不同来源蜂花粉对皖西白鹅生长性能和胃组织结构功能的影响

张锋燕，任 曼*，余 琦，徐茂森，袁宇尘，赵春芳，江卫军，李升和*

（1.安徽科技学院动物科学学院，动物营养调控与健康安徽省重点实验室，安徽凤阳 233100；2.安徽展羽生态农业开发有限公司，安徽六安 237100）

蜂花粉是蜜蜂从植物花蕊内采集的花粉粒，并加入腺体分泌物混合而成的一种不规则扁圆形状物。蜂花粉富含必需氨基酸、矿物质、多糖和维生素等营养成分，具有促进动物生长发育和提高免疫力等多种生理功能。蜂花粉种类繁多，来源多样，其功能也有一定差异。相关研究表明，蜂花粉可促进动物生长发育、降低炎症因子含量、加强肠道免疫和改善肠道屏障功能等特点。廖吕燕等研究表明，添加不同剂量的油菜花粉超微粉可显著提高肉鸡体质量，促进肉鸡生长。李娟等研究表明，荞麦蜂花粉多糖可以改善小鼠肠道隐窝结构，加强肠道免疫，促进小鼠生长发育及免疫器官发育。位孟聪研究发现，板栗蜂花粉可以提高五龙鹅的繁殖性能，并且疾病少、抗病力强。

皖西白鹅是我国优良的地方水禽，在国际市场上享有“世界珍禽”美誉。与传统放牧相比，集约化饲养易导致各种疾病的发生和自身抵抗力下降。因此，开展提高皖西白鹅抗病抗逆性的研究具有重要意义。本试验旨在研究油菜蜂花粉和茶花蜂花粉对皖西白鹅生长性能、肌胃和腺胃组织结构及功能的作用，以期开发出相应绿色饲料添加剂为规模化养鹅业的健康发展提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与日粮 皖西白鹅购自六安市裕安区军明皖西白鹅良种繁育基地。选用30 日龄健康的皖西白鹅150只，随机分成3组，每组5个重复，每个重复10只鹅。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加200 mg/kg茶花蜂花粉（葆春蜂王浆有限责任公司）、200 mg/kg油菜蜂花粉（上海冠生园蜂制品有限公司），试验期为60 d。试验日粮由玉米、豆粕、稻谷、麦麸、石粉、稻壳等组成。日粮营养成分参考“中国饲料成分与营养价值表2019”计算。基础日粮组成及营养成分见表1。

表1 基础日粮组成及营养成分（风干基础）

1.2 饲养管理 试验鹅采用地面平养，自由采食、饮水，严格按照养鹅场提供的免疫程序免疫。

1.3 样品采集与指标测定

1.3.1 生长性能 试验期间每天09:00以组内的每个重复为单位记录剩余料重，统计采食量。在试验开始第30、60、90 天时每只试验鹅空腹称重并记录。计算每只鹅的平均采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、耗料增重比（F/G）。

1.3.2 肌胃、腺胃器官指数 分别在试验开始第60、90天时各组中随机选取5只鹅（每个重复1只）颈静脉放血处死，屠宰放血后解剖分离肌胃（去角质及内容物）、腺胃分别称重，并计算脏器指数。

1.3.3 肌胃、腺胃组织观察 肌胃和腺胃称重后剥开，用生理盐水冲洗后取出一块组织置于4%福尔马林溶液中固定，石蜡包埋，连续切片，厚度为5 μm，苏木精-伊红（HE）染色，在全自动显微镜（BA600-4）下观察其组织结构。

1.3.4 腺胃胃蛋白酶活力测定 鹅屠宰后，取腺胃组织0.1 g，按1:9加匀浆介质，组织匀浆（Schwing muhle Tissue Lyser2匀浆机）、2 500 r/min离心10 min，取上清液，用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定腺胃的胃蛋白酶活性。

