复方舒心康对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血的影响

于 莹，张虎娟，董培良，梁 浩，张淑香，张晓燕，周忠光*

（1.黑龙江中医药大学中医药研究院，哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学研究生院，哈尔滨 150040；3.黑龙江省中医药科学院，哈尔滨 150036）

心肌缺血是因为机体对心脏血流量的供应减少，导致对心脏的供氧减少，心肌代谢紊乱，心脏不能正常发挥生理功能的病理状态。缺血性心脏病包括心绞痛、心肌梗死、冠心病等，因为其高患病率和高死亡率，引起全世界广泛关注。全球疾病负担（GBD）研究结果显示，2017 年世界范围内的缺血性心脏病新发病例1 000 多万，现患病例 1 亿2 000 万，并导致 800 多万人死亡，是全球人口死亡的首位原因[1-2]。随着居民经济水平的好转和生活习惯的改变，我国罹患缺血性心脏病的人数不断升高，2015 年全国死于缺血性心脏病的人数达到150 万，是我国居民仅次于脑血管病的第2 位死亡原因[3]。本研究采用的蒙药复方舒心康是由内蒙古民族大学第二临床医学院蒙医科专家哈斯额尔登根据《蒙医金匮》中的经典方剂（由广枣、木棉花、苦参、紫檀香、沉香5 味中药组成），结合当代人的体质以及方药经济性等因素，将原方中苦参与沉香改为丹参与诃子，并命名为舒心康（原文载其治疗普行赫依偏盛，赫依、血运行障碍，心脉循行受阻）。目前，对该方的实验研究较少。本研究观察该方对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血的影响，为该方治疗缺血性心脏病提供理论依据。

异丙肾上腺素是β 受体激动剂，作用于心脏β1受体，导致心肌收缩力过强、过快，可收缩冠状血管，使心肌耗氧量超过供氧量，最终出现心肌缺血、坏死现象[4]。异丙肾上腺素作用于大鼠，会造成大鼠急性心肌缺血性损伤，这种损伤与人类急性心肌缺血的症状类似，所以可将异丙肾上腺素致大鼠急性心肌损伤作为研究抗心肌缺血类药物的动物模型[5-6]。大鼠心电图（ECG）的J 点位移值也是评价心肌缺血的指标，通过观察ECG 中J 点变化，当J 点上升或下降超过0.1 mV 即为心肌缺血[7]。通过研究该复方（SXK）对大鼠血液和心肌组织中GSH-Px、SOD 和 MDA 等生化指标和心肌坏死面积，探讨其抗异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的作用。

1 材料与方法

1.1 动物 健康SD 大鼠50 只，雄性，体质量200～250 g，由黑龙江中医药大学药物安全性评价中心生产[SCXK（黑色）2013-004]。本实验经黑龙江中医药大学实验动物伦理委员会评审通过（批准号：2019032101）。

1.2 仪器 756PC Spectrum 紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；BL-420F 生物机能实验系统；KY2000 半自动生化分析仪（日本岛津公司）。

1.3 试剂 GSH-Px 检测盒（批号：20180626）、SOD试剂盒（批号：20181105）和MDA 试剂盒（批号：20171214）在南京建成生物工程研究所购买。

1.4 药物 盐酸异丙肾上腺素（美国Sigma 公司）；自制中药复方舒心康（广枣、丹参、檀香、诃子、木棉花的水提物）；地奥心血康胶囊（成都地奥集团有限公司）。

2 方法

2.1 异丙肾上腺素诱导的急性心肌缺血模型的建立 将大鼠随机分成空白组、模型组、SXK 高、中、低剂量组和阳性对照药（地奥心血康胶囊）组，将SXK 的水提物用水溶解，依照正常给药剂量按体表面积折算，给药剂量分别为高、中、低剂量组：4 mL（相当于SXK 的水提物干燥后 40.0、20.0、10.0 mg/kg），灌胃给药。阳性对照组：4 mL（相当于地奥心血康42 mg/kg）。空白组和模型组大鼠予4 mL 的蒸馏水，所有大鼠连续灌胃15 d，每日1 次。依据文献报道[8]和预试，从第13 天开始，除了空白组，其余各组均按照5 mg/kg 的剂量腹腔注射异丙肾上腺素，每日1 次，连续3 d。

2.2 检测指标及方法

2.2.1 心电图检测 末次灌胃后，腹腔注射10%水合氯醛（3 mL/kg）麻醉，将麻醉好的大鼠仰卧固定，将BL-420F 生物机能系统针头电极插入其四肢皮下，拍摄标准Ⅱ型心电图，观察造模前后大鼠心电图变化，将造模前大鼠心电图J 点位移和T 波变化和建模后对比[13]。

