微柱凝胶法检测ABO血型正反定型不符的影响因素分析

赵妮 兰爱侠

(铜川市人民医院输血科,陕西 铜川 727031)

为提升临床ABO血型鉴别水平，需对导致血型正反定型不符合的影响因素实施分析，本研究对本院80例ABO血型正反定型不符合患者开展分析，了解导致不符合情况发生的影响因素，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择本院接收的80例实施ABO血型检查患者为研究样本，其检查时间均在2018年4月至2020年4月之间。80例患者中，男45例、女35例；年龄(56.37±6.89)岁；体质指数(23.36±0.47) kg/m2。全部患者在实施微柱凝胶法检测后均出现ABO血型正反定型不符合情况，通过向患者全面介绍研究目的以及方法后，取得患者同意，为每位患者均采集血液样本5 mL。

1.2方法 检测仪器为HHS-21-6型数字显示恒温水浴锅(采购至常州诺基仪器有限公司)、JIDI-18D型离心机(采购至广州吉迪仪器有限公司)、SA-60型全自动血型分析仪(采购至苏州长光华医生物医学工程有限公司)。检测试剂为ABO血型以及RhD血型定型试剂采购至南京信帆生物技术有限公司；抗A、抗B、抗H、抗AB以及抗A1标准血清采购至上海桥星贸易有限公司；反定型A1型、B型、O型以及A2型标准红细胞采购至上海艾研生物科技有限公司；不规则抗体筛选红细胞采购至长春博讯生物技术有限责任公司。全部试剂经检查后均符合研究需求且在保质期内。使用全自动血型分析仪对每位患者ABO血型实施检测，全自动血型分析仪工作原理为微柱凝胶法。当发现正反定型不符合情况时，可根据ABO疑难血型三步分析法对正反定型不符合的标本实施鉴定。在排除因人为因素、操作错误和试剂不符合检测要求等问题后，为患者重新采集血液样本5 mL，在采集血液样本时需严格遵循操作原则，避免出现采集错误和血液样本不规范等情况。分析患者临床资料，探寻可能会引起正反定型不符合的因素，随后依据分析结果实施针对性验证试验。在筛查不规则抗体时，可选择全自动血型分析仪、抗人球蛋白试管法以及盐水法等操作措施。最终依据可能会导致正反定型不符合的因素和试验结果实施全面判断。

1.3观察项目 分析正反定型不符合原因。观察导致正反定型减弱或缺失的影响因素。分析ABO血型抗原抗体出现额外反应的影响因素。

2 结 果

2.1正反定型不符合原因 依据ABO疑难血型三步分析方式对患者实施核实分析后，对80例患者再次采集血液样本实施ABO血型检测，结果显示同首次检测结果相同，均出现正反定型不符情况。在80例ABO正反定型不符合的患者中，有42例(52.50%)为造血干细胞移植不符合、有18例(22.50%)为ABO血型正反定型不符合、有17例(21.25%)为抗原减弱或缺失不符合、仅有3例(3.75%)为抗体减弱或缺失不符合。在42例造血干细胞移植不符合患者中，21例(50.00%)移植供受者出现ABO血型不符合、15例(35.71%)出现次要不合、6例(14.29%)出现主次要不合。

2.2导致正反定型减弱或缺失的影响因素 在38例非造血干细胞移植ABO正反定型不符合患者中，有17例(44.74%)出现抗原减弱。其中低丙种球蛋白血症、年龄>60岁以及恶性血液疾病是导致抗体减弱或缺失的主要影响因素。恶性血液疾病、试剂干扰、ABO亚型以及恶性实体肿瘤是导致抗原减弱或缺失的主要影响因素。见表1。

表1 导致血型抗原/抗体减弱或缺失的影响因素分析[n(%)]

2.3ABO血型抗原抗体出现额外反应的影响因素 80例患者中，有18例为ABO正反定型额外反应患者，并且其中反定型额外反应者有13例(72.22%)、正定型额外反应者有3例(16.67%)、正反定型同时额外反应者有2例(11.11%)。由于自身抗体所导致额外反应者有8例(44.44%)，由于同种抗体所导致额外反应者有5例(27.78%)。其中有1例ABO亚型患者，通过实施分子生物学监测后判断是B(A)血型。见表2。

表2 ABO血型抗原抗体出现额外反应的影响因素分析[n(%)]

3 讨 论

微柱凝胶法主要是指红细胞抗原同相应抗体在凝胶微柱介质中出现凝集反应的免疫学检测方式。ABO正反定型不符合主要是指通过观察正定型和反定型结果后无法实施相关验证，进而无法准确地进行ABO血型鉴定[1-4]。开展ABO血型鉴定具有以下几点优势：(1)对于机体循环血量不足或出现大量失血、贫血症状的患者，当其需要实施输血治疗时，在输血前必须使用血型相同的供血者，随后开展交叉配血试验，确定两种血型完全相同后才可进行输血[5]。(2)当进行皮肤或肾移植等器官移植时，需要选择ABO血型相符合的供体[6]。(3)分析影响不孕症的原因以及导致新生儿出现溶血症的影响因素[7]。(4)亲子鉴定。因此，了解导致出现ABO正反定型不符合的原因，并采取相应干预措施，可提升临床对ABO血型的鉴定能力。

临床有研究[8]指出，ABO血型不符合造血干细胞移植、自身抗体和恶性血液疾病是导致ABO正反定型不符合的重要因素，并且其认为通过实施相应辅助试验和掌握患者临床资料可一定程度上提升血型鉴定水平。在本次研究中，发现以下几点因素是导致ABO正反定型不符合的重要因素：(1)ABO血型不符合造血干细胞移植，在实施造血干细胞移植时，血型可出现复杂改变，通过掌握患者临床资料，提供患者血型和正反定型反应强度，可协助临床医师对移植存活情况有正确判断。(2)恶性血液疾病，对于再生障碍性贫血的患者而言，其血液中成熟红细胞数量有明显下降，有大量不规则形态红细胞形成，从而导致抗原能力下降。对于急性粒细胞白血病患者而言，由于疾病对半乳糖转移酶合成产生抑制，导致红细胞A抗原或是B抗原出现缺失或弱化，最终出现抗原缺失或弱抗原情况[9]。(3)自身抗体，对于因自身抗体而发生溶血的患者，当血液样本储存温度低于37℃时，血细胞则会出现凝集，进而对正反定型判断产生不利影响。为避免因自身抗体所产生的影响，通过使用37℃生理盐水洗涤三次血液样本，或者是将反定型试管置于37℃温水中进行10～30 min水浴处理，之后再实施血型鉴定[10]。

综上所述，在将试验操作技术以及人为因素排除后，发现导致ABO正反定型不符合的主要影响因素是ABO血型不符合造血干细胞移植、恶性血液疾病和自身抗体，通过实施针对性辅助试验和全面掌握患者临床资料，可对血型进行准确区分。