1.4 统计分析 数据采用IBM SPSS Statistic 23软件进行统计分析，各数据之间的差异性采用单因子方差分析（One-Way ANOVA LSD）法进行多重比较分析，以<0.05作为差异显著性判断标准。所有数据均用平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 不同来源蜂花粉对皖西白鹅生长性能的影响 如表2所示，试验各组30、60、90日龄体重差异不显著，油菜蜂花粉组、茶花蜂花粉组30～60、60～90、30～90日龄ADFI、ADG、F/G与对照组均无显著差异。

表2 不同来源蜂花粉对皖西白鹅生长性能的影响

2.2 不同来源蜂花粉对皖西白鹅器官指数的影响 如表3所示，90日龄皖西白鹅的肌胃重量略高于60日龄，90日龄腺胃重量与60日龄差异不显著。而90日龄的肌胃指数和腺胃指数低于60日龄。油菜蜂花粉组、茶花蜂花粉组皖西白鹅60、90日龄的肌胃重、腺胃重、肌胃指数和腺胃指数与对照组均无显著差异。

表3 不同来源蜂花粉对皖西白鹅肌胃腺胃器官指数的影响

2.3 不同来源蜂花粉对皖西白鹅腺胃、肌胃组织结构的影响 腺胃和肌胃的结构可分为黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜4层。如图1所示，与60日龄相比，90日龄腺胃的腺体数量多，排列紧凑，腺小管密集，深层黏膜肌厚。60日龄，对照组腺胃单管腺排列不整齐且较短，深层复管腺稀疏；茶花蜂花粉组浅层管状腺排列整齐且较长，深层复管腺密集且数量多，深层黏膜肌比较厚，固有层管状腺数量较多；油菜蜂花粉组腺胃单管腺排列不整齐，腺体大小不一；茶花蜂花粉组腺胃发育较好。90日龄，对照组腺胃的单管腺较短，腺体数量不多而且不紧凑；油菜蜂花粉组腺体数量多，排列紧凑，黏膜层和深层黏膜肌较厚，发育优于对照组和茶花蜂花粉组。

图1 不同来源蜂花粉对皖西白鹅腺胃组织结构的影响（HE染色，×400）

肌胃黏膜层表面分布一层硬度较大的类角质膜。如图2所示，与60日龄相比，90日龄肌胃腺长且排列整齐，类角质膜平整，说明肌胃结构更趋于成熟。60日龄，对照组肌胃腺较短，油菜蜂花粉组黏膜层厚，肌层也较厚，肌胃腺长且排列整齐，并且上皮下陷形成漏斗状的隐窝较深；茶花蜂花粉组肌胃腺数量多但较短，隐窝较浅但类角质膜较厚。90日龄，油菜蜂花粉组、茶花蜂花粉组肌胃的黏膜上皮比对照组厚，肌胃腺排列整齐。60日龄时，茶花蜂花粉组的肌胃发育较好；90日龄时，油菜蜂花粉组肌胃发育优于对照组、茶花蜂花粉组。

图2 不同来源蜂花粉对皖西白鹅肌胃组织结构的影响（HE染色，×400）

2.4 不同来源蜂花粉对皖西白鹅腺胃胃蛋白酶活力的影响 如图3所示，90日龄皖西白鹅腺胃的胃蛋白酶活性高于60日龄（<0.01）。60日龄，油菜蜂花粉组、茶花蜂花粉组腺胃胃蛋白酶活力与对照组没有显著差异；90日龄，油菜蜂花粉组高于对照组和茶花蜂花粉组（<0.01），茶花蜂花粉组与对照组相比无显著差异。

