 800 Synchron 全自动生化分析系统（Beckman Coulter，美国）测定血清中丙氨酸转氨酶（ALT，又称谷丙转氨酶）、天冬氨酸转氨酶（AST，又称谷草转氨酶）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的活力。试剂盒购自广东省中山标佳生物科技有限公司。

1.3.3 肠道形态

将采样鸡宰杀，打开腹腔并分离整个肠段，而后悬空剪取空肠和回肠中间约1 cm 肠段并置于4%的甲醛溶液中，快速固定24 h，然后用连续浓度的乙醇脱水。标本在二甲苯中清除，并在56 ℃的热风炉中放入石蜡中24 h。石蜡组织块用切片机（徕卡手动旋转切片机，RM-2235型，德国徕卡微系统有限公司）制备用于横切片。在玻片上采集组织切片、脱蜡、苏木精和伊红染色，然后分别在光学显微镜下（50倍，DM-1000 型，德国徕卡微系统有限公司）检查组织学特征。利用Leica X 应用软件，对每张切片测量绒毛高度和隐窝深度。绒毛高度是从隐窝-绒毛交界处到绒毛顶的长度，而隐窝深度是从肌肉黏膜到隐窝-绒毛交界处的长度，计算绒毛高度、隐窝深度比（V/C）。

1.4 数据分析

数据经Excel 2013软件进行统计和简单处理后，用SPSS 20.0 软件进行单因素方差分析（one-way-ANOVA），均值显著性分析用LSD和Duncan’s法进行多重比较，结果以“平均值±标准误（Mean±SE）”表示，并以P＜0.05作为显著差异，同时根据LSD的组间显著性，分别以P1、P2作为“温度”因素和“有机铬”因素的显著性。

2 结果与分析

2.1 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡生长性能的作用（见表3）

由表3可知，HS组黄羽肉鸡的45 d BW、32～45 d ADG、ADFI 显著低于CN 组（P＜0.05），32～45 d F/G 和死亡率显著高于CN组（P＜0.05）；与HS组相比，HS+Cr组黄羽肉鸡45 d BW 显著提高了4.5%（P＜0.05），32～45 d ADG、ADFI 分别显著提高了45.8%和22.6%（P＜0.05），F/G显著降低了16%（P＜0.05）。

表3 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡生产性能的作用（N=6）

2.2 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡血清酶活力的作用（见表4）

由表4 可知，HS 组黄羽肉鸡的血清ALT、AST、LDH、CK 活力显著高于CN 组（P＜0.05）；与HS 组相比，HS+Cr 组黄羽肉鸡的AST 和CK 活力分别显著降低了33.3%和44.4%（P＜0.05）。

表4 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡血清酶活力的作用（U/L）

2.3 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡肠道形态的作用（见表5）

表5 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡肠道形态的作用

由表5 可知，HS 组的空肠和回肠的绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度显著低于对照组（P＜0.05）；与HS 组相比，HS+Cr 组的空肠绒毛高度显著提高了6.7%（P＜0.05），回肠绒毛高度/隐窝深度显著提高了55.1%（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡生长性能的作用

