滇西地区生殖道支原体感染与不孕不育相关性调查分析

邹芳霞，忽胜和，张丽蓉

(大理大学第一附属医院检验科 1.检验科；2.生殖医学科，云南 大理 671000)

进入21 世纪后，不孕不育已经成为继心脑血管疾病、糖尿病、肿瘤三大疾病之后的又一研究热点[1]，我国已婚夫妇不孕不育约占 10%～15%，并呈逐年增加的趋势[2]，不孕不育问题已成为备受关注的社会问题。国内外对不孕不育因素的研究比较多，从临床、病原学等不同的角度进行了研究，认为支原体感染是不孕不育的病因之一，只是各地区的流行情况不同。本文旨在对2002 年9月-2017年9月就诊于本院生殖医学科的511对(1022例)不孕不育夫妇生殖道支原体的检测及药敏情况做回顾性统计，并分析其与不孕不育症的关系，为滇西地区临床治疗生殖道支原体感染和治疗不孕不育提供科学依据。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取以2002 年9月-2017年9月在大理大学第一附属医院生殖医学科就诊的来自滇西地区的511对(1022例)不孕不育夫妇为研究对象。排除生殖器官先天异常、理化因素等引起的不孕不育，研究患者根据药敏结果选取对其敏感的药物进行治疗，治疗后随访妊娠情况。研究对象均为夫妻性生活正常，无任何避孕措施2年以上未怀孕者，其中既往有过妊娠史的为继发性不孕不育，反之为原发性不孕不育。

1.2 实验室检测

1.2.1 标本采集

(1)女性：用窥阴器将阴道口向外扩开，先用无菌棉拭子将宫颈外口处的全部分泌物拭去，然后用1支专用无菌棉拭子插进宫颈内1～2 cm，旋转3圈后，停留30 s，取出棉拭子送检。(2)男性：使用无菌专用棉拭子伸入尿道内2 cm处，旋转1圈停留30 s，取出棉拭子送检。

1.2.2 检测方法

采用珠海市银科医学工程股份有限公司支原体鉴定药敏试剂盒(培养法)，按如下步骤进行检测。用无菌吸嘴吸取培养液 100 μL加入C-空白对照孔，然后将标本加入培养液中充分摇匀使之混合。吸取100 μL含菌培养液加入试剂条其余的微孔中；在试剂条的所有微孔中加入1～2滴矿物油。将测试板加盖，37℃培养24～48 h，观察结果。

1.2.3 结果判断

(1)鉴定计数：于24 h后观察并记录解脲支原体(Ureaplasma urealyticum，Uu)的结果，48 h后观察并记录人型支原体(Mycoplasma hominis，Mh)的结果。微孔颜色变红为阳性，不变为阴性。C-孔阴性时，试验有效，反之无效；C+孔阴性，则报告为培养阴性；反之为阳性，还须判读Uu及Mh分别≥ 104CCU/mL的结果情况。(2)药敏测

定：A行为低浓度，B行为高浓度，上下一一对应为一种药，两孔颜色都变红为耐药，两孔颜色都不变为敏感，低浓度孔变红高浓度孔颜色不变为中度敏感(注：由于支原体是泌尿生殖道的定植菌之一，在正常情况下也可检测出支原体，但在患者泌尿生殖道损伤、免疫力低下、生殖道环境PH改变等情况下可引起致病，所以检测出的支原体是否有临床意义，还需要根据其细菌数量和联系其临床症状来综合分析。当支原体计数结果≥104CCU时，表示感染的危险性较高。)。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 支原体感染情况分析

男性和女性各511例(共1022例)不孕不育患者中支原体培养结果为阳性的有341例(33.37%)，其中感染Uu的共有289例(28.27%)，感染Mh的共有14例(1.37%)，混合感染的共有38例(3.72%)。Uu的感染率明显高于Mh和Uu+Mh，3种类型的支原体的感染率不全相同，差异具有统计学意义(P<0.05)。男性与女性相比较，女性支原体Uu的单独感染率明显高于男性(P<0.05)，见表1。

表1 不同性别患者支原体感染情况[n(%)]

2.2 阳性患者治疗后妊娠情况分析

511对不孕不育夫妇中，检出支原体的共264对(51.67%)，其中治疗后妊娠的有134对(50.76%)。男女夫妇双方均为阳性的有77对(15.07%)，其中治疗后成功妊娠的有41对(53.25%)，男性为阳性而女性为阴性的有66对(12.92%)，其中治疗后成功妊娠的有30对(45.45%)，女性为阳性而男性为阴性的有121对(23.68%)，其中治疗后成功妊娠的有63对(52.07%)。分别与男女均阴组比较，其余3种类型的妊娠率差异不具有统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 阳性患者治疗后妊娠情况[对(%)]

