牛胚胎移植技术在旺苍县的应用试验

方东辉，黄成军，王 巍，贺 芳，阿果约达，甘 佳，易 军*

（1.四川省畜牧科学研究院，动物遗传育种四川省重点实验室，四川 成都 610066；2.四川省旺苍县畜牧和动物疫病预防控制站，四川 旺苍 628200）

加系西门塔尔牛属于肉乳兼用型，主要用以改进我国黄牛的肉用性能。因其具有良好的产肉性能和环境适应能力受到养殖户的喜爱，但引进活牛的高昂成本在一定程度上阻碍了地方肉牛良种覆盖率的增加，而采取胚胎移植技术，可大幅减低活牛成本和快速进行良种扩繁。为探讨和研究西门塔尔牛胚胎移植在旺苍县的应用前景，四川省畜牧科学研究院与旺苍县畜牧和动物疫病预防控制站于2021 年3 月起联合开展了肉牛同期发情、胚胎移植技术的试验工作。现将具体情况总结如下：

1 材料

1.1 胚胎来源 加系西门塔尔牛冷冻胚胎由北京加盛太平洋育种集团提供，共计34枚。

1.2 受体牛 在四川省旺苍县白水、嘉川、东河、黄洋、高阳、双汇、龙凤7个乡镇中选择营养中等、发情正常的健康西杂母牛83 头作为同期发情后备牛，要求育成牛18月龄以上或成母牛产犊后3月以上。同期发情处理后，通过对黄体筛查选择符合移植条件的能繁母牛作为胚胎移植受体牛，并进行肉牛体况评分（BCS）。

1.3 器械及药品试剂 显微镜，兽用B 超，胚胎移植枪、移植外套。氯前列腺醇（PG），2 mL，0.2 mg/支，宁波三生激素厂生产；盐酸利多卡因注射液，0.1 g/支，石药银湖制药有限公司生产；维生素A、D来自北京立时达药业有限公司；亚硒酸钠维生素E注射液为上海恒泰药业公司出品。

2 方法

2.1 同期发情 采用双PG注射方案，即第0 d第一次注射PG 4 mL、维生素A 10 mL、维生素E 10 mL，第11 d第二次注射PG 6 mL。

2.2 黄体筛查 针对发情牛进行直肠检查，主要检查左右侧卵巢上的黄体，包括：黄体大小、发育程度、质地软硬、卵巢基础和有无排卵点等。

2.3 胚胎移植操作

2.3.1 胚胎解冻与鉴定 在34 ℃温水中快速解冻胚胎，100倍显微镜下观察胚胎的形态、色调、大小、均匀度、细胞密度等情况，移植前胚胎装管。

2.3.2 胚胎移植 将确认已排卵并形成黄体的母牛作为胚胎移植受体牛，将其保定，清除粪便，对外阴清洗消毒，用2%利多卡因5 mL 在1～2 尾椎间注射麻醉。采用直肠把握法将移植器中的胚胎移植于距离子宫角顶端1/2～1/4深处。

2.3.3 妊娠诊断 胚胎移植后90 d，采用兽用B超检测妊娠情况。

3 结果与讨论

3.1 同期发情及胚胎移植结果 同期发情处理后第20 d，83 头后备牛中有63 头牛发情，平均同期发情率为75.90%；筛选出符合胚胎移植条件的受体牛34头进行胚胎移植，90 d后检测到怀孕母牛数为13头，平均妊娠率为38.24%。高立芳等［1］研究表明，牛胚胎移植妊娠率受多种因素的影响，如供体牛、受体牛、操作人员的技术水平及饲养管理水平等。本试验受体牛相对分散，各农户间管理水平不一致，导致同期发情及胚胎移植效果略有差异。具体见表1。

表1 各乡镇同期发情及胚胎移植妊娠情况表

3.2 膘情对胚胎移植妊娠率的影响 表2 结果显示：体况较瘦或较肥（评分为4～4.5 分或8～8.5分）的母牛妊娠率较低（仅有33.33%），其余膘情的妊娠率略高，分别为38.46%（5～5.5 分），42.86%（6～6.5 分）和40.00%（7～7.5 分）。受体牛的营养、膘情对于提高受体牛的移植可利用率、胚胎移植后的妊娠率及产犊率起着至关重要的作用。受体牛过瘦容易造成流产，过胖易引起妊娠后的热应激，影响妊娠率［2］。本试验结果表明受体牛体况以中等以上为宜，体况评分在6～6.5分的妊娠率相对最高。

表2 膘情对胚胎移植妊娠率的影响

3.3 黄体大小对胚胎移植妊娠率的影响 表3显示：具有0.8 cm、1.0 cm 和1.2 cm 黄体的受体母牛，其妊娠率分别为33.33%、35.71%和36.36%；具有1.5 cm 及以上黄体的受体母牛，妊娠率更高（达50.00%），但仅占总移植数的17.65%。该结果与张建军等［3］报道的“具有1.5 cm 以上黄体的受体母牛的妊娠率较高”结果一致。建议黄体质量好且略大的受体母牛，优先进行胚胎移植。

表3 黄体大小对胚胎移植妊娠率的影响

4 结论

本研究得出：旺苍县西杂母牛的同期发情率为75.90%，胚胎移植妊娠率为38.24%；膘情过瘦或过肥均影响妊娠率，受体牛体况以中等偏上较为适宜；具有1.5 cm 及以上黄体的受体母牛的妊娠率较高。综合考虑，肉牛胚胎移植技术适宜在旺苍县推广应用。