涂片检查在临床微生物检验中的应用效果分析

陈凤钻，林志坚，黄敏华

东莞市松山湖中心医院 检验科，广东 东莞 523000

0 引言

近年来，临床检验医学随着科技飞速进步也呈现出了技术革新的新局面，准确快速的自动化检测系统研发成为该领域新的发展方向[1]。现阶段，自动化的细菌培养、鉴别设备在微生物检验中获得了迅猛发展，先进科学的检测设备促使细菌检测效率及检测准确性均得到了明显提升[2]。但经典检查途径通常是对自动化先进检查设备的校准、验证及补充，虽然细菌培养是检查结果的金标准，但该方法耗时比较长，并且难以对菌群相对量进行观察，不易确定包细胞与细菌之间的关系，很可能会因此耽误对患者的临床治疗[3]。涂片检查是经典的病原学诊断方案，也是常见的试验方法，有研究指出，对原始标本实施涂片检查所获得的结果与细菌培养后再行涂片检查相差无几，均具有较高符合率[4]。本研究观察在微生物检验中应用涂片检查的效果，现报告如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

纳入2021年2月-2022年2月本院就诊的86例患者为研究对象，对所有患者微生物标本采用统一方法获取，按照检查方法的差异性将检验标本分为两组，每组各43例。对照组男女比例为26/17；年龄介于31～74岁，平均（53.17±19.25）岁；标本类型：腹腔液5例，痰液21例，脓液9例，尿液8例。研究组男女比例为28/15；年龄介于30～72岁，平均（53.38±20.01）岁；标本类型：腹腔液6例，痰液20例，脓液8例，尿液9例。两组一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：①年龄＞18岁；②患者对本研究知情同意；③患者均签署了知情意见同意书；④配合能力较好；⑤本研究经医院伦理委员会审查批准。排除标准：①合并感染性疾病；②伴有严重脏器损伤性疾病；③合并凝血功能障碍；④患者存在意识障碍或有精神类疾病史。

1.2 方法

1.2.1 获取标本

对所有患者微生物标本采用统一方法获取。①腹腔液标本：将腹腔液标本经3000r/min离心10min后取沉淀物涂片；②痰液标本：在进行标本获取之前，嘱患者饮用纯净水进行漱口，然后进行有效咳嗽，咳出气道深部痰液，采集并马上送检；③脓液标本：采集中严格执行无菌操作，创口予以彻底清洁，样本选择局部组织脓液或创口分泌物；④尿液标本：首先通过清水对会阴及尿道口等位置进行清洁，患者排尿后取10mL左右的中段标本待检。

1.2.2 检查方法

对照组的检查方法为原始标本涂片检查，其中尿液标本需先进行离心处理，然后将沉渣分离出来，再进行涂片检查；对于痰液及脓液标本，在标本获取之后通过压片法制备涂片，对玻片进行交错方向拉动，获取标本后进行镜检；腹腔液标本在完成制备后，借助革兰氏染色等途径进行检验，完成检验后准确记录病原菌类型。研究组的检查方法是细菌培养后再行涂片检查：首先对原始标本加以科学处理，放置在培养基中进行培养，培养温度、二氧化碳浓度及温育时间分别为35℃、5%～10%、18～72h，通过SC及GN增菌液、蛋白胨水、肉肠溶解、复苏冻干菌种，能够在恒温（37℃）环境中培养，时间介于24～120h之间，培养至菌种呈浑浊生长状态且有菌膜。把标本中包含的致病菌、微生物、优势菌群通过VITEK 2 Com pact系统予以鉴定，在进行微生物鉴定时可将镜检中看到的病原菌视作筛查重点。

1.3 观察指标

①统计两种方法对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌等不同类型微生物的检出率；②统计两种方法对腹腔液、痰液、脓液、尿液不同标本间的微生物检出率。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 比较两组对不同类型微生物的检出率

对照组对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌的检出率分别为9.30%、76.74%、13.95%，研究组对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌的检出率分别为9.30%、74.42%、13.95%，组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表1。

表1 两组对不同类型微生物的检出率对比[n（%）]

