益气软肝方对小鼠急性肝损伤的护肝疗效评价

曹 允

（北京农业职业学院，北京 102442）

益气软肝方作为传统中药方剂在临床应用多年，有一定的抗纤维化、预防肝硬化的作[1]。本实验旨在评价益气软肝方对高浓度酒精造成的急性肝损伤的护肝疗效，并为研究中药对小鼠肝损伤的护肝效果提供方法和支持。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 药物黄芪、白术、丹参、川芎、桃仁、鳖甲、生牡蛎、炙甘草（均购于北京宣内药品有限责任公司）、护肝片（202005074，0.35 g/片，葵花药业）、白酒（46°，牛栏山）

1.1.2 实验动物SPF级昆明种小鼠20只，8～9月龄，雌雄各半，由北京维通利华公司提供。

1.1.3 仪器设备微纳芯全自动生化仪、灌胃器、中药煎煮锅。

1.2 方法

1.2.1 药物的制备（1）益气软肝方的制备：精密称取黄芪250 g、白术100 g、丹参100 g、川芎50 g、桃仁75 g、鳖甲150 g、生牡蛎250 g、炙甘草50 g，于1 200 ml纯化水中加入鳖甲和生牡蛎先煎煮1 h后，将其它药材加入再煎煮1 h。煎煮后中药药液灌装于密闭瓶中备用。（2）药物对照品的制备：取5 g护肝片研细，加7 ml生理盐水，每次灌胃前混匀。

1.2.2 小鼠肝损模型取小鼠60只，喂养2 d适应环境。所有小鼠以46°白酒每天以0.015 ml/g进行灌胃，连续灌胃1周，检测其中15只小鼠的肝功能。

1.2.3 益气软肝方对肝损小鼠护肝的疗效实验余下小鼠随机分3组，每组15只。第1组每天以基础饲料喂养，不给药物作为阳性对照组；第2组每天以0.015 ml/g灌胃益气软肝方药液，作为试验组；第3组每天以0.015 ml/g灌胃护肝片溶液，作为药物对照组。所有小鼠连续灌胃1周后检测肝功能。

1.2.4 数据分析所有数据经过Excel2010初步整理计算后，采用SPSS（Version16.0）软件，对小鼠肝脏功能指标进行单因素方差分析。数据以平均值±标准误表示，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 小鼠肝损后肝功检测指标

小鼠经高浓度白酒灌胃一周后，通过全自动生化仪检测其肝功能后发现，小鼠的肝脏有损伤，主要表现在球蛋白（GLB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、间接胆红素的异常升高，对肝脏其它指标如γ-谷氨酰基转移酶（γ-GGT）未见明显影响。实验结果见表1。

表1 小鼠肝损后肝功能指标（n=15）

2.2 用保肝药后小鼠肝功能检测指标

（1）肝损小鼠进行一周灌药护肝试验后，阳性对照组小鼠（未给药）GLB无明显改善，ALT、AST逐渐恢复，但依然在比较高的水平，间接胆红素比之前还有所升高。

（2）试验组（益气软肝方）GLB略有下降但依然偏高，ALT和AST恢复到正常水平，恢复水平较阳性对照组差异明显（P＜0.05）；间接胆红素偏高但比阳性对照组回落的快，且差异明显（P＜0.05）；对γ-GGT的影响与阳性对照组相较差异不显著（P＞0.05）。

（3）药物对照组小鼠（护肝片）GLB、间接胆红素无明显改善且有提升，ALT和AST恢复到正常水平。

（4）试验组与药物对照组相比，前者对GLB的疗效较好，且差异显著（P＜0.05）；对ALT和AST疗效两组均能恢复至正常水平；对间接胆红素疗效较药物对照组好，且差异显著（P＜0.05）。实验结果见表2。

表2 药物对肝损小鼠护肝疗效比较（n=15）

3 讨论与结论

（1）急性肝损伤是指肝细胞出现急性损伤或坏死，出现肝功能的异常。多数患者血清ALT、AST、GGT等会因为肝损伤而出现升高。导致肝损伤的原因较多，常见的病因有药物、疾病（如肝炎）或者酒精等。目前针对急性肝损伤常用的治疗方案有对因治疗、护肝降酶治疗及防治并发症。在治疗急性肝损伤中，越来越多的中药显示出显著的疗效，比如虎眼万年青总皂苷、草果、菱角壳水提混合物、阿锐布水提物对急性肝损伤有治疗作用[2～4]。益气软肝方中包含黄芪、鳖甲有补气固表、调节阴虚之功效；白术、炙甘草有健脾胃、调气虚之功效；丹参、川芎、桃仁则有活血、强血行气之功效；生牡蛎则有强肝解毒之功效。方剂中各类药物配伍合用，发挥强肝补气、活血解郁之效。

（2）肝功能检测项目主要包括转氨酶，如谷丙转氨酶、谷草转氨酶，白蛋白，球蛋白、白球比值，胆红素等多项指标，每一项内容和参考值结果对比分析，可以判断出肝脏是否出现了问题及严重程度。急性肝损伤患者的ALT及AST指标会明显上升，尤其是ALT水平会显著上升，GGT指标变化不明显[5]。在本试验中，经过灌胃一周的小鼠ALT与AST都显著升高，ALT升高几乎1倍，说明肝细胞在受到高浓度酒精破坏后发生坏死。肝损伤后阳性对照组小鼠的ALT和AST逐渐恢复接近正常水平，但依然在参考值高限边缘，提示戒除酒精后小鼠肝脏有一定自我恢复能力，但需要较长的时间；药物对照组给1周护肝片后ALT和AST均恢复至正常水平；试验组给1周益气软肝方后ALT和AST也恢复至正常水平，但降低水平不及药物对照组。

（3）胆红素浓度越高，肝细胞的损伤越重，胆汁淤积的发生率越高。有些人群高间接胆红素血症肝功能损伤是可逆的[6]。在本试验中，灌胃一周的小鼠间接胆红素有所升高，提示出现肝损伤后胆红素代谢出现障碍；后期无论是给药组或不给药组对间接胆红素效果均不佳，可能是护肝时间过短，胆红素代谢障碍无改善。

（4）肝脏球蛋白升高主要见肝脏出现炎症，本试验中酒精造成的肝损伤是出现球蛋白升高的主要原因。后期给药与自愈都未在短期内对炎症有比较好的效果，益气软肝方组恢复的要稍强一些。

4 结论

中药益气软肝方对酒精造成的急性肝损伤有一定的保护疗效，能在1周内恢复ALT和AST至正常水平。对于酒精造成的肝脏炎症，中药无法在短期内改善，益气软肝方的恢复炎症的效果相较于护肝片效果稍佳。因此，对于酒精造成的急性肝损伤，在临床中应该首先戒酒，然后建议使用中药方剂保护肝脏。