2.2.2 血清中GSH-Px，SOD，MDA 测定 ECG 记录之后，大鼠腹主动脉插管取血，取一部分血浆，3 500 转/min 离心10 min，取血清，冻存于-80℃冰箱备用。按试剂盒说明书操作测定血清中GSH-Px、SOD、MDA 的活性或者含量。

2.2.3 心肌组织病理切片制备 取大鼠心脏尖部，用10%甲醛保存固定，HE 染色后用光学显微镜对心肌组织进行观察。

2.3 统计学方法 应用SPSS 17.0 软件对数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

3 结果

3.1 各组大鼠心电图改变情况比较 注射异丙肾上腺素后，与对照组比较，模型组的T 波增大，J 点下移，显示心肌缺血造成；与模型组比较，舒心康高剂量能显著改善J 点和 T 波变化幅度（P＜0.05）。见表1。

表1 各组大鼠心电图改变情况比较（，n =10）mV

表1 各组大鼠心电图改变情况比较（，n =10）mV

注：与空白组比较，## P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.05，△△P ＜0.01

3.2 各组大鼠血清中GSH-Px、SOD、MDA 指标比较 注射异丙肾上腺素后，大鼠血清中GSH-Px、SOD活性显著降低，MDA 水平显著升高。与模型组相比，舒心康3 个剂量组大鼠血清中GSH-Px、SOD 活力均有一定程度升高，MDA 含量降低，其中，舒心康高剂量能显著升高大鼠血清中GSH-Px 活力（P＜0.05），能显著降低大鼠血清中MDA 含量（P＜0.05）。见表2。

表2 各组大鼠血清中GSH-Px、SOD、MDA 指标比较（，n =10）

表2 各组大鼠血清中GSH-Px、SOD、MDA 指标比较（，n =10）

注：与空白组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.05

3.3 各组大鼠心肌组织病理切片比较 空白组心肌细胞排列整齐，无明显变性坏死，细胞间质无炎性细胞浸润。与空白对照组比较，模型组心肌组织有明显的缺血性损伤，主要是心肌纤维功能紊乱，间质水肿变性，心肌细胞呈空泡变性，胞浆染色不均等形态结构病变。舒心康干预后可以不同程度降低心肌坏死面积，舒心康的剂量增加后，这种趋势越来越明显，表明舒心康可降低组异丙肾上腺素引起的心肌坏死程度，见图1。

图1 各组大鼠心肌组织病理切片比较（HE，×400）

4 讨论

缺血性心脏病的发病原因和氧自由基的大量堆积关系密切[9-11]，心肌缺氧缺血会诱发氧化应激反应，中性粒细胞大量聚集，导致氧自由基迅速生成[12]，使细胞膜脂质过氧化，致细胞膜的结构发生变化，细胞功能异常，引起心肌组织损伤[13]。GSH-Px 和SOD 是一种内源性酶清除剂，可以抵消自由基的氧化破坏，丙二醛（MDA）是一种稳定的脂质过氧化的醛酸类产物，被广泛用于反映氧化应激的水平[14-15]。本实验中的舒心康高剂量组有较强的抗氧化能力，与模型组相比，给药组大鼠心肌组织中GSH-Px 和SOD 活性显著增加，并且脂质过氧化物MDA 明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05 或P＜0.01），表明舒心康能抑制脂质过氧化的过程，可减轻氧自由基对心肌的伤害，保护心肌。

本实验结果表明，大鼠口服舒心康后能有效抑制异丙肾上腺素所致心肌组织缺血，使血清中GSH-Px及SOD 活力升高，MDA 含量降低，说明舒心康具有保护心肌细胞，具有提高细胞膜稳定性的作用；心电图的变化可反映出心肌缺血的程度，结合模型组与用药组大鼠心电图的对比，发现舒心康能明显改变大鼠心电图中T 波增大及J 点下移的变化趋势；从大鼠心肌组织病理切片上可以看出，服用舒心康后大鼠心肌变性部位的炎性细胞浸润、心肌纤维排列紊乱和肌丝溶解等病变症状得到一定程度的改善。

综上所述，本实验结果表明，舒心康能保护心肌免受损伤，具有较好的治疗缺血性心脏病的作用，能有效抑制异丙肾上腺素导致的大鼠心肌缺血，保护心肌细胞，具有较好的治疗缺血性心脏病的作用。