2.2 比较两组对不同标本的微生物的检出率

研究组在腹腔液、痰液、脓液、尿液标本中的微生物检出率分别为13.95%、46.51%、18.60%、20.93%；对照组在腹腔液、痰液、脓液、尿液标本中的微生物检出率分别为11.63%、48.84%、20.93%、18.60%，组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表2。

表2 两组对不同标本微生物的检出率对比[n（%）]

3 讨论

临床常见感染类型的疾病主要有泌尿系统感染、呼吸系统感染、伤口感染等，相关统计资料显示，感染类疾病在我国的发病率逐年上升[5]。对于不同类型的感染疾病，如果在治疗前没有对病原菌类型加以明确鉴别，很难实施准确的抗菌治疗，有可能因此导致患者病情进一步加重，甚至威胁患者生命[6]。现阶段，临床治疗感染类疾病的主要方案是抗生素疗法，但抗生素的滥用问题也随着感染类疾病发病率的提升而日益加剧[7]。因此，为促使细菌对抗生素敏感性的有效提升，借助微生物检查对病原菌类型加以明确以指导临床用药具有重要的临床意义。

涂片检查是临床比较常用的微生物检查方案，包括对原始标本进行涂片检查以及先行细菌培养后再进行涂片检查两种方法，两种检查方案各具优势。其中前者的优势有以下几点：

（1）该方法能够准确鉴别细菌类型，并依据细菌种类的差异辅助判断患者的疾病类型，在痰液标本检查中，如果检查出葡萄球菌，那么患者疾病大都为肺炎，而如果检查出结核杆菌，则大部分为肺结核患者。相关研究指出，脓肿、胸膜炎都是因患者机体侵入特殊形态细菌而引起的感染[8]。在疾病诊断期间参考涂片检查结果，对于早期明确诊断疾病具体类型具有重要的指导作用。

（2）该方法能够对标本合格与否状态进行判断，如果标本不合格，有很大概率会致使检查结果存在误差，进而延误疾病的明确诊断及后续治疗。检查期间涉及革兰染色的操作流程，在此操作过程中能够看到鳞状上皮细胞数量，若数量庞大且少有脓性细胞，提示标本达不到合格标准，要重新进行取材。

（3）该方法有助于细菌的鉴定，通过该方法鉴定微生物，有些微生物所呈现出的形态更加典型。因此，该方法对于提升鉴别细菌准确性有较大帮助。本研究中，对照组对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌的检出率分别为9.30%、76.74%、13.95%；在腹腔液、痰液、脓液、尿液标本中微生物的检出率分别为11.63%、48.84%、20.93%、18.60%，与相关研究结果基本一致。

先行细菌培养后再实施涂片检查的突出优势在于能够对培养结果加以科学解释，细菌培养期间常会发生微生物生长状况不良的情况，出现此问题的原因主要是患者可能正在进行抗生素用药治疗，另外如果无法满足培养条件也可能会引起微生物不生长[9-10]。相关临床研究指出，部分病原菌能够在染色片中被观察到，但细菌在培养期间易被正常菌群抑制，导致难以观察到的问题，需对该问题引起足够重视[11]。与此同时，通过该方法进行微生物检测对于病原菌类型的明确也有很大帮助，能够为抗生素治疗方案的科学选取提供一定参考借鉴。本研究中，研究组对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌的检出率分别为9.30%、74.42%、13.95%，与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05），提示上述两种检查方案均具有较高临床应用价值。研究组在腹腔液、痰液、脓液、尿液标本中的微生物检出率分别为13.95%、46.51%、18.60%、20.93%，与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05），更加证实了在临床微生物检验中实施涂片检查的实际应用价值。值得注意的是，在进行微生物检验期间，标本质量的优劣对检查结果会产生比较严重的影响，因此检验期间需对标本质量加强控制，以保证标本不被污染，降低各种因素对标本质量的影响，最终提高检查准确率[12]。

综上所述，在临床微生物检验中无论采用原始标本涂片检查，还是细菌培养后再行涂片检查的方法，对微生物均有较高检出率，且能够对病原菌类型进行明确分类，为选择针对性的疾病治疗方案提供依据和指导，实现合理用药，具有推广价值。