2.3 原发性与继发性不孕不育患者支原体感染情况分析

原发性不孕不育患者总支原体感染率(31.65%)与继发性不孕不育患者总支原体感染率(35.41%)相比较无明显差异(P>0.05)。原发性患者的Uu(25.72%)感染率明显低于继发性患者的Uu(31.33%)，感染率P<0.05。Mh和Uu+Mh感染率原发性与继发性感染无明显差异(P>0.05)，见表3。

表3 原发性与继发性不孕不育患者支原体感染情况比较[n(%)]

2.4 药敏试验结果

1022例不孕不育症患者药敏结果统计显示，单独感染Uu的药物敏感率较高且大于80%的前3位的依次为：交沙霉素(94.81%)、克拉霉素(93.43%)、强力霉素(91.35%)，环丙沙星的耐药率最高(56.75%)。单独感染Mh的药物敏感率较高且大于80%的前3位为：美满霉素(92.86%)、交沙霉素(85.71%)、强力霉素(85.71%)，阿奇霉素的耐药率最高(71.43%)。Uu+Mh混合感染的药物敏感率较高的前3位为：交沙霉素(60.53%)、强力霉素(57.89%)、美满霉素(55.26%)，罗红霉素的耐药率最高(86.84%)。综上，单独感染Uu的患者对交沙霉素等多种常用药物的敏感性较高，Uu+Mh混合感染的患者对各种药物的敏感性均低，即混合感染的患者对抗生素的耐药性最高，见表4。

表4 不同类型支原体对10种抗生素的药敏结果[n(%)]

3 讨论

不孕不育症是不孕和不育这两种疾病的统称，指育龄夫妇在同居一年以上，未使用任何避孕措施且性生活正常的前提下，无法成功怀孕或是怀孕后流产[3]。引起不孕不育症的因素有许多，而生殖道病原微生物的感染是引发不孕不育症的重要原因之一[4]，其中支原体是引起生殖道感染最为常见的病原微生物之一，其中以Uu和Mh最为常见[5]。生殖道支原体感染导致不孕不育引起的炎症反应与致病机制主要为以下几点[6-11]：(1)支原体感染引起生殖道炎症，如女性子宫内膜炎及输卵管炎，前者阻碍受精卵的着床及干扰胚胎的早期发育。后者阻碍精子和卵子的结合。(2)Uu产生的尿素酶分解尿素，一方面破坏女性生殖道自洁生理屏障；另一方面产生的氨，对生殖道的黏膜上皮细胞具有毒性作用，从而阻碍受精卵的形成或使精子的通道受阻；(3)Uu分泌及释放神经毒素、磷酸酶等，影响宿主细胞的新陈代谢；(4)支原体产生的神经氨酸酶样物质与人精子膜有共同抗原，对精子造成免疫性损伤导致不孕不育；(5)Uu可吸附于精子上，导致精子活动力降低、穿透卵细胞的能力降低，从而对受精造成影响。

本研究结果显示，滇西地区不孕不育患者支原体阳性率为33.37%，与其他各地区报道不同[12-15]，如吉林为35.4%，沧州为51.7%，巴西为28.1%，与印度，西方国家等都存在差异，支原体的感染情况存在地域差异。男性与女性相比，女性的支原体感染率明显高于男性，这可能与女性生殖道解剖生理特点和生殖道黏膜环境特点比男性更适合病原体的生长有关[16，17]。原发性与继发性不孕不育患者比较，前者的Uu感染率明显低于后者，说明Uu感染可能是引发继发性不孕不育的重要病因之一。

支原体是一群不具备细胞壁的原核细胞型微生物[18]。正因为此特点临床医师通常选用作用于细胞膜、核糖体、蛋白核酸合成之类的药物，如大环内酯类和四环素类为主要抑制蛋白合成的两类抗生素，喹诺酮类为阻止DNA 复制的抗生素[1]。正因为此三类抗生素的广泛及大量使用，使支原体对这些抗生素出现了不同程度的耐药情况。然而本研究的药敏结果和其他地区的文献报道[19]不一致，通过与其他地区的对比发现各地区支原体对抗生素的敏感性和耐药性各不相同。本研究中264对阳性患者经治疗后有134对(50.76%)患者成功妊娠，说明对不孕不育患者进行有效的治疗是很有必要的。因此应尽量进行支原体鉴定，进行药敏实验，根据实验结果选择恰当的药物对支原体感染的不孕不育患者进行合理的治疗。

4 结论

综上所述，滇西地区不孕不育患者的生殖道支原体感染率较高，主要以Uu感染为主，其次为Uu+Mh混合感染。单独感染Uu、Mh的患者对多种常用药物的敏感率较高，而混合感染的患者对药物的敏感率较低。滇西地区生殖道支原体感染与不孕不育紧密相关，因此，育龄期夫妇应加强支原体及相关病原微生物的筛查和治疗。