铬是一种金属元素，能参与机体内蛋白质的合成和核酸、脂肪代谢，降低体内脂肪含量，提高机体对不良状况的抵抗力，从而提高应激状态下机体的生长性能[9]。Jahanian 等[10]发现，给予450 日龄的罗斯308 肉鸡1 mg/kg的蛋氨酸铬，而后热应激处理，发现肉鸡的采食量、增重和饲料转化率显著提高，血浆中皮质酮的水平显著降低。Hajializadeh 等[11]给予热应激状态下的21 日龄罗斯308 肉鸡0.5、1.0、1.5 mg/kg 的吡啶甲酸铬和纳米铬，发现两种铬均能提高肉鸡的增重和饲料转化效率。而Zheng 等[12]将含有2 mg/kg 铬元素的丙酸铬、吡啶甲酸铬和三氯化铬分别给予1日龄肉鸡，两周后给予热应激处理。结果表明，不同形式的铬都可以显著提高热应激状态下肉鸡的体重和平均日增重。本试验以吡啶甲酸铬的形式补充有机铬。结果表明，热应激显著降低了肉鸡的平均采食量、体重和平均增重，显著增加了料重比和死淘率，说明本试验的热应激模型构建成功；以吡啶甲酸铬的形式补充1.2 mg/kg饲粮的铬元素，发现其能显著提高热应激状态下黄羽肉鸡的增重、采食量，显著降低料重比，说明饲粮中添加1.2 mg/kg 的有机铬能提高黄羽肉鸡的生长性能，抵抗热应激环境造成的不良影响，这与前人研究结果相一致，说明有机铬也能够缓解热应激对黄羽肉鸡生长性能的不良影响。

3.2 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡血清酶活力的作用

动物机体中有些酶类属于细胞内酶，如ALT、AST、LDH、CK等，正常情况下血液中几乎不存在。只有当组织、器官受损、细胞破裂时，这类酶才会释放入血，因此检测这类酶在血液中的活性通常被视为能够反映组织、器官损伤程度的重要指标之一[13]。而大量研究均已证实，高温环境会损伤机体的组织器官，从而升高血清中这些酶的活力[14]。而有学者提出，铬能够缓解高温造成组织、器官损伤的程度。但对此观点，不同学者有不同的看法。程玉芳等[15]发现，给予热应激状态下的种公鸡0.6、0.8、1.0 mg/kg 酵母铬，其血清中CK、LDH、ALT 和AST 活力均有所下降，且作者认为铬增强机体免疫功能，降低细胞膜的通透性，对机体组织细胞具有一定的保护作用是其降低酶活力的原因之一。但王刚等[16]研究发现，给予AA 肉鸡0.6 mg/kg的铬（以三氯化铬和吡啶羧酸铬的形式），其血清中谷草转氨酶、碱性磷酸酶、磷酸肌酸激酶活力未见明显改变。本试验结果表明，热应激显著提高了血清ALT、AST、LDH、CK 的活力，说明本试验构建的热应激模型成功，饲粮中添加1.2 mg/kg 有机铬显著降低了血清中AST 和CK 活力，说明在本试验条件下，有机铬可降低热应激导致黄羽肉鸡组织、器官受损的程度。与前人结果相比较，可能是添加量不同的原因造成结果不一致，具体的原因需要进一步的研究证实。

3.3 饲粮添加有机铬对热应激下黄羽肉鸡肠道形态的作用

肠道是机体消化吸收的最重要场所，良好的肠道黏膜形态结构对保持家禽健康及维持正常生产性能具有重要意义[17]。而当机体发生热应激时，肠道黏膜形态往往会造成损伤，且研究表明，这可能与热应激产生过量的氧自由基有关[18]。而饲粮补充铬可改善热应激状态下鸡的肠道黏膜形态也有相关的报道[8]。李燕[19]的试验也证实，饲粮添加0.2 mg/kg的吡啶甲酸铬可缓解热应激状态下肉鸭的肠道黏膜形态。本试验结果表明，热应激显著降低了黄羽肉鸡空肠和回肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度值，饲粮添加1.2 mg/kg的有机铬可提高空肠绒毛高度和回肠的绒毛高度/隐窝深度值，与前人研究相比，使用的试验动物和添加量均不相同，但均发现了铬改善肠道黏膜形态的作用，说明有机铬有改善热应激状态下黄羽肉鸡肠道黏膜形态的作用，这可能与铬的抗氧化功能有关[19]。

4 结论

综上所述，在本试验条件下，饲粮中添加1.2 mg/kg的有机铬可提高热应激下黄羽肉鸡32～45 日龄的生长性能，改善肠道黏膜形态，降低血液酶活力，缓解热应激对黄羽肉鸡生长性能和肠道形态的不良影响。