图3 不同来源蜂花粉对皖西白鹅腺胃胃蛋白酶活力的影响

3 讨 论

皖西白鹅属于中型肉绒兼用品种，是同类型中早期生长最快的地方鹅品种之一。从4周龄开始其生长加速，至第5周时体重生长强度达到高峰，之后生长强度降低，至第7周龄趋于稳定。8周龄后主要是骨骼和羽毛生长，尤其毛囊快速发育和羽毛的生长，饲料转化效率显著降低。有研究发现，添加0.5%、1.0%、1.5%油菜蜂花粉对产蛋高峰期和产蛋后期芦花鸡的ADFI、料蛋比、平均蛋重无显著影响，但添加1.0%油菜蜂花粉可以显著提高产蛋后期产蛋率。肉鸡中添加2%蜂花粉多糖4周龄体重和F/G与对照组差异不显著，但8周龄时体重和F/G与对照组差异显著。本研究中，添加蜂花粉对皖西白鹅生长性能有一定提高，但影响不显著，可能与添加剂量和鹅的周龄有关。刘晓红等研究表明，与对照组相比，50 mg/kg茶花粉水提物组大鼠体重无显著差异；意大利蜜蜂补饲茶花粉和油菜花粉可促进工蜂幼虫生长并可显著提高工蜂的寿命。不同品种和产地蜂花粉的矿物元素和蛋白质等营养含量的差异非常大。不同品种蜂花粉的总黄酮含量和自由基清除能力差异也较大。油菜蜂花粉的总黄酮含量较高，具有较强的自由基清除活性和抗氧化潜力。本研究中，添加相同剂量的油菜蜂花粉和茶花蜂花粉对动物生长性能的影响均不显著，但油菜蜂花粉总体效果较好，这可能与油菜花粉中多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated Fatty Acid，PUFA）含量丰富有关。油菜蜂花粉中-亚麻酸（α-Linolenic Acid，ALA）的含量占总脂肪酸含量的48.51%，饱和脂肪酸与PUFA比例合理，维生素E含量丰富，PUFA的平衡可以减少一些疾病的发生，对机体正常生长和内环境稳定有重要作用。

腺胃和肌胃对皖西白鹅营养物质的消化吸收、机体免疫和生长发育等具有至关重要的影响。鹅肌胃极其发达，崩解压力远远大于鸡和鸭，能把植物细胞壁压裂，利于吸收细胞内营养物质。肌胃黏膜是由上皮和固有层构成，没有黏膜肌层，在黏膜表面覆盖有一层厚而且粗糙的类角质膜，俗称肫皮，中药称“鸡内金”，它具有保护黏膜的作用，并可抵抗蛋白酶、稀酸和弱酸的作用，对吞入食物起机械性磨碎作用，消化能力强。本试验通过组织结构观察发现，蜂花粉可显著改善肌胃的组织结构，促进肌胃腺发育，类角质膜更加平整，黏膜下层发育较厚。腺胃亦称前胃，纺锤型，黏膜表面有许多圆形乳头，乳头体积较小，但是数量较多。腺胃具有分泌黏液、酸及酶的功能，对饲料的磨碎起到了润滑和柔化的作用，有助于粗饲料的进一步粉碎和消化，而酸所带来的pH降低也有助于纤维素分解菌的生长。家禽的腺胃较小，其内腔比食管内腔略大，但由于腺胃黏膜固有层内存在大量深层复管腺，所以比食管壁厚很多，腺体腺细胞具有家畜胃底腺中壁细胞和主细胞的特征，这表明该细胞既能分泌盐酸又能分泌胃蛋白酶。蜂花粉中具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、提高免疫力、清除自由基等功效，对沙门氏菌、大肠杆菌具有良好的杀灭作用，能够促进胃液分泌和改善肠道功能。研究表明，日粮中添加蜂花粉能够改善蛋鸡消化道的组织结构并增强机体的消化吸收功能。本试验研究显示，添加油菜蜂花粉腺胃的深层复管腺数量多且密集，黏膜层变厚，而深层复管腺可以分泌盐酸和胃蛋白酶。本研究中，90日龄时油菜蜂花粉组胃蛋白酶活力极显著高于对照组和茶花蜂花粉组，这可能与油菜蜂花粉中的黄酮类物质比其他类花粉要高，而黄酮类化合物具有很好的保健和促消化作用。

4 结 论

本研究结果表明，在基础日粮中添加200 mg/kg的油菜蜂花粉和200 mg/kg茶花蜂花粉对皖西白鹅生长性能没有显著影响，但可以改善皖西白鹅肌胃和腺胃组织结构，提高腺胃胃蛋白酶活力，增强机体消化吸收功能，其中200 mg/kg油菜蜂花粉对皖西白鹅应